一株伯克霍尔德氏菌BJQ0011培养方法及其在催化合成白酒风味酯中的应用技术

本发明专利技术属于微生物技术领域，具体涉及一种细菌属伯克霍尔德氏菌(Burkholderia anthina)BJQ0011培养方法及其在催化合成白酒风味酯中的应用。本发明专利技术公开的伯克霍尔德氏菌BJQ0011，具有在水相体系中高效催化合成白酒风味酯己酸乙酯、辛酸乙酯、癸酸乙酯的能力，产量分别为12.52

【技术实现步骤摘要】
一株伯克霍尔德氏菌BJQ0011培养方法及其在催化合成白酒风味酯中的应用


[0001]本专利技术属于微生物
，尤其涉及一种伯克霍尔德氏菌BJQ0011的培养方法及其在催化合成白酒风味酯己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯中的应用。

技术介绍

[0002]白酒中乙醇和水的含量约占白酒总量的98％，风味物质占总量的2％左右，是白酒中的微量成分，对白酒的品质起到决定性的作用。目前这些微量成分有2000多种，包括酯类、醇类、酸类、醛酮类、杂环化合物、羰基化合物等，目前研究表明，酯类在所有微量成分中对白酒的风味贡献度最大，是香气的主体成分。酯类主要给白酒提供了水果香、花香和甜味，其含量和比例的不同导致不同白酒产品呈现出有差异的风味特征。浓香型白酒是以己酸乙酯为主体复合香的白酒，其中己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯等小分子脂肪酸乙酯是决定白酒香型和品质的重要酯类物质。实际生产中，将酒体中己酸乙酯等小分子脂肪酸乙酯含量的高低作为产品品质的重要衡量参数已成为业内共识。然而，由于酿造过程产酯生香慢，即己酸乙酯、辛酸乙酯、癸酸乙酯等其他酯类的合成效率低，导致酿造生香周期长且优质酒出酒率低，而己酸乙酯等重要酯类含量偏低历来是浓香型白酒品质差和优质酒出酒率低的关键原因之一。研究表明白酒发酵过程大量的酯类物质是由微生物代谢产生的。因此，筛选具有合成小分子脂肪酸乙酯的功能性微生物，可以理性调控发酵过程，促进风味酯的原位合成，从根本上保障发酵白酒品质，丰富白酒酯合成微生物资源。
[0003]因此，本专利技术的目的是提供一株优质的微生物资源伯克霍尔德氏菌BJQ0011的培养方法及其在催化合成白酒风味酯中的应用，具有促进白酒中有益风味酯类物质己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯的产生，为白酒发酵过程酯的合成提供优选的微生物资源。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种伯克霍尔德氏菌BJQ0011的培养方法及其在水相体系中催化合成己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯中的应用。
[0005]本专利技术是通过以下技术方案来实现：
[0006]本专利技术公开了一种伯克霍尔德氏菌BJQ0011的培养方法及其合成白酒风味酯的应用。所述培养方法其培养基组成为：高粱粉5.0g/L；蛋白胨10.0g/L，K2HPO
4 1.0g/L，(NH4)2SO
4 1.0g/L，MgSO
4 0.8g/L，橄榄油10.0mL/L。培养条件为：30
±
2℃，150
±
50rpm，振荡培养2
‑
5d。
[0007]本专利技术还公开了一种伯克霍尔德氏菌BJQ0011在水相体系中催化合成白酒风味酯己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯中的应用。
[0008]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果：
[0009]本专利技术利用微生物技术，优化培养伯克霍尔德氏菌BJQ0011，以其制备粗酶制剂，经验证其具有在水相体系中催化合成己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯的能力，产量分别为
12.52
±
1.20、219.23
±
1.38、309.42
±
12.59mg/L。本专利技术提供的伯克霍尔德氏菌BJQ0011培养方法所得微生物及其粗酶制剂，具有在白酒酿造的水相体系中催化合成重要风味酯己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯的能力。
[0010]本专利技术所述的伯克霍尔德氏菌BJQ0011培养方法所制备粗酶液，可用于在水相体系中高效催化合成己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯，为提升白酒的风味和品质提供参考价值。
