一种培养用于治疗用途的肿瘤浸润淋巴细胞的改进方法技术

本发明专利技术涉及通过将含有切除的TIL的肿瘤片段与免疫检查点抑制剂共培养，在体外重振耗竭的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)，用已知的其他白细胞介素刺激TIL以恢复T细胞耗竭，和/或抑制调节性T细胞分泌因子(例如IL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种培养用于治疗用途的肿瘤浸润淋巴细胞的改进方法


[0001]本专利技术涉及通过将含有切除的TIL的肿瘤片段与肿瘤微环境(TME)刺激剂，例如免疫检查点抑制剂(ICI)共培养，在体外重振耗竭的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)，用已知的其他白细胞介素刺激TIL以恢复T细胞耗竭，和/或抑制调节性T细胞分泌因子的作用(例如抑制IL
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10)，从而创造有利的肿瘤微环境，使得与目前建立的扩增方案相比，在这种肿瘤微环境中，耗竭的T细胞可以更快扩增且扩增数量更多。

技术介绍

[0002]肿瘤浸润淋巴细胞与接受免疫治疗，例如使用针对CTLA
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4和PD
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1/PD
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L1的免疫检查点抑制剂(ICI)的癌症患者的预后和无进展生存期改善有关。
[0003]然而，仍然只有一小部分患者对此类疗法表现出持久、长期的反应，因为许多其他因素似乎与下调免疫反应中的肿瘤微环境有关。关键因素之一似乎是T细胞耗竭，导致抗原特异性T细胞出现物理消除和/或功能障碍。与这种耗竭现象有关的因素涉及肿瘤细胞、淋巴和单核细胞上表达的表面标志物以及肿瘤微环境(TME)中调节性T细胞和NK细胞分泌的可溶性分子。但是，TME中也明显缺乏干扰素γ和IL
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2等刺激因子。
[0004]逆转T细胞耗竭是开发新型ICI的关键目标，无论是作为单一疗法还是与目前成熟的疗法相结合。然而，由于这些靶点通常还负责诱导免疫耐受以避免自身免疫反应，因此抑制剂的全身给药可能会导致严重的副作用。此外，给予T细胞刺激分子如IL
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2也会导致严重的甚至有时是致命的副作用，因此需要由熟练的临床医生进行管理。已经采取了一些方法将候选药物局部施用到肿瘤中，从而可能避免全身性的副作用。然而，由于癌细胞分布在许多转移性患者的全身各处，因此这种方法在这种情况下成功的可能性值得怀疑。
[0005]肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)疗法的使用已经表现出了显著的临床益处，各种恶性肿瘤(如转移性黑色素瘤、头颈癌和宫颈癌)患者中，客观缓解率高达55％，完全缓解率高达20％。简而言之，这种疗法利用自体T淋巴细胞的体外扩增，具体方式为：一开始利用IL
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2、抗CD3抗体和饲养细胞刺激来自切除的肿瘤的片段，从而在促进肿瘤抑制后，向已经接受淋巴细胞疗法的患者重新施用T细胞，使这些细胞生长为数十亿个。
[0006]TIL治疗成本高且花费时间长。因此，优化现有方法并确定缩短TIL扩增持续时间、提高扩增速率并获得更有利表型的方法将是有利的。

