本发明专利技术涉及一种许氏平鮋放流回捕贡献率评估的方法，属于渔业资源领域。本发明专利技术所述方法包括如下步骤：(1)在许氏平鮋增殖放流前，待雌性亲本产卵后获取其鳍条，提取基因组DNA；(2)采用优选的引物对步骤(1)提取的基因组DNA进行PCR反应；(3)放流；(4)回捕；(5)对步骤(4)回捕的个体进行鉴定、识别、放流回捕贡献率评估。本发明专利技术优选了9对高多态性且稳定的微卫星位点组合，在保证识别准确率的前提下，节省了成本。成本。
【技术实现步骤摘要】
一种许氏平鮋放流回捕贡献率评估的方法
[0001]本专利技术涉及一种许氏平鮋放流回捕贡献率评估的方法，属于渔业资源领域。
技术介绍
[0002]许氏平鲉是广泛分布于我国渤海、黄海和东海近海海域的一种底层岩礁性鱼类。许氏平鲉肉质细嫩、脂肪含量较少，且抗病力较强、无远距离洄游习性，是我国北方重要的渔业经济种类，也是我国北方重要的增殖放流品种。
[0003]增殖放流是指通过人工进行干预的方式，将人工培育的各类渔业生物的卵子、幼体或成体投放到天然水域，以恢复或增加种群的数量，改善和优化水域的群落结构。2021年我国许氏平鲉增殖放流数量就超过1671余万尾，这对恢复近海渔业和增加海洋经济产值有着积极作用。
[0004]一直以来，在增殖放流过程中，因无法准确区分放流个体和野生个体，增殖放流效果难以合理分析，造成目前我国增殖放流绩效评估不足。
技术实现思路
[0005]本专利技术通过选用分子生物学标记，使个体识别更精确，能有效评估许氏平鮋放流回捕贡献率，解决了上述的问题。
[0006]本专利技术提供了一种鉴别许氏平鮋的引物，所述引物的序列如下：
[0007]XU
‑
1正向序列为：5'
‑
GGAGCAGTGGTGAAGTAG
‑
3'，反向序列为：5'
‑
CATAATGATAGAAAGGGTAG
‑
3'；
[0008]XU
‑
2正向序列为：5'
‑
TTCGCTATTATCAGGTGG
‑
3'，反向序列为：5'
‑
GGAGACGGAGTAAATGCT
‑
3'；
[0009]XU
‑
3正向序列为：5'
‑
TAGGGACAAAGGACAGGG
‑
3'，反向序列为：5'
‑
GCAGCAAGACCGAACTCT
‑
3'；
[0010]XU
‑
4正向序列为：5'
‑
AGCTCTGGACGTGATAGG
‑
3'，反向序列为：5'
‑
CTGTCACTCAGGGAAAGG
‑
3'；
[0011]XU
‑
5正向序列为：5'
‑
CCCATCACTGAATAAAGAAGCA
‑
3'，反向序列为：5'
‑
AGGTCTCTGTGGACTGAAGGAG
‑
3'；
[0012]XU
‑
6正向序列为：5'
‑
GCTCAAATTAGCCATCCG
‑
3'，反向序列为：5'
‑
AGGTTATTGCTGGTTTCG
‑
3'；
[0013]XU
‑
7正向序列为：5'
‑
TCAGGCTGTCCACAACAAT
‑
3'，反向序列为：5'
‑
CTGGCAGGATGCTTCTTT
‑
3'；
[0014]XU
‑
8正向序列为：5'
‑
GCATGAGGGAGTGAATGT
‑
3'，反向序列为：5'
‑
TGTTGGCTTATCAGTGTC
‑
3'；
[0015]XU
‑
9正向序列为：5'
‑
CTAGAAGCAGCACAACAT
‑
3'，反向序列为：5'
‑
GTGACAAACGGGAGAAAC
‑
3'。
[0016]本专利技术另一目的为提供一种包含上述引物的试剂盒。
[0017]本专利技术优选为所述试剂盒包括PCR缓冲液、MgCl2、dNTP、Tap DNA聚合酶。
[0018]本专利技术又一目的为提供一种许氏平鮋放流回捕贡献率评估的方法，所述方法包括如下步骤：
[0019](1)在许氏平鮋增殖放流前，待雌性亲本产卵后获取其鳍条，提取基因组DNA；
[0020](2)采用权利要求1所述引物对步骤(1)提取的基因组DNA进行PCR反应；