[0011]保藏说明
[0012]本专利技术的伯克霍尔德氏菌(Burkholderia anthina)保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地点为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号为CGMCC No.24187，保藏日期为2021年12月29日。
附图说明
[0013]图1为伯克霍尔德氏菌BJQ0011催化合成戊酸乙酯、己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯的氮源(A)和碳源(B)优化结果
[0014]图2为伯克霍尔德氏菌BJQ0011催化合成戊酸乙酯、己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯气相色谱的原始图谱
[0015]图3为伯克霍尔德氏菌BJQ0011催化合成戊酸乙酯、己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯的定量计算结果
具体实施方式
[0016]下面结合具体的附图和实施例对本专利技术做进一步的详细说明，所述是对本专利技术的解释而不是限定。下述实施例中未详细述及的操作步骤或条件，均按照本领域常规技术、条件实现。
[0017]实施例1伯克霍尔德氏菌BJQ0011发酵培养的氮源和碳源优化
[0018]菌种活化：在无菌操作条件下，将伯克霍尔德氏菌BJQ0011接种于含有5mL发酵培养基的30mL试管，30
±
2℃、150
±
50rpm，振荡培养1
‑
2d。
[0019]氮源优化发酵培养：在无菌操作条件下，将活化的伯克霍尔德氏菌BJQ0011接种于含有100mL发酵培养基的300mL三角瓶，30
±
2℃，150
±
50rpm，振荡培养2
‑
5d。培养后的发酵液按照实施例2制备粗酶液，所得粗酶液按照实施例3进行酯合成能力的测定，依据酯合成量的高低确定最优氮源。
[0020]所述的发酵培养基，其组成为：蔗糖5.0g/L，K2HPO
4 1.0g/L，(NH4)2SO
4 1.0g/L，MgSO
4 0.8g/L，橄榄油10.0mL/L，分别添加不同种类的氮源(如图1A所示)20.0g/L，115℃高压灭菌20min。
[0021]碳源优化发酵培养：在无菌操作条件下，将活化的伯克霍尔德氏菌BJQ0011接种含有100mL发酵培养基的300mL三角瓶，30
±
2℃，150
±
50rpm，振荡培养2
‑
5d。培养后的发酵液按照实施例2制备粗酶液，所得粗酶液按照实施例3进行酯合成能力的测定，依据酯合成量的高低确定最优碳源。
[0022]所述的发酵培养基，其组成为：蛋白胨20.0g/L，K2HPO
4 1.0g/L，(NH4)2SO
4 1.0g/L，MgSO
4 0.8g/L，橄榄油10.0mL/L，分别添加不同种类的碳源(如图1B所示)5.0g/L，115℃高
压灭菌20min。
[0023]实施例2伯克霍尔德氏菌BJQ0011粗酶制剂的制备
[0024]在50mL离心管中取发酵培养基10
‑
30mL，使用超声波细胞破碎仪破碎菌体细胞，6000
×
g，离心10min，取上清液，作为粗酶制剂。
[0025]实施例3伯克霍尔德氏菌BJQ0011粗酶制剂在模拟白酒发酵的水相体系中催化酯合成能力的测定
[0026]10mL反应体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种伯克霍尔德氏菌BJQ0011培养方法，其特征在于，所述伯克霍尔德氏菌经培养后制备粗酶液，具有在水相体系中催化合成白酒风味酯己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯的特性。2.由权利要求1所述催化酯合成的培养方法，其特征在于，培养基组成包括：高粱粉5.0g/L；蛋白胨10.0g/L，K2HPO41.0g/L，(NH4)2SO41.0g/L，MgSO40.8g/L，橄榄油10.0mL/L。培养条件为30
...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐友强，李秀婷，张春生，黄明泉，赵志刚，赵东瑞，孙宝国，
申请(专利权)人：承德乾隆醉酒业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：