本发明专利技术公开了一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备方法。该方法以动物鲜血为原料，通过生物酶解技术获得一种富含血红素铁的血蛋白多肽。本发明专利技术得到的血蛋白多肽，具有多肽含量高，血红素铁含量高，分子量小，水溶性好，口感好等特点，对改善缺铁性贫血具有较好的疗效，可广泛应用于食品、医药等领域。医药等领域。
【技术实现步骤摘要】
一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备
[0001]本专利技术涉及动物多肽领域，特别涉及一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备。
技术介绍
[0002]市场上常见的补铁剂有硫酸亚铁、氯化亚铁、葡萄糖酸亚铁、乳酸亚铁、琥珀酸亚铁和富马酸亚铁等，这些补铁剂虽然铁含量高，但是由于它们在体内的利用率较低，毒副作用大，并且有特殊的金属铁锈味，难以长期食用。而血红素铁是一种生物态铁，可以直接被肠黏膜细胞吸收，不产生任何消化道刺激症状，生物利用率高，是更为理想的补铁剂。血红素铁是血液中的一种重要营养素，动物血液是其主要来源。动物血液是其被屠宰后最先获得的副产物，是一种营养价值较高且极具开发利用价值的动物性蛋白资源。然而在我国对动物屠宰血液的利用率却非常低，其中除部分以血粉或血豆腐等初级加工形式利用之外，相当一部分被以污水的形式排放或丢弃，利用率不到10％，致使大量宝贵营养资源流失并导致了严重的环境污染。因此利用动物血液开发生物肽类功能性食品与食品添加剂等，不仅可以提高血液利用率及畜产品的附加值，而且对延长动物血液制品的工业化生产产业链，增加农牧民经济收入和保护生态环境都具有重要意义。
[0003]目前市面中的血蛋白多肽产品未见富含血红素铁且多存在严重的苦味、腥味。未见富含血红素铁的血蛋白多肽是由于血红素铁在酶解过程中容易被氧化，并且在酶解过程中酶解不充分会导致蛋白剪切不完全，酶解过度则会导致过度沉淀析出。现有与血肽的制备申请相关的专利包括，如申请公告号为CN107164446A的“鹿血肽的制备方法及其抗疲劳作用”，申请公布号为CN105063150A的“酶解金枪鱼血蛋白降血压肽的制备方法”，申请公布号为CN107557423A的“一种骆驼血蛋白多肽的制备方法”，申请公布号为CN102367465A的“一种猪血肽的提取方法”，申请公布号为CN103589770B的“猪全血酶解为低肽和氨基酸的工业生产方法”，现有专利中未见富含血红素铁的血蛋白多肽的制备。本专利技术针对现有研发现状，提供一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的是提供一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备方法。
[0005]本专利技术采取的技术方案为：
[0006]一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备方法，包括以下步骤：
[0007](1)原料处理：新鲜牛血从屠宰场收集后，迅速加入柠檬酸钠抗凝，离心弃血浆，收集血红细胞；采用高压均质机进行高剪切细胞膜破碎；避光条件下50℃加热30min，得到血红蛋白。
[0008](2)酶解：在特定的温度和pH下按一定量的料液比加入蛋白酶进行酶解；
[0009](3)超滤浓缩：超滤膜截留分子量为6000
‑
30000，采用单效浓缩进行浓缩；
[0010](4)干燥：采用喷雾干燥法。
[0011]其中，所述步骤(1)中的血液主要为牛血或羊血。
[0012]步骤(2)酶解的方法为：以料液比1∶10～20加入适量的纯化水，酶的用量为动物鲜血重量的5.0
‰
～10.0
‰
加入胰蛋白酶和风味蛋白酶，酶解时间8h，其中前6h酶解温度45℃，pH＝7.5，后2h酶解温度55℃，pH＝7，煮沸0.5h灭酶。
[0013]步骤(4)喷雾干燥条件为进风温度160～180℃，出风温度80～100℃。
[0014]与现有血蛋白多肽专利相比，本专利技术具有以下优点和有益效果：
[0015](1)本专利技术采用特殊的原料处理方式：采用高压均质机进行高剪切细胞膜破碎，不仅有利于提高效率，还提高了蛋白含量；进一步结合物理变性方法，避光条件下50℃加热30min，去除了变性的杂蛋白，得到较纯的血红蛋白，使血红蛋白含量高达90％以上。
[0016](2)本专利技术筛选特殊酶配进行酶解，得到富含血红素铁的血蛋白多肽，与传统补铁剂相比可直接被肠黏膜细胞吸收，不产生任何消化道刺激症状。
具体实施方式
