乳酸片球菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及乳酸片球菌及其应用。具体地，本发明专利技术分离出一株新的乳酸片球菌，该菌株可用于粕类的发酵。在与其他乳酸菌混合用于粕类的发酵，不仅可以增加粕类发酵酸度，且可以降低其他菌对粕类酸溶蛋白的消耗，增加发酵粕类时酸溶蛋白的含量；同时，本发明专利技术的乳酸片球菌混合发酵粕类时，与背景技术中的现有技术相比，料水比较高，可以减少烘干成本。本发明专利技术还涉及该菌株与其他乳酸菌的组合应用。该菌株与其他乳酸菌的组合应用。

【技术实现步骤摘要】
乳酸片球菌及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物领域。更具体地，本专利技术涉及从西藏臧酥油中分离的乳酸片球菌中筛选到的一株新的乳酸片球菌。本专利技术还涉及所述新的乳酸片球菌的应用。

技术介绍

[0002]由于鱼类资源的短缺和血浆粉同源污染的风险，利用植物源蛋白取代动物蛋白成为研发的热点。植物源蛋白包括豆粕、棉粕、花生粕、葵粕等。由于植物源蛋白存在抗营养因子和适口性差等因素，限制了植物源蛋白的使用。通过发酵的手段可有效降解植物源蛋白的抗营养因子，并可增加其适口性。
[0003]粕类发酵是利用一种或几种微生物作用于粕，在一定条件下进行发酵，经过干燥粉碎等后处理得到的产品，其生产工艺分为耗氧发酵、厌氧发酵以及分段式发酵。耗氧发酵采用耗氧菌，使用浅盘或发酵床进行发酵。该发酵模式优点为发酵周期短，抗营养因子降解明显，产品中富含大量芽孢杆菌；缺点是发酵工艺复杂，发酵过程损耗较高，产业化投资较大。厌氧发酵以厌氧菌发酵为主，结合蛋白酶的添加，该发酵模式抗营养因子和不良寡糖消除彻底，产品适口性强，同时发酵工艺简单，发酵过程损耗较低。
[0004]由于厌氧发酵低耗能、高收率、工艺简单等优点，成为粕类发酵的热点。由于厌氧发酵原料不灭菌，如何控制厌氧发酵过程中杂菌的生长较为重要，一般采用在发酵过程添加乳酸菌，起到抑制杂菌生长的作用。在既有的报道中，多采用混合乳酸菌进行发酵，近期相关研究如下：张佳斌等人，采用不同益生菌进行发酵豆粕发酵，保加利亚乳杆菌结合嗜热链球菌两株进行发酵豆粕的发酵，料水比等于1:1.4、接种量达9%时，所得产品最低pH仅降到5左右，双菌株发酵，pH偏高酸度低，且料水比偏低，烘干成本高（张佳斌,张雪芳,李利君,肖琼,翁惠芬,倪辉,肖安风，不同益生菌固态发酵豆粕的工艺研究[J].集美大学学报(自然科学版),2018,23(03):178
‑
186）。
[0005]吝常华等研究发酵豆粕生产工艺，以解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌、酿酒酵母混菌进行发酵，接种量为15%、温度为31℃、料水比为1.0∶1.0，发酵时间为120 h，所得产品pH降至5.21，偏高，且料水比偏低，烘干成本偏高（吝常华,刘国华,常文环,张姝,郑爱娟,邓雪娟,蔡辉益.豆粕微生物固态发酵工艺优化及其营养物质含量变化[J].动物营养学报,2018,30(07):2749
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2762）。
[0006]豆粕是主要的饲料蛋白，但由于其抗营养因子的存在，尤其是大分子抗原蛋白的存在，易导致动物消化道功能障碍，尤其是断奶的动物。通过发酵可以消除或降低抗营养因子，如将大分子抗原蛋白降解为小分子的蛋白或者肽。可以用酸溶蛋白来表示大分子抗原蛋白降解情况，酸溶蛋白越高，大分子抗原蛋白降解越完全；酸溶蛋白越低，大分子抗原蛋白降解越少。发酵豆粕的发酵方式包括厌氧发酵、好氧发酵和分段式发酵。其中耗氧发酵通过耗氧菌的生长产生的蛋白酶等降解豆粕中的抗营养因子。厌氧发酵通过添加蛋白酶降解抗原蛋白，并通过添加乳酸菌产生抑菌物质，如有机酸（通过酸度来表示）、抗菌肽等，提升
发酵过程中的微生物安全性，并增加豆粕的适口性，而且此类发酵豆粕用于饲料配方中，可减少外源有机酸的添加，节约饲料成本。
[0007]本领域仍然需要能够用于粕类发酵的性能更好的微生物。