技术实现思路

[0007]本专利技术涉及一种通过将肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)扩增到TIL治疗群体中来促进哺乳动物癌症消退的方法，该方法包括(a)通过从哺乳动物身上切除下来的肿瘤中获得第一TIL群体来培养自体T细胞，(b)通过在包含IL
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2和一种或多种TME刺激剂的细胞培养基中培养第一TIL群体进行第一次扩增以产生第二TIL群体；(c)通过用额外的IL
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2、抗CD3抗体和抗原呈递细胞(APC)补充第二TIL群体的细胞培养基来进行第二次扩增，以产生第三TIL群体，其中第三TIL群体是治疗性群体；以及(d)在给予非清髓性淋巴细胞清除化学疗法后，向
哺乳动物施用治疗性T细胞群体，其中向哺乳动物施用T细胞，由此促进哺乳动物癌症的消退。
[0008]本专利技术的另一方面涉及治疗患有癌症的受试者的方法，该方法包括施用扩增的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)，包括：(a)通过从哺乳动物身上切除下来的肿瘤中获得第一TIL群体来培养自体T细胞，(b)通过在包含IL
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2和一种或多种TME刺激剂的细胞培养基中培养第一TIL群体进行第一次扩增以产生第二TIL群体；(c)通过用额外的IL
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2、抗CD3抗体和抗原呈递细胞(APC)补充第二TIL群体的细胞培养基来进行第二次扩增，以产生第三TIL群体，其中第三TIL群体是治疗群体；以及(d)在给予非清髓性淋巴细胞清除化学疗法后，向哺乳动物施用治疗性T细胞群体，其中向哺乳动物施用T细胞，由此促进哺乳动物癌症的消退。
[0009]本专利技术的另一方面涉及一种将肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)扩增到TIL治疗群体中的方法，(a)通过从哺乳动物身上切除下来的肿瘤中获得第一TIL群体来培养自体T细胞，(b)通过在包含IL
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2和一种或多种TME刺激剂的细胞培养基中培养第一TIL群体进行第一次扩增以产生第二TIL群体；(c)通过用额外的IL
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2、抗CD3抗体和抗原呈递细胞(APC)补充第二TIL群体的细胞培养基来进行第二次扩增，以产生第三TIL群体，其中第三TIL群体是治疗群体。
[0010]在一个或多个实施例中，一种或多种TME刺激剂选自以下组，组中包括：能够拮抗和/或抑制已知引起T细胞下调、失活和/或耗竭的T细胞(或其配体)上表达的受体的物质；能够使受体激动和/或刺激受体的物质，受体在已知引起T细胞上调、活化和/或恢复活力的T细胞上表达；能够拮抗和/或抑制可溶性分子和细胞因子及其受体的物质，已知可溶性分子和细胞因子及其受体会引起T细胞下调、失活和/或耗竭；以及能够下调和/或消耗调节T细胞从而有利于离体T细胞扩增的物质。
[0011]在一个或多个实施例中，一种或多种TME刺激剂是一种或多种检查点抑制剂或它们的配体的抑制剂，配体例如有抗PD1、抗PD
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L1、抗PD
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L2、抗CTLA
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4、抗
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LAG3、抗A2AR、抗B7
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H3、抗B7
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H4、抗BTLA、抗IDO、抗HVEM、抗IDO、抗TDO、抗KIR、抗NOX2、抗TIM3、半乳糖凝集素9抗体、抗VISTA、抗SIGLEC7/9，其中一种或多种检查点抑制剂或它们的配体的抑制剂可选地也被添加到第二次扩增中。
[0012]在一个或多个实施例中，能够拮抗和/或抑制已知引起T细胞下调、失活和/或耗竭的T细胞(或其配体)上表达的受体的物质选自以下组，组中包括：A：通过T细胞上的PD
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1受体起作用的物质，B：通过T细胞上的CTLA
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4受体起作用的物质，C：通过T细胞上的LAG
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3受体起作用的物质，D：通过T细胞上的TIGIT/CD226受体起作用的物质，E：通过T细胞上的KIR受体起作用的物质，F：通过T细胞上的TIM
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3受体起作用的物质，G：通过T细胞上的BTLA受体起作用的物质，和H：通过T细胞上的A2aR受体起作用的物质。
[0013]在一个或多个实施例中，A组物质选自彭布罗珠单抗、纳武利尤单抗、西米普利单抗、sym021、阿特珠单抗、阿维鲁单抗和德瓦鲁单抗中的一种或多种。
[0014]在一个或多个实施例中，B组物质选自伊匹单抗和曲美木单抗中的一种或多种。在一个或多个实施例中，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.用于治疗患有癌症的受试者的扩增的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)，所述治疗包括以下步骤：
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通过从哺乳动物身上切除下来的肿瘤中获得第一TIL群体来培养自体T细胞，
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通过在包含IL
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2和一种或多种TME刺激剂的细胞培养基中培养所述第一TIL群体进行第一次扩增以产生第二TIL群体；
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通过用额外的IL
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2、抗CD3抗体和抗原呈递细胞(APC)补充所述第二TIL群体的细胞培养基来进行第二次扩增，以产生第三TIL群体，其中所述第三TIL群体是治疗性群体；以及
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在给予非清髓性淋巴细胞清除化学疗法后，向哺乳动物施用所述治疗性T细胞群体，其中向哺乳动物施用所述T细胞，由此促进哺乳动物癌症的消退。2.扩增的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)用于促进癌症患者的癌症消退，所述消退包括以下步骤：
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通过从哺乳动物身上切除下来的肿瘤中获得第一TIL群体来培养自体T细胞，
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通过在包含IL
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2和一种或多种TME刺激剂的细胞培养基中培养所述第一TIL群体进行第一次扩增以产生第二TIL群体；
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通过用额外的IL
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2、抗CD3抗体和抗原呈递细胞(APC)补充所述第二TIL群体的细胞培养基来进行第二次扩增，以产生第三TIL群体，其中所述第三TIL群体是治疗性群体；以及
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在给予非清髓性淋巴细胞清除化学疗法后，向哺乳动物施用治疗性T细胞群体，其中向哺乳动物施用T细胞，由此促进哺乳动物癌症的消退。3.一种将肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)扩增到TIL治疗性群体中的方法，
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(a)通过从哺乳动物身上切除下来的肿瘤中获得第一TIL群体来培养自体T细胞，
‑
(b)通过在包含IL
‑
2和一种或多种TME刺激剂的细胞培养基中培养所述第一TIL群体进行第一次扩增以产生第二TIL群体；以及(c)通过用额外的IL
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2、抗CD3抗体和抗原呈递细胞(APC)补充所述第二TIL群体的细胞培养基来进行第二次扩增，以产生第三TIL群体，其中所述第三TIL群体是治疗性群体。4.根据权利要求1
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2所述的用途和根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述一种或多种TME刺激剂定义为一种或多种能够拮抗和/或抑制已知引起T细胞下调、失活和/或耗竭的T细胞(或其配体)上表达的受体的物质。5.根据权利要求4所述的用途和方法，其特征在于，能够拮抗和/或抑制已知引起T细胞下调、失活和/或耗竭的T细胞(或其配体)上表达的受体的物质选自：
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A：通过T细胞上的PD
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1受体起作用的物质。6.根据权利要求5所述的用途和方法，其特征在于，能够拮抗和/或抑制已知引起T细胞下调、失活和/或耗竭的T细胞(或其配体)上表达的受体的物质选自以下组中的每一个组的至少一个，组中包括：
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A：通过T细胞(或配体)上的PD
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1受体起作用的物质，和
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B：通过T细胞(或配体)上的CTL...

【专利技术属性】
技术研发人员：乌尔里克，
申请(专利权)人：希生物公司，
类型：发明
国别省市：