[0017]下文详细叙述本专利技术的实施例，需要说明的是，本实施例是叙述性的，不是限定性的，不能以此限定本专利技术的保护范围。
[0018]对比实施例1原料处理
[0019]分别采用水溶胀法、高剪切破碎方法、生理盐水洗涤破壁法对牛血、羊血进行破壁处理，试验结果见表1、表2。
[0020]表1 不同破壁处理方式所得牛血血红蛋白(BHb g/L)
[0021][0022]表2 不同破壁处理方式所得羊血血红蛋白(BHb g/L)
[0023][0024]从表1、表2的数据可以看出，与传统的水溶胀法破壁血红细胞、生理盐水洗涤破壁血红细胞相比，采用高剪切破碎方法破壁更方便、快捷、有效，在控制产品钠含量的同时，降低了生产过程中的能耗，提高了血红蛋白含量。同时，通过进一步结合物理变性方法，在保证血红蛋白生物活性的基础上，去除变性的杂蛋白，使血红蛋白含量高达90％以上。
[0025]结合血红蛋白溶出量及实际生产效率，采用高剪切细胞膜破碎的方法对动物血液进行前处理。
[0026]对比实施例2不同酶制剂酶解效果及血红素铁含量对比
[0027]为筛选得到富含血红素铁的血蛋白多肽的最佳酶制剂，分别考察胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶3种酶对牛血酶解效果，以多肽含量、澄清度和铁含量为指标。表3为不同酶制剂酶解处理后所得多肽含量及血红素铁含量。从表3中数据可以看出，在各自的最佳
水解条件下，经胰蛋白酶加风味蛋白酶酶解处理后的多肽含量、澄清度和铁含量最高，效果最好。结合试验数据，采用胰蛋白酶与风味蛋白酶双酶酶解牛血蛋白，所得多肽含量及产品铁含量相对最高，溶液澄清度最佳，适合产业化生产。
[0028]表3 不同酶制剂酶解效果及血红素铁含量
[0029][0030]实施例1
[0031]一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备方法，包括以下步骤：
[0032](1)原料处理：新鲜牛血从屠宰场收集后，迅速加入柠檬酸钠抗凝，离心弃血浆，收集血红细胞；采用高压均质机进行高剪切细胞膜破碎；避光条件下50℃加热30min，得到血红蛋白。
[0033](2)酶解：以料液比1∶10加入适量的纯化水搅拌均匀，调节溶液维持温度45℃，pH7.5为动物鲜血重量的6.0
‰
加入胰蛋白酶，酶解处理6h，然后条件溶液温度为55℃，pH7的条件下加入按为动物鲜血重量的8.0
‰
加入风味蛋白酶，酶解时间2h酶解温度，酶解结束，煮沸0.5h灭酶。
[0034](3)采用膜孔径为10KD的超滤膜进行分子截留。
[0035](4)超滤后的酶解液进行单效浓缩至浓度30～50。
[0036](5)干燥：采用喷雾干燥法，其中进风温度160℃，出风温度85℃。
[0037]上述方法所得血蛋白多肽含量为88.26％，其中铁含量为2659.86mg/kg
[0038]实施例2
[0039]一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备方法，包括本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备，其制备方法包括以下步骤：(1)原料处理；(2)酶处理；(3)超滤浓缩；(4)干燥，即得。2.根据权利要求1所述的一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备方法，其特征在于，步骤(1)原料处理为将新鲜动物血从屠宰场收集后，迅速加入柠檬酸钠抗凝，离心弃血浆，收集血红细胞；采用高压均质机进行高剪切细胞膜破碎；避光条件下50℃加热30min，得到血红蛋白。3.根据权利要求1所述的一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备方法，其特征在于，步骤(2)中酶解处理方法为将预处理的血蛋白，以料液比1∶10～20加入适量的纯化水，酶的用量为动物鲜血重量的5.0
‰
～10.0
‰
加入胰蛋白酶和风味蛋白酶，酶解时间8h，其中前6h酶解温度45℃，pH＝7.5，后2h酶解温度55℃，pH＝7，煮沸0.5h灭酶。4.根据权利要求1所述的一种富含血红素铁的血蛋白多肽的制备方法，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘菲菲，隋岩，杜慧颖，郑志浩，
申请(专利权)人：内蒙古天奇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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