一种抗缪勒管激素测定试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术涉及生物技术检测领域，具体涉及一种抗缪勒管激素测定试剂盒及其制备方法。本发明专利技术提供一种抗缪勒管激素测定试剂盒，其包括检测卡，检测卡包括顺次搭接在底板上的一体垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；一体垫上喷涂有荧光微球标记的抗体一，硝酸纤维素膜设有包被抗体二的检测线和包被抗体三的质控线。本发明专利技术将样品垫和结合垫设置为一体垫，减少制作程序，且便于将一体垫粘贴在底板上，不易掉落。此外，本发明专利技术还提供一种抗缪勒管激素测定试剂盒的制备方法，包括一体垫的制备、荧光微球结合物制备、硝酸纤维素膜的包被以及检测卡的制备。该试剂盒制作工艺简单，检测耗时短，灵敏度高，准确度高，且操作便捷。且操作便捷。且操作便捷。

【技术实现步骤摘要】
一种抗缪勒管激素测定试剂盒及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物技术检测领域，具体涉及一种抗缪勒管激素测定试剂 盒及其制备方法。

技术介绍

[0002]抗缪勒管激素(AMH)是一种属于转化生长因子(TGF
‑
β)家族的二 聚体糖蛋白。在男性中，AMH由睾丸的支持细胞分泌的。在青春期之前 AMH的浓度较高，之后慢慢减少到青春期后剩余水平，青春期AMH的减 少与青春期发育阶段有关，与睾丸内睾酮浓度增加同时发生。在女性中， AMH在卵巢的卵泡发育中发挥重要作用。AMH的血清水平在女性出生时 几乎检测不出，在青春期后达到最高水平。之后随着年龄增长逐步下降， 在停经后无法检测出。
[0003]AMH检测可辅助评估生育能力保留策略以及检测化疗后或术后的卵 巢储备功能，可间接反映卵巢内窦前卵泡的数量，以及用来预示对控制性 促排卵的反应。AMH检测可用于预测体外受精后卵巢过度刺激、更年期时 间，以及评估卵巢储备功能的医院性损伤、真假两性畸形的诊断，精子形 成的标记等。AMH与多囊卵巢综合征的发生发展有密切联系，且对于诊断 多囊卵巢综合征有较高的临床价值。
[0004]目前检测抗缪勒管激素(AMH)的免疫学方法主要有：酶联免疫法、 化学发光法、电化学发光法等，酶联免疫法对实验操作要求较高且耗时比 较长，化学发光及电化学发光法需要大型的操作仪器，对操作人员要求很 高。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种抗缪勒管激素测定试剂盒，该试剂盒采用 荧光免疫层析法对抗缪勒管激素进行检测，耗时短，灵敏度高，准确度高， 且操作便捷。
[0006]本专利技术的另一目的在于提供一种抗缪勒管激素测定试剂盒的制备方 法，该制备工艺简单、重复性好、稳定性高且经济实用。
[0007]本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
[0008]一方面，本专利技术实施例提供一种抗缪勒管激素测定试剂盒，其包括检 测卡，检测卡包括顺次搭接在底板上的一体垫、硝酸纤维素膜和吸水纸； 一体垫上喷涂有荧光微球标记的抗体一，硝酸纤维素膜设有包被抗体二的 检测线和包被抗体三的质控线；抗体一为鼠抗AMH单克隆抗体一，抗体二 为与抗体一处于不同表位的鼠抗AMH单克隆抗体二，抗体三为羊抗鼠IgG。 传统的检测卡中设置有样品垫和结合垫，不易粘贴，且粘贴后易脱落，本 专利技术提供的一种抗缪勒管激素试剂盒将样品垫和结合垫设置为一体垫，减 少制作程序，且便于将一体垫粘贴在底板上，不易掉落。此外，该试剂盒 采用荧光免疫层析法对抗缪勒管激素进行检测，耗时短，灵敏度高，准确 度高，且操作便捷。
[0009]另一方面，作为一个总的专利技术构思，本专利技术实施例还提供了一种抗缪 勒管激素测定试剂盒的制备方法，包括：
[0010]S1，一体垫的制备：将吐温
‑
20原液加入到纯水中，混合均匀，制得一 体垫处理液，随后将玻璃纤维膜放入一体垫处理液中浸泡0.4h
‑
0.6h后干燥。
[0011]S2，荧光微球结合物制备：在荧光微球中加入0.1M的MES缓冲液， 混悬，再加入活化缓冲液，旋转活化制得荧光微球溶液；向上述荧光微球 溶液中加入抗体一，在旋转混匀器上旋转混匀，制得荧光微球结合物工作 液；将上述荧光微球结合物工作液喷涂到一体垫上，干燥；
[0012]S3，硝酸纤维素膜的包被：将稀释后的抗体二和抗体三分别划在检测 线和质控线上，干燥。
[0013]S4，检测卡的制备：将制备干燥后的一体垫、硝酸纤维素膜及吸水纸 依次粘贴于底板上，得到检测卡。
[0014]该试剂盒制作工艺简单，重复性好、稳定性高且经济实用。
[0015]相对于现有技术，本专利技术的实施例至少具有如下优点或有益效果：
[0016]1.传统的检测卡中设置有样品垫和结合垫，不易粘贴，且粘贴后易脱 落，本专利技术提供的一种抗缪勒管激素试剂盒将样品垫和结合垫设置为一体 垫，减少制作程序，且便于将一体垫粘贴在底板上，不易掉落。
[0017]2.该试剂盒采用荧光免疫层析法对抗缪勒管激素进行检测，耗时短， 灵敏度高，准确度高，且操作便捷。
