抗BCMACAR抗体、缀合物及使用方法技术

本发明专利技术提供了用于检测T细胞上的抗BCMA CAR表达的改进方法。本发明专利技术大体上提供了抗体及其抗原结合片段、其缀合物以及使用其检测、测定或测量CAR T细胞和/或一种或多种T细胞上的CAR表达的方法。的CAR表达的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗BCMA CAR抗体、缀合物及使用方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请根据35U.S.C.
§
119(e)要求2019年12月16日提交的美国临时申请第62/948,488号的权益，所述申请以引用的方式整体并入本文。
[0003]关于序列表的声明
[0004]与本申请相关的序列表以文本格式提供以代替纸质副本，并且特此通过引用并入说明书中。含有序列表的文本文件的名称是BLUE
‑ꢀ
97PC2_ST25.txt。文本文件为26KB，创建于2020年12月10日，并在本说明书提交的同时，经由EFS
‑
Web以电子方式提交。

技术介绍


[0005]本专利技术涉及抗体组合物。更具体地，本专利技术涉及与抗BCMA CAR结合的抗体和抗原结合片段及其缀合物，以及使用所述抗体和抗原结合片段检测抗BCMA CAR T细胞的方法。
[0006]现有技术
[0007]遗传方法提供了增强免疫识别和消除癌细胞的潜在手段。一种有希望的策略是基因工程改造免疫效应细胞以表达嵌合抗原受体(CAR)，所述受体将细胞毒性重新导向肿瘤细胞。然而，难以精确测量在一个或多个过继转移的CAR T细胞上的CAR表达和体内CAR T细胞的持久性，这混淆了测量 CAR T细胞活性的尝试。评估CAR T细胞的最常见方法是使用CAR特异性引物进行定量PCR。然而，此技术不足且不允许CAR T细胞的多参数分析。

