从黑木耳中分离的单体多糖及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了从黑木耳中分离的单体多糖及其制备方法和用途。所述单体多糖由木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成。本发明专利技术进一步提供了从黑木耳中分离获得所述单体多糖的结构及制备方法，组合运用多个色谱技术，具有适合大规模生产、成本低、单体多糖产率高和纯度高等特点。本发明专利技术所分离的黑木耳单体多糖是高乙酰基葡萄糖醛酸木半乳葡甘聚糖,能够降低性SiO2粉尘致矽肺模型小鼠肺部灌洗液中嗜酸性粒细胞、中性粒细胞及淋巴细胞百分比，明显降低SiO2粉尘致矽肺模型组中SOD、HYP、IL

【技术实现步骤摘要】
从黑木耳中分离的单体多糖及其制备方法和用途


[0001]本专利技术涉及单体多糖，尤其涉及从黑木耳中分离的单体多糖及其制备方法，本专利技术进一步涉及所述单体多糖在制备预防或治疗矽肺药物中的用途，属于单体多糖及其应用领域。

技术介绍

[0002]黑木耳是一种鲜美而具有药用价值的食用菌。在中国具有悠久的食用黑木耳的历史，现代药理学研究表明黑木耳多糖具有抗凝血、抗肿瘤、免疫调节等药理活性。迄今为止，关于黑木耳多糖分离纯化，研究人员多采用水提醇沉、蛋白酶反应、化学试剂除蛋白和色素等，该系列工艺繁杂，对环境污染大，且易破坏黑木耳原生多糖化学结构，影响改变其生物活性，不利于大规模工业化生产。
[0003]由于黑木耳多糖分子量大、乙酰基含量高、结构高度复杂，致使其结构表征研究一直以来是一项极具有挑战性的工作。迄今为止，关于黑木耳多糖的结构研究，多局限在粗多糖研究层面。虽然亦有零星报道关于其单体多糖结构特征，但多局限在黑木耳小分子量多糖(约70.0kDa)，且未能清晰、准确阐明其化学精细结构重复单元，更未触及黑木耳大分子量原生多糖，研究成果严重阻碍了黑木耳产业在医药领域的进一步提档升级。由于对其单体糖的结构不能清晰明确表征，就不能证明单体糖的结构上是否具有新颖性，进而影响后续相关研究及应用。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的之一是提供从黑木耳中分离获得的单体多糖；
[0005]本专利技术的目的之二是提供一种从黑木耳中分离获得的单体多糖的方法；
[0006]本专利技术的目的之三是将所述的单体多糖应用于制备预防或治疗矽肺的药物。
[0007]本专利技术的上述目的是通过以下技术方案来实现的：
[0008]本专利技术的一方面是提供了从黑木耳中分离获得的单体多糖ME
‑
2，其特征在于所述单体多糖为高乙酰基葡萄糖醛酸木半乳葡甘聚糖，由木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、葡萄糖、甘露糖组成，其中，木糖：葡萄糖醛酸：半乳糖：葡萄糖：甘露糖的理论组成的摩尔比例为3：4：1：1：11。
[0009]进一步的，本专利技术所提供的单体多糖ME
‑
2化学结构特征为：白色絮状、柔性链构象、极易溶于水；绝对分子量M
w
＝260kDa、特征粘度[η]＝370mL/g、均方根回旋半径R
g
＝42.6nm、构象参数ρ＝1.64；乙酰基含量为18％(M
Acetyl
/M
w
×
100％)。
[0010]进一步的，所述单体多糖ME
‑
2的糖残基连接组成为：
→
3)
‑
甘露糖
‑
(1
→
、
→
2，3)
‑
甘露糖
‑
(1
→
、
→
2，3，6)
‑
甘露糖
‑
(1
→
、
→
3，6)
‑
甘露糖
‑
(1
→
、甘露糖
‑
(1
→
、葡萄糖
‑
(1
→
、葡萄糖醛酸
‑
(1
→
、木糖
‑
(1
→
、半乳糖
‑
(1
→
；其理论糖残基连接组成比例为3：1：3：3：1：1：4：3：1。
[0011]更进一步的，所述单体多糖ME
‑
2的化学精细结构重复单元为如下所示：
[0012][0013]本专利技术的第二方面是提供了一种从黑木耳中分离获得所述单体多糖的方法，包括：
[0014](1)以水为提取溶剂采用加热回流提取方法提取得到黑木耳水提液；
[0015](2)将黑木耳水提液用大孔树脂柱吸附，通过树脂柱吸附除去色素、蛋白等物质后用洗脱液洗脱得到黑木耳大孔树脂水洗脱液；