[0018]3.本专利技术实施例提供一种抗缪勒管激素测定试剂盒，其制备工艺简单， 重复性好、稳定性高且经济实用。
附图说明
[0019]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需 要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些 实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲， 在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0020]图1为本专利技术检测卡的结构示意图；
[0021]图2为本专利技术检测卡的工作流程示意图；
[0022]图3为本专利技术试验例中检测卡测试所得到的线性相关性图。
[0023]图标：1
‑
一体垫，2
‑
荧光微球结合物，3
‑
硝酸纤维素膜，4
‑
吸水纸，5
‑ꢀ
底板。
具体实施方式
[0024]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发 明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件 者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产 厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0025]需要说明的是，在不冲突的情况下，本专利技术中的实施例及实施例中的 特征可以相互组合。下面将参考具体实施例来详细说明本专利技术。
[0026]一种抗缪勒管激素测定试剂盒，其包括检测卡，检测卡包括顺次搭接 在底板上的一体垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；一体垫上喷涂有荧光微球标 记的抗体一，硝酸纤维素膜
设有包被抗体二的检测线和包被抗体三的质控 线；抗体一为鼠抗AMH单克隆抗体一，抗体二为与所述抗体一处于不同表 位的鼠抗AMH单克隆抗体二，抗体三为羊抗鼠IgG。
[0027]本专利技术的试剂盒采用荧光免疫层析法对抗缪勒管激素进行检测，耗时 短，灵敏度高，准确度高，且操作便捷。
[0028]在本专利技术的一些实施例中，一体垫远离上述硝酸纤维素膜的一侧设有 加样区，一体垫靠近上述硝酸纤维素膜的一侧设有结合物区，结合物区固 定有荧光微球标记的抗体一。传统的检测卡中设置有样品垫和结合垫，不 易粘贴，且粘贴后易脱落，本专利技术提供的一种抗缪勒管激素试剂盒通过将 样品垫和结合垫设置为一体垫，减少制作程序，且便于将一体垫粘贴在底 板上，不易掉落。
[0029]在本专利技术的一些实施例中，上述一体垫为用表面活性剂处理干燥后的 玻璃纤维膜，上述表面活性剂为含有体积百分比为0.1％～1％吐温
‑
20的溶 液。表面活性剂被誉为“工业味精”，是指具有固定的亲水亲油基团，在 溶液的表面能定向排列，并能使表面张力显著下降的物质。在表面活性剂 存在的条件下，降低水的表面张力，样品垫才更容易被水所润湿，形成本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗缪勒管激素测定试剂盒，其特征在于，其包括检测卡，所述检测卡包括顺次搭接在底板上的一体垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；所述一体垫上喷涂有荧光微球标记的抗体一，所述硝酸纤维素膜设有包被抗体二的检测线和包被抗体三的质控线；所述抗体一为鼠抗AMH单克隆抗体一，所述抗体二为与所述抗体一处于不同表位的鼠抗AMH单克隆抗体二，所述抗体三为羊抗鼠IgG。2.根据权利要求1所述的抗缪勒管激素测定试剂盒，其特征在于，所述一体垫远离所述硝酸纤维素膜的一侧设有加样区，所述一体垫靠近所述硝酸纤维素膜的一侧设有结合物区，所述结合物区固定有荧光微球标记的抗体一。3.根据权利要求1所述的抗缪勒管激素测定试剂盒，其特征在于，所述一体垫为用表面活性剂处理干燥后的玻璃纤维膜，所述表面活性剂为含有体积百分比为0.1％～1％吐温
‑
20的溶液。4.根据权利要求1所述的抗缪勒管激素测定试剂盒，其特征在于，所述一体垫上固定的荧光微球粒径为200nm～400nm，所述荧光微球受激发后发射的波长为500nm～650nm。5.根据权利要求1所述的抗缪勒管激素测定试剂盒，其特征在于，所述抗体一与所述荧光微球的偶联比例为50μg
‑
Ab/mg
‑
beads～200μg
‑
Ab/mg
‑
beads。6.根据权利要求1所述的抗缪勒管激素测定试剂盒，其特征在于，所述一体垫上喷涂荧光微球结合物的量为2μl/cm2～4μl/cm2。7.根据权利要求1所述的抗缪勒管激素测定试剂盒，其特征在于，所述抗体二的浓度为0.5mg/ml～1mg...

【专利技术属性】
技术研发人员：高乐乐，张冉，郝荣杰，郭春雨，
申请(专利权)人：北京泰格科信生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：