一种氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上残留检测方法技术

本发明专利技术公开了一种氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上残留检测方法。该方法改良了QuEChERS前处理技术(样品经提取液(乙腈：水：乙酸＝79：20：1)提取，采用PSA和C18净化处理)，结合超高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上残留检测方法


[0001]本专利技术涉及一种氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上残留检测方法，属于农药残留检测


技术介绍

[0002]人参(Panax ginseng C.A.Mey)，是五加科多年生草本植物。在中国，人参历来被视为百草之王，滋补上品。人参提取物是从五加科植物人参的根、茎叶中提取精制而成，其富含十八种人参单体皂甙，主要适用于冠心病、心绞痛、心率过缓或过快、室性早博、血压失调、神经衰弱、更年期综合症、疲劳过度，病后、产后或术后身体虚弱等症状；久服可以延年益寿，并能增强体力，治疗癌症患者因放疗和化疗引起的免疫功能低下等症，同时还具有增强人体表面细胞的活力，抑制衰老等作用。近些年来，人参提取物出口成逐年增长之势，而欧美等国对进口的人参提取物的农残限量把控的很严。
[0003]氟吡菌胺，化学名：2,6
‑
二氯
‑
N
‑
[(3
‑
氯
‑5‑
三氟甲基
‑2‑
吡啶基)甲基]苯甲酰胺，是一种吡唑酰胺类广谱杀菌剂，能从植物叶基向叶尖方向传导，该药保护性好、渗透性强，对卵菌真纲菌病害有较高的生物活性，其代谢产物主要是2,6
‑
二氯苯甲酰胺。研究表明，氟吡菌胺可以用于防治人参根茎腐烂病、黑斑病等。
[0004]氰霜唑，化学名：4
‑
氯
‑2‑
氰基
‑
N,N
‑
二甲基<br/>‑5‑
对甲苯基咪唑
‑1‑
磺酰胺，为线粒体呼吸抑制剂，对卵菌所有生长阶段均有抑制作用，对霜霉病、疫病、根肿病、猝倒病等有特效，其代谢产物主要是4
‑
氯
‑5‑
(4
‑
甲苯基)
‑
1H
‑
咪唑
‑2‑
腈，研究表明，氰霜唑可以防治人参疫病。
[0005]目前，我国正在进行氟吡菌胺防治人参腐烂病、黑斑病的正式登记，氰霜唑正在进行防治人参疫病的探索，急需提供氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上安全使用的技术支持。欧盟规定氟吡菌胺在人参中的MRL是7mg/kg，氰霜唑是0.05mg/kg；美国规定氰霜唑在人参中的MRL是0.3mg/kg，到目前为止还未有在人参中同时检测氟吡菌胺及代谢物2,6
‑
二氯苯甲酰胺，氰霜唑及其代谢物4
‑
氯
‑5‑
(4
‑
甲苯基)
‑
1H
‑
咪唑
‑2‑
腈的残留方法的报道。本专利技术首次建立了人参中氟吡菌胺及其代谢物2,6
‑
二氯苯甲酰胺，氰霜唑及其代谢物4
‑
氯
‑5‑
(4
‑
甲苯基)
ꢀ‑
1H
‑
咪唑
‑2‑
腈的残留量分析方法，为其在人参上的风险评估及其安全使用研究提供检测依据。

