应用于培养杀香鱼假单胞菌的发酵培养基及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种应用于培养杀香鱼假单胞菌的发酵培养基及其制备方法。本发明专利技术人研究开发了一种新的适合于杀香鱼假单胞菌高效、高密度培养的培养基配方。本发明专利技术的培养适合于杀香鱼假单胞菌的生长，可大幅提高其发酵的密度，从而可为杀香鱼假单胞菌鱼类疫苗的制备奠定基础。定基础。

【技术实现步骤摘要】
应用于培养杀香鱼假单胞菌的发酵培养基及其制备方法


[0001]本专利技术属于生物工程
，更具体地，本专利技术涉及应用于培养杀香鱼假单胞菌的发酵培养基及其制备方法。

技术介绍

[0002]食品问题是任何国家都会关注的重要民生问题，在中国更是自古以来就有“民以食为天”的说法。随着人口的不断增长，以及不断的工业化和城镇化发展、适宜耕作的土地资源减少、淡水资源短缺、自然灾害频发等问题，对食品问题提出了这样或那样的挑战。食品的来源是多渠道的，不仅仅包括我们中国人常说的植物性“粮食”，还有动物来源的肉禽蛋奶、水产品等植物性粮食之外的重要物品。在中国，绝大多数地区都已经解决了“吃得饱”的问题，但同时还有一个“吃得好”的问题。海水产品因其高营养、低脂肪等优点逐渐成为人类健康食物来源结构中优质、安全的重要渠道。
[0003]海水产品可以通过捕捞和养殖获得。海水捕捞是对海洋天然水产品的初级获取方法，但是其受限于自然环境的优劣与海洋生物资源的丰富程度。同时，由于海洋中生物资源的过度开发利用，以及海洋环境污染的加剧，海水捕捞的产量和可持续性都受到巨大的制约。因此，通过人工劳动来主动获得水产品的海水养殖业逐渐成为长期满足人类持续增长的优质天然海水产品需求的重要途径。中国是水产养殖大国，也是水产品出口量最大的国家。根据国家统计局的数据，2019年，中国水产养殖产量达到5078.92万吨，占水产品总产量的78％，是真正意义上的“以养为主”，其中海水养殖水产品产量达到2065.33万吨。中国海水养殖业处在高速发展中，从2010年的年产量1482.3万吨到2017年的突破2000万吨，中国海水养殖业的需求与生产能力都在不断提高。随着养殖业的发展，养殖模式不断革新，养殖产量和养殖密度持续提高，养殖水体的负担持续增大，养殖环境变得越来越复杂和难以控制，随之而来的情况屡见不鲜，病原种类及其流行情况也变得多样化和复杂化，造成的损失日益严重，成为中国水产养殖业发展的重要制约因素。为了治疗患病的水生动物，传统的水产养殖业中会使用兽用或渔用抗菌药来降低损失，但是药物的施用常常不合理，一方面药物的滥用导致越来越来耐药的致病原产生，同时药物的残留也会直接影响到人体的健康。因此，对于流行性疾病，但更重要的是进行防控，这样才能最大程度的降低损失，而疫苗是进行流行病防控的最有效手段，免疫防控技术在国际上已开展了广泛的应用。
[0004]疫苗根据其抗原不同可以分为很多种类，如灭活疫苗、减毒活疫苗、重组蛋白疫苗、DNA疫苗等。传统的灭活疫苗是将病原进行培养，然后通过不同的方式进行灭活消除其致病性但是保留其抗原性，灭活疫苗的研发与制备都相对简单，同时，对于细菌性致病原来说，灭活疫苗往往能够达到理想的保护效果，因此，针对细菌性致病原，在疫苗设计中首先考虑的是灭活疫苗。
[0005]大黄鱼(Larimichthys crocea)是一种蛋白质含量高、营养价值丰富的海洋鱼类，被誉为“国鱼”，曾经是中国四大海洋渔业种类之首。但严重的过度捕捞破坏了野生大黄鱼产卵群体资源，致使产卵群体小型化、低龄化和性早熟。当前野生大黄鱼资源已经衰退枯
竭，趋于濒危物种，因此大黄鱼的人工养殖技术逐渐发展。大黄鱼较为娇弱，易受病原侵扰，常见的疾病有弧菌病、烂鳃病、内脏白点病等。内脏白点病多发病于春末或秋末，水温22℃左右发生，对大黄鱼来说是一种常见病症，多发生在100～250g左右的鱼中，病症严重的鱼发生陆续死亡，累积死亡率较高。解剖发现病鱼脾脏呈暗红色并有许多白点状结节，大小在1mm以下，肾脏也有许多白色结节，大的在2mm左右，肝脏、心脏也有白色结节。大黄鱼内脏白点病的病原为杀香鱼假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)，其灭活疫苗表现出较好的保护效果。