[0016](3)黑木耳大孔树脂水洗脱液采用超滤或者透析袋透析处理获得黑木耳精制总多糖；
[0017](4)黑木耳精制总多糖通过柱色谱处理得到黑木耳精制多糖I，再使用阴离子交换凝胶柱纯化获得精制单体多糖。
[0018]作为本专利技术一种优选的具体实施方式，步骤(2)中所述的大孔树脂柱为AB
‑
8型大孔树脂；所述的洗脱液为蒸馏水，蒸馏水洗脱量为6倍柱体积；采用苯酚硫酸法检测终点。
[0019]作为本专利技术一种优选的具体实施方式，步骤(3)中优选用3kDa超滤色谱柱对大孔树脂水洗脱液进行截留处理获得黑木耳精制总多糖，其中，样品浓度为7：1(水体积mL：药材重量g)、超滤压力为2Mpa。
[0020]作为本专利技术一种优选的具体实施方式，步骤(4)中将黑木耳精制总多糖先使用Amber
‑
lite FPA90
‑
Cl
‑
阴离子交换树脂得到黑木耳精制多糖I，再使用DEAE
‑
650M阴离子交换色谱柱细分纯化得到精制单体多糖；
[0021]更优选的，将黑木耳精制总多糖先使用Amber
‑
lite FPA90
‑
Cl
‑
阴离子交换树脂得到黑木耳精制多糖I时分别用蒸馏水和1mol/L NaCl洗脱，水和1mol/L NaCl洗脱体积分别为4倍柱体积和2倍柱体积，收集蒸馏水洗脱部分得到黑木耳精制多糖I；再使用DEAE
‑
650M阴离子交换色谱柱细分纯化得到精制单体多糖时，洗脱相为蒸馏水、0.5mol/L NaCl，收集0.5mol/L NaCl洗脱部分得到得精制单体多糖。
[0022]本专利技术所提供的黑木耳单体多糖能够降低性SiO2粉尘致矽肺模型小鼠肺部灌洗液中嗜酸性粒细胞、中性粒细胞及淋巴细胞百分比；明显降低SiO2粉尘致矽肺模型组中SOD、HYP、IL
‑
6、TNF
‑
α等氧化、炎症因子水平，并呈现剂量依赖性，最终证明该黑木耳单体多糖对实验性SiO2粉尘致矽肺模型小鼠具有确定保护作用。
[0023]因此，本专利技术从黑木耳中分离获得所述单体多糖能够用于制备治疗或预防矽肺的药物。
[0024]本专利技术提供了一种防治矽肺的药物组合物，由有效量的单体多糖和药物制剂上可接受的辅料或载体组成。
[0025]所述药物组合物按照中药常规制剂方法制备成适宜的临床制剂，优选为口服制剂；所述药物的剂型包括：颗粒剂、泡腾剂、口服液、喷雾剂、胶囊、软膏、糖浆、片剂等常规的临床制剂形式。
[0026]本专利技术所述辅料或载体是指药学领域常规的辅料或载体，例如：稀释剂、崩裂剂、
润滑剂、赋形剂、粘合剂、助流剂、填充剂、表面活性剂等；另外，还可以在组合物中加入其它辅助剂，如香味剂和甜味剂。所述稀释剂可以是一种或几种增加片剂重量和体积的成分，常用的稀释剂包括乳糖、淀粉、预胶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从黑木耳中分离获得的单体多糖，其特征在于，所述单体多糖为高乙酰基葡萄糖醛酸木半乳葡甘聚糖，其分子量为260kDa；乙酰基含量18％；由木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成；其中，按照理论组成摩尔比计，木糖：葡萄糖醛酸：半乳糖：葡萄糖：甘露糖＝3：4：1：1：11。2.根据权利要求1所述的单体多糖，其特征在于，所述单体多糖的糖残基连接组成为：
→
3)
‑
甘露糖
‑
(1
→
、
→
2，3)
‑
甘露糖
‑
(1
→
、
→
2，3，6)
‑
甘露糖
‑
(1
→
、
→
3，6)
‑
甘露糖
‑
(1
→
、甘露糖
‑
(1
→
、葡萄糖
‑
(1
→
、葡萄糖醛酸
‑
(1
→
、木糖
‑
(1
→
、半乳糖
‑
(1
→
；按照理论糖残基连接组成比计：
→
3)
‑
甘露糖
‑
(1
→
：
→
2，3)
‑
甘露糖
‑
(1
→
：
→
2，3，6)
‑
甘露糖
‑
(1
→
：
→
3，6)
‑
甘露糖
‑
(1
→
：甘露糖
‑
(1
→
：葡萄糖
‑
(1
→
：葡萄糖醛酸
‑
(1
→
：木糖
‑
(1
→
...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏永刚，梁军，刘俊希，姜思亮，饶子豪，
申请(专利权)人：梁军，
类型：发明
国别省市：