技术实现思路

[0006]本专利技术克服了上述现有技术的不足，提供了一种氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上残留检测方法。该方法改良了QuEChERS前处理技术，结合超高效液相色谱
‑
质谱联用仪 (Ultra
‑
high performance liquid chromatography
‑
tandem mass spectrometry，UPLC
‑
MS/MS)，建立了一套同时检测人参中药材中氟吡菌胺、2,6
‑
二氯苯甲酰胺、氰霜唑和4
‑
氯
‑5‑
(4
‑
甲苯基)
‑
1H
‑
咪唑
‑2‑
腈的残留检测方法，该方法前处理过程快速简单，仪器分析灵敏度好，方法准确度高，可为开展氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上的风险评估及
其安全使用研究提供检测依据。
[0007]本专利技术的技术方案是：一种氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上残留检测方法，其特征是，
[0008]1)前处理
[0009]将干人参加入提取液(乙腈：水：乙酸＝79：20：1)进行提取后，取上清液，加入柠檬酸钠、氯化钠、PSA和C18进行分散固相萃取(QuEChERS)，然后高速离心，取上清液，加水稀释，过滤，得到待测液；
[0010]2)检测
[0011]以ACQUITY UPLC BEH C18为色谱柱，采用超高效液相色谱
‑
质谱联用仪对人参中氟吡菌胺、2,6
‑
二氯苯甲酰胺、氰霜唑和4
‑
氯
‑5‑
(4
‑
甲苯基)
‑
1H
‑
咪唑
‑2‑
腈共4种目标化合物的残留进行定量。
[0012]上述超高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18，2.1
×
50mm, i.d.1.7μm；柱温：40℃；进样体积：2.0μL；流动相A：水(0.1％甲酸)，流动相B：甲醇(0.1％甲酸)；流速：0.3mL/min；梯度洗脱，洗脱程序如下表1。
[0013]上述超高效液相色谱
‑
质谱联用仪的质谱条件为：离子源：电喷雾电离源(ESI
+
)；干燥气温度(Gas Temp)：130℃；干燥气流量(Gas Flow)：11L/min；雾化器压力(Nebulizer)： 25psi；鞘气温度(Sheath Gas Temp)：400℃；鞘气流量(Sheath Gas Flow)：12L/min；毛细管电压(Capilary)：3500V；喷嘴电压(Nozzle Voltage)：500V(正离子)；扫描模式：正离子扫描；监测模式：多反应监测(MRM)；定性离子对(m/z)定量离子对(m/z)和扫描模式如表2所示。
[0014]优选的，所述步骤1)的提取和分散固相萃取均采用涡旋震荡的方式。
[0015]优选的，所述步骤1)的前处理步骤如下：称取1.0g粉碎后的干人参于塑料离心管中，加入10mL提取液(乙腈：水：乙酸＝79：20：1)，涡旋震荡5min后，取上清液5mL，加入柠檬酸钠0.1g，氯化钠2g，PSA 0.1g，C18 0.1g，涡旋振荡5min后静置30min，4000r/min 高速离心5min后，取1mL上清液，加入1mL水，涡旋振荡30s，过0.22μm的有机滤膜，上机备用。
[0016]进一步的，本专利技术采用基质匹配的标准溶液曲线对4种目标化合物进行定量。
[0017]本专利技术的技术效果是：
[0018]1、经试验证明，改良后的QuEChERS法(样品经提取液(乙腈：水：乙酸＝79本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上残留检测方法，其特征是，1)前处理将干人参加入提取液进行提取后，取上清液，加入柠檬酸钠、氯化钠、PSA和C18进行分散固相萃取，然后高速离心，取上清液，加水稀释，过滤，得到待测液；所述提取液的成分为乙腈、水和乙酸；2)检测以ACQUITY UPLC BEH C18为色谱柱，采用超高效液相色谱
‑
质谱联用仪对人参中氟吡菌胺、2,6
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二氯苯甲酰胺、氰霜唑和4
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氯
‑5‑
(4
‑
甲苯基)
‑
1H
‑
咪唑
‑2‑
腈共4种目标化合物的残留进行定量。2.如权利要求1所述的一种氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上残留检测方法，其特征是，所述提取液的成分为，按体积比计，乙腈：水：乙酸＝79：20：1。3.如权利要求1所述的一种氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上残留检测方法，其特征是，所述超高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18，2.1
×
50mm,i.d.1.7μm；柱温：40℃；进样体积：2.0μL；流动相A：含0.1％甲酸的水，流动相B：含0.1％甲酸的甲醇；流速：0.3mL/min，梯度洗脱。4.如权利要求3所述的一种氟吡菌胺、氰霜唑及其代谢物在人参上残留检测方法，其特征是，所述洗脱程序如下表：时间/minA/％B/％流速/mL/min0.0090100.3001.0090100.3003.5010900.3004.0010900.3005.0090100...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁京芸，董崭，方丽萍，官帅，宁明晓，崔凯，丁蕊艳，李腾，王剑，
申请(专利权)人：山东省农业科学院，
类型：发明
国别省市：