[0006]然而，尽管杀香鱼假单胞菌能够感染鱼类，再起内脏中生存，但在体外状态下的人工培养却是困难的，对其进行一定规模的高密度培养尤为困难。因此，开发一种高密度培养杀香鱼假单胞菌的培养基，是本领域亟待解决的问题。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供应用于培养杀香鱼假单胞菌的发酵培养基及其制备方法。
[0008]在本专利技术的第一方面，提供一种用于培养杀香鱼假单胞菌的培养基，所述培养基包括以下组分：
[0009][0010]在一个优选例中，所述培养基包括以下组分：
[0011][0012]在另一优选例中，所述培养基包括以下组分：
[0013][0014]在另一优选例中，所述培养基中，各组分配制于水中；和/或所述培养基的pH值7
±
0.3(较佳地为7
±
0.2；更佳地为7
±
0.1)。
[0015]在本专利技术的另一方面，提供所述的培养基的用途，用于培养杀香鱼假单胞菌；较佳地，所述的培养为高密度培养。
[0016]在本专利技术的另一方面，提供一种制备所述的杀香鱼假单胞菌的培养基的方法，所述方法包括：根据权利要求1
‑
4任意所述的培养基的用量，混合酵母提取物、蛋白胨、甘油、(NH4)2SO4、MgSO4·
7H2O、KH2PO4、Na2HPO4·
12H2O；获得所述的杀香鱼假单胞菌的培养基。
[0017]在一个优选例中，培养基组分中，所述MgSO4·
7H2O单独灭菌，其他组分混合后灭菌。
[0018]在本专利技术的另一方面，提供一种培养杀香鱼假单胞菌的方法，使用所述的培养基进行培养，从而使之高密度生长。
[0019]在一个优选例中，在28
±
2℃(较佳地28
±
1℃；更佳地28
±
0.5℃)、200
±
50rpm(较佳地200
±
30rpm；更佳地200
±
15rpm)的条件下进行培养。
[0020]在本专利技术的另一方面，提供一种用于培养杀香鱼假单胞菌的试剂盒，所述试剂盒中包括前面所述的培养基。
[0021]本专利技术的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。
附图说明
[0022]图1、利用本专利技术优化后的培养基进行培养，杀香鱼假单胞菌的生长曲线图。
[0023]图2、利用商品化的TSB培养基进行培养，杀香鱼假单胞菌的生长曲线图。
具体实施方式
[0024]本专利技术人经过长期而深入的研究，研究开发了一种新的适合于杀香鱼假单胞菌高效、高密度培养的培养基配方。本专利技术的培养基，适合于杀香鱼假单胞菌的生长，可大幅提高其发酵的密度，从而可为杀香鱼假单胞菌鱼类疫苗的制备奠定基础。
[0025]如本文所用，所述的“含有”，“具有”或“包括”包括了“包含”、“主要由
……
构成”、“基本上由
……
构成”、和“由
……
构成”；“主要由
……
构成”、“基本上由
……
构成”和“由
……
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于培养杀香鱼假单胞菌的培养基，其特征在于，所述培养基包括以下组分：2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基包括以下组分：3.如权利要求2所述的培养基，其特征在于，所述培养基包括以下组分：4.如权利要求1
‑
3任一所述的培养基，其特征在于，所述培养基中，各组分配制于水中；和/或所述培养基的pH值7
±
0.3。5.权利要求1
‑
4任一所述的培养基的用途，用于培养杀香鱼假单胞菌；较佳地，所述的培养为高密度培养。6.一种制备权利要求1
‑
4任一所述的杀香鱼假单胞菌的培养基的方法，所述方法包括：根据权利要求1
‑
4任意所述的培养基的用量，混合酵母提取物、蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书二页说明书九页附图一页，
申请(专利权)人：上海博升生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：