技术实现思路

[0008]本专利技术人从西藏臧酥油中筛选到一株乳酸片球菌，一方面可单独用于粕类的发酵，另一方面可与其他乳酸菌混合用于粕类的发酵，不仅可以增加粕类发酵酸度，且可以降低其他菌对粕类酸溶蛋白的消耗，增加发酵粕类时酸溶蛋白的含量。
[0009]一方面，本专利技术涉及乳酸片球菌菌株，其16s rDNA如SEQ ID NO:1所示。
[0010]在一个实施方案中，所述乳酸片球菌菌株是保藏号为CGMCC NO. 21508 的乳酸片球菌菌株。
[0011]在一个实施方案中，所述乳酸片球菌菌株的形式是活细菌、死细菌或其细胞组分。
[0012]在一个实施方案中，所述乳酸片球菌菌株是分离的形式。本文使用的术语“分离的”意指从其天然环境分离出来。
[0013]在一个实施方案中，所述乳酸片球菌菌株是生物纯的形式。本文使用的术语“生物纯的”是指实验室培养物形式的菌株，其基本上不含其他种类的生物。优选地，所述乳酸片球菌菌株的形式是单一生物种类的培养物。
[0014]本文使用的术语“乳酸片球菌菌株”还包括所述乳酸片球菌菌株的突变株。本文使用的术语“突变株”包括含有与SEQ ID NO:1有至少95％同一性，优选至少96％同一性，优选至少97％同一性，优选至少98％同一性，更优选至少99%同一性的核苷酸序列，而在细菌基因组的其他序列中包含突变的衍生菌株。突变株可通过基因工程技术获得，意味着有本专利技术的菌株遗传物质的改变或意味着有本专利技术菌株遗传物质与其他分子的重组。通常，为了获得这样的突变菌株，本领域技术人员可使用标准的诱变技术例如UV辐射或暴露于致诱变的化学制品。本文使用的序列“同一性”可使用本领域技术人员已知的标准技术确定。例如，同源性可使用在线的同源性算法“BLAST”程序确定，所述程序可在http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/公开获得。
[0015]本文使用的术语“乳酸片球菌菌株”还包括这样的菌株：其含有的核苷酸序列与亲本乳酸片球菌菌株的核苷酸序列SEQ ID NO:1有至少50、60、70、75、80、85或90％的同一性，优选至少95％、96%、97％、98％或99％的同一性。
[0016]另一方面，本专利技术涉及组合物，其包含上文所述的本专利技术的乳酸片球菌菌株作为活性成分。在一个实施方案中，所述组合物还包含选自植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和发酵乳杆菌的至少一种另外的菌株作为活性成分。在一个实施方案中，所述乳酸片球菌菌株与所述选自植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和发酵乳杆菌的至少一种另外的菌株是以1:9至9:1，优选1:5至5:1，最优选1:1的体积比混合的。所述组合物还可以包含干酪乳杆菌、戊糖片球菌、罗伊氏乳杆菌、德氏乳杆菌、保加利亚乳杆菌等。
[0017]在一个实施方案中，本专利技术的组合物是生物催化剂。
[0018]另一方面，本专利技术涉及发酵饲料原料的方法，其包括在饲料原料中添加本专利技术的乳酸片球菌菌株或本专利技术的组合物，并且使所述乳酸片球菌菌株，或所述乳酸片球菌菌株和所述选自植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和发酵乳杆菌的至少一种另外的菌株发酵所述饲料原
料得到所需产物。
[0019]所述组合物还可以包含干酪乳杆菌、戊糖片球菌、罗伊氏乳杆菌、德氏乳杆菌、保加利亚乳杆菌等。
[0020]另一方面，本专利技术涉及本专利技术的乳酸片球菌菌株用于提高选自植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和发酵乳杆菌的至少一种另外的菌株在发酵饲料原料过程中的发酵酸度和酸溶蛋白浓度的用途。
[0021]在一个实施方案中，所述饲料原料是粕类，可以选自棕榈仁粕、椰子粕、米糠粕、豆皮、玉米皮、豆渣、玉米胚芽粕、菜籽粕、芝麻粕等，优选地，其选自豆粕、花生粕、棉粕本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. 乳酸片球菌菌株，其包含与SEQ ID NO:1具有至少95%同一性，优选至少99%同一性的核苷酸序列，最优选地，其包含SEQ ID NO:1的核苷酸序列。2. 权利要求1的乳酸片球菌菌株，其是保藏号为CGMCC NO. 21508的乳酸片球菌菌株。3.权利要求1的乳酸片球菌菌株，其是重组菌株。4.组合物，其包含权利要求1
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3的任一项的乳酸片球菌菌株。5.权利要求4的组合物，其还包含选自植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和发酵乳杆菌的至少一种另外的菌株。6.权利要求5的组合物，其中所述乳酸片球菌菌株与所述选自植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和发酵乳杆菌的至少一种另外的菌株是以1:9至9:1，优选1:5至5:1，最优选1:1的体积比混合的。7.权利要求4

【专利技术属性】
技术研发人员：姜翠红，宋鹏，吉梦馨，宋昌春，
申请(专利权)人：丰益上海生物技术研发中心有限公司，
类型：发明
国别省市：