[0021](3)放流；
[0022](4)回捕；
[0023](5)对步骤(4)回捕的个体进行鉴定、识别、放流回捕贡献率评估。
[0024]本专利技术优选为所述步骤(2)中引物的正向引物的5'端采用TAMRA、HEX或FAM荧光标记。
[0025]本专利技术优选为所述步骤(5)中鉴定的方法为：获取步骤(4)回捕个体的鳍条，提取基因组DNA并采用权利要求1所述引物对其进行PCR反应，毛细管电泳多重测序。
[0026]本专利技术优选为所述毛细管电泳多重测序时，XU
‑
1、XU
‑
2和XU
‑
3为一组进行毛细管电泳多重测序，XU
‑
4、XU
‑
5和XU
‑
6为一组进行毛细管电泳多重测序，XU
‑
7、XU
‑
8和XU
‑
9为一组进行毛细管电泳多重测序。
[0027]本专利技术所述放流回捕贡献率等于在研究海域，某一时间范围内，回捕到的许氏平鲉放流个体数量与回捕总数量之间的比例
×
100％。
[0028]本专利技术的有益效果为：
[0029]本专利技术优选了9对高多态性且稳定的微卫星位点组合，在保证识别准确率的前提下，节省了成本。
[0030]本专利技术一次毛细管电泳可以检测多重开展3个微卫星位点测序，相对简单的测序方法，效率提高了3倍，费用下降为原来的1/3。
附图说明
[0031]本专利技术附图4幅，
[0032]图1为实施例1中许氏平鮋回捕调查站位图；
[0033]图2为实施例1中第一组毛细管电泳多重测序的结果；
[0034]图3为实施例1中第二组毛细管电泳多重测序的结果；
[0035]图4为实施例1中第三组毛细管电泳多重测序的结果。
具体实施方式
[0036]下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。
[0037]实施例1
[0038](1)2019年5月，待许氏平鮋雌性亲本产卵后剪取其鳍条，获得样本1，采用海洋动物组织DNA提取试剂盒进行样本1的DNA提取。
[0039](2)采用下表1中的9对微卫星引物对步骤(1)提取的基因组DNA进行PCR反应，反应体系共15μL，包括DECP水7.48μL、10
×
PCR Buffer 1.6μL、MgCl
2 1.2μL、dNTP 1.2μL、双向本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种鉴别许氏平鮋的引物，其特征在于：所述引物的序列如下：XU
‑
1正向序列为：5'
‑
GGAGCAGTGGTGAAGTAG
‑
3'，反向序列为：5'
‑
CATAATGATAGAAAGGGTAG
‑
3'；XU
‑
2正向序列为：5'
‑
TTCGCTATTATCAGGTGG
‑
3'，反向序列为：5'
‑
GGAGACGGAGTAAATGCT
‑
3'；XU
‑
3正向序列为：5'
‑
TAGGGACAAAGGACAGGG
‑
3'，反向序列为：5'
‑
GCAGCAAGACCGAACTCT
‑
3'；XU
‑
4正向序列为：5'
‑
AGCTCTGGACGTGATAGG
‑
3'，反向序列为：5'
‑
CTGTCACTCAGGGAAAGG
‑
3'；XU
‑
5正向序列为：5'
‑
CCCATCACTGAATAAAGAAGCA
‑
3'，反向序列为：5'
‑
AGGTCTCTGTGGACTGAAGGAG
‑
3'；XU
‑
6正向序列为：5'
‑
GCTCAAATTAGCCATCCG
‑
3'，反向序列为：5'
‑
AGGTTATT...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘奇，刘鹰，闫红伟，田涛，刘滨玮，张涛，孙群汶，
申请(专利权)人：大连海洋大学，
类型：发明
国别省市：
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