技术实现思路

[0008]本专利技术大体上提供了抗体及其抗原结合片段、其缀合物以及使用其检测、测定或测量CAR
+
T细胞和/或一种或多种T细胞上的CAR表达的方法。
[0009]在各种实施方案中，抗体或其抗原结合片段包含如SEQ ID NO:7中所示的可变轻链序列和如SEQ ID NO:8中所示的可变重链序列。
[0010]在某些实施方案中，抗体或其抗原结合片段是抗原结合片段。
[0011]在一些实施方案中，抗体或其抗原结合片段选自由以下组成的组： Fab
’
片段、F(ab
’
)2片段、双特异性Fab二聚体(Fab2)、三特异性Fab三聚体(Fab3)、Fv、单链Fv蛋白(“scFv”)、双
‑
scFv、(scFv)2、微型抗体 (minibody)、双抗体(diabody)、三抗体(triabody)、四抗体 (tetrabody)、二硫键稳定的Fv蛋白(“dsFv”)和单结构域抗体(sdAb，纳米抗体)。
[0012]在某些实施方案中，抗体或其抗原结合片段是scFv。
[0013]在某些实施方案中，抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:11中所示的轻链序列和SEQ ID NO:12或SEQ ID NO:13中所示的重链序列。
[0014]在某些实施方案中，抗体或其抗原结合片段结合SEQ ID NO:9中所示的抗BCMA CAR的一个或多个表位。
700、Atto725、Atto740、SuperBright
TM
436、SuperBright
TM
600、SuperBright
TM
645、SuperBright
TM
702、SuperBright
TM
780、Brilliant
TM
Violet421、Brilliant
TM
Violet480、Brilliant
TM
Violet510、Brilliant
TM
Violet605、BrilliantViolet
TM
650、BrilliantViolet
TM
711、BrilliantViolet
TM
786、Brilliant
TM
Ultraviolet395(BUV395)、Brilliant
TM
Ultraviolet496(BUV496)、Brilliant
TM
Ultraviolet563(BUV563)、Brilliant
TM
Ultraviolet661(BUV661)、Brilliant
TM
Ultraviolet737(BUV737)、Brilliant
TM
Ultraviolet805(BUV805)、Brilliant
TM
Blue515(BB515)、Brilliant
TM
Blue700(BB700)以及IRDye680、IRDye680LT、IRDye700、IRDye700DX、IRDye800、IRDye800RS和IRDye800CW。
[0030]在某些实施方案中，可检测标记是选自由以下组成的组的串联荧光染料：RPE
‑
Cy5、RPE
‑
Cy5.5、RPE
‑
Cy7、RPE
‑
CF594、串联缀合物；RPE
‑
Alexa610、RPE
‑
TxRed、APC
‑
H7、APC
‑
R700、APC
‑
Alexa600、APC
‑
Alexa610、APC
‑
Alexa750、APC
‑
Cy5、APC
‑
Cy5.5和APC
‑
Cy7。
[0031]在某些实施方案中，可检测标记是选自由以下组成的组的荧光蛋白：GFP、eGFP、BFP、CFP、YFP、DsRed、DsRed2、mRFP、mBanana、mOrange、dTomato、tdTomato、mTangerine、mStrawberry、mCherry、mPlum和mRaspberry。
[0032]在特定实施方案中，可检测标记是选自由以下组成的组的酶：碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase)、荧光素酶和β
‑
半乳糖苷酶。
[0033]在某些实施方案中，可检测标记包含选自由以下组成的组的放射性核素：碳(14C)、铬(51Cr)、钴(57Co)、氟(18F)、钆(153Gd、159Gd)、锗(68Ge)、钬(166Ho)、铟(115In、113In、112In、mIn)、碘(125I、123I、121I)、镧(140La)、镥(177Lu)、锰(54Mn)、钼(99Mo)、钯(103Pd)、磷(32P)、镨(142Pr)、钷(149Pm)、铼(186Re、188Re)、铑(105Rh)、钌(97Ru)、钐(153Sm)、钪(47Sc)、硒(75Se)、(85Sr)、硫(35S)、锝(99Tc)、铊(201Ti)、锡(113Sn、117Sn)、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种抗体或其抗原结合片段，其包含SEQ ID NO:7中所示的可变轻链序列和SEQ ID NO:8中所示的可变重链序列。2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是抗原结合片段。3.如权利要求1或权利要求2所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段选自：Fab
’
片段、F(ab')2片段、双特异性Fab二聚体(Fab2)、三特异性Fab三聚体(Fab3)、Fv、单链Fv蛋白(“scFv”)、双
‑
scFv、(scFv)2、微型抗体、双抗体、三抗体、四抗体、二硫键稳定的Fv蛋白(“dsFv”)和单结构域抗体(sdAb，纳米抗体)。4.如权利要求1至3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是scFv。5.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:11中所示的轻链序列和SEQ ID NO:12或SEQ ID NO:13中所示的重链序列。6.如权利要求1至5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合SEQ ID NO:9中所示的抗BCMA CAR序列的一个或多个表位。7.如权利要求1至6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段结合SEQ ID NO:10中所示的抗BCMA CAR序列的一个或多个表位。8.如权利要求1至7中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是小鼠抗体。9.如权利要求1至7中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是人源化抗体。10.如权利要求1至7中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是人抗体。11.如权利要求1至10中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含IgG1、IgG2、IgG3或IgG4恒定结构域。12.如权利要求1至10中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含IgG1恒定结构域。13.一种缀合物，其包含如权利要求1至12中任一项所述的抗体或其抗原结合片段；以及一种用于检测的手段。14.一种缀合物，其包含如权利要求1至12中任一项所述的抗体或其抗原结合片段；以及一种检测手段。15.一种缀合物，其包含如权利要求1至12中任一项所述的抗体或其抗原结合片段；以及一种可检测标记。16.如权利要求15所述的缀合物，其中所述可检测标记选自由以下组成的组：半抗原、荧光染料、荧光蛋白、发色团、金属离子、金颗粒、银颗粒、磁颗粒、多肽、酶、发光化合物或寡核苷酸。17.如权利要求15或权利要求16所述的缀合物，其中所述可检测标记是选自由以下组成的组的荧光染料：OregonPacific Blue
TM
、Pacific Orange
TM
、Pacific Green
TM
、Cascade Blue
TM
、Cascade Yellow
TM
、Lucifer Yellow
TM
、Marina Blue
TM
和Texas
(TxRed)。18.如权利要求15或权利要求16所述的缀合物，其中所述可检测标记是选自由以下组成的组的(AF)染料：AF350、AF405、AF488、AF500、AF514、AF532、AF546、AF555、AF568、AF594、AF610、AF633、AF635、AF647、AF680、AF700、AF710、AF750、AF790和AF800。19.如权利要求18所述的缀合物，其中所述可检测标记是(AF)染料AF488。20.如权利要求15或权利要求16所述的缀合物，其中所述可检测标记是选自由以下组成的组的成的组的525、565、585、605、655、705和800。21.如权利要求15或权利要求16所述的缀合物，其中所述可检测标记是选自由以下组成的组的DyLight
TM
染料(DL)：DL549、DL649、DL680和DL800。22.如权利要求15或权利要求16所述的缀合物，其中所述可检测标记是选自以下组成的组的半抗原：荧光素或其衍生物、异硫氰酸荧光素、羧基荧光素、二氯酰亚胺荧光素、地高辛、二硝基苯酚(DNP)、三硝基苯酚(TNP)和生物素。23.如权利要求15或权利要求16所述的缀合物，其中所述可检测标记是选自由以下组成的组的Cy染料：Cy2、Cy3、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7和Cy 7.5。24.如权利要求15或权利要求16所述的缀合物，其中所述可检测标记是选自由以下组成的组的荧光分子：藻红蛋白(PE，R
‑
鱼藻红蛋白(RPE))、B
‑
藻红蛋白(BPE)、多甲藻叶绿素(PerCP)、别藻蓝蛋白(APC)和C
‑
藻青蛋白。25.如权利要求15或权利要求16所述的缀合物，其中所述可检测标记是选自由以下组成的组的荧光染料：Atto 390、Atto 425、Atto 465、Atto 488、Atto 495、Atto 514、Atto 520、Atto 532、Atto 550、Atto 565、Atto 590、Atto 594、Atto 610、Atto 620、Atto 633、Atto 647、Atto 655、Atto 665、Atto 680、Atto 700、Atto 725、Atto 740、Super Bright
TM
436、Super Bright
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600、Super Bright
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711、Brilliant Violet
TM
786、Brilliant
TM
Ultraviolet 395(BUV395)、Brilliant
TM
Ultraviole...

【专利技术属性】
技术研发人员：凯文，
申请(专利权)人：二赛文缇生物公司，
类型：发明
国别省市：