液相色谱-高分辨质谱快速测定奶粉中氯丙醇酯含量的方法技术

本发明专利技术公开了液相色谱

【技术实现步骤摘要】
液相色谱
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高分辨质谱快速测定奶粉中氯丙醇酯含量的方法


[0001]本专利技术涉及液相色谱
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高分辨质谱快速测定奶粉中氯丙醇酯含量的方法。

技术介绍

[0002]氯丙醇酯，是近年来发现的存在于婴幼儿配方奶粉中的一类新型污染物，其水解产物氯丙醇被证实具有致癌性、遗传毒性、肾脏毒性等。目前，食品中氯丙醇酯的检测对象主要集中在食用油中，常见的前处理技术包括：固相萃取、基质分散固相萃取、直接溶剂萃取、超声辅助提取等，主要目标是在保证氯丙醇酯类化合物高提取率的前提下，有效去除食用油中存在的高含量油脂—甘油三酯等非极性化合物的干扰，此类化合物在后续质谱分析中会产生强烈的离子化抑制效应，导致本就低含量的氯丙醇酯含量测定结果产生偏差或者未能检出，目前对于食用油中氯丙醇酯的研究己经在测定方法、形成机理、毒性研究及控制方法等方面取得了一定的进展。
[0003]但目前，关于婴幼儿配方奶粉中氯丙醇酯的相关研究还不够深入，尤其是针对复杂奶粉基质中目标化合物的提取净化方法尚未见报道。奶粉基质种类众多，成分复杂，除了添加量为20％左右的油脂外，其他添加的营养类化合物种类极其丰富，除此之外，一些有毒有害的化合物也会在奶粉中存在，包括：微生物、真菌毒素
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黄曲霉毒素以及奶粉基质中残留的农兽药等。因此，建立全面高效的前处理方法，是保证获取全面氯丙醇酯结构信息的重要前提。如何通过一次前处理，实现婴幼儿奶粉中氯丙醇酯的提取、净化工作，这是一个巨大的挑战。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于，提供一种利用液相色谱
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高分辨质谱快速测定奶粉中氯丙醇酯含量的方法。
[0005]本专利技术采用的技术方案是：
[0006]液相色谱
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高分辨质谱快速测定奶粉中氯丙醇酯含量的方法，所述氯丙醇酯为缩水甘油
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棕榈酸酯、缩水甘油
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硬脂酸酯、3
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氯丙醇
‑2‑
硬脂酸单酯、3
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氯丙醇
‑1‑
棕榈酸单酯、3
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氯丙醇
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1,2
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棕榈酸二酯、2
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氯丙醇
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1,3
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硬脂酸二酯、3
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氯丙醇
‑1‑
棕榈酸
‑2‑
硬脂酸二酯中的一种或多种；所述方法包括以下步骤：
[0007](A)样品前处理
[0008](1)从奶粉样品中提取脂肪样品，脂肪样品用甲醇提取，离心，得到有机相A及残渣A；
[0009](2)取步骤(1)的有机相A经C18固相萃取柱净化，甲醇淋洗，二氯甲烷和甲醇的体积比8:2的混合溶剂作为洗脱剂进行洗脱，所得洗脱液经氮吹浓缩近干，加入甲醇溶液复溶；
[0010](3)取步骤(1)的残渣A加入二氯甲烷和甲醇的体积比8:2的混合溶剂进行二次提取，离心，得到有机相B及残渣B；
[0011](4)取步骤(3)的有机相B，氮吹浓缩近干，加入甲醇溶液复溶，加入中性氧化铝粉充分震荡后离心，得到上清液C及沉淀C；
[0012](5)合并步骤(2)的甲醇溶液和步骤(4)的上清液C，氮吹浓缩，甲醇定容至2.0mL，滤膜过滤，得到供试品溶液；
[0013](B)高效液相色谱
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高分辨质谱检测
[0014]供试品溶液用高效液相色谱
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高分辨质谱联用仪检测，采用外标法定量，得到奶粉中7种氯丙醇酯含量。
[0015]所述步骤(1)中，所述从奶粉样品中提取脂肪样品，按照GB 5009.6
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2016《食品中脂肪的测定》中的方法三中的步骤17.1.2、步骤17.2、步骤17.3进行。
[0016]进一步，所述步骤(1)中，甲醇的体积用量以脂肪样品的质量计为8～20mL/g，优选10mL/g。
[0017]所述步骤(1)中，提取一般是震荡5～10min，超声提取20～30min。
[0018]所述步骤(1)中，离心一般12000～15000r/min转速下离心。
[0019]所述步骤(2)中，C18固相萃取柱使用前依次采用甲醇、水进行活化。
[0020]所述步骤(2)中，有机相A上样后通常平衡5min。
[0021]所述步骤(2)中，洗脱剂的体积一般为2个柱体积。
[0022]所述步骤(2)中，用来复溶的甲醇溶液的体积用量以脂肪样品的质量计为1～3mL/g，优选2mL/g。
[0023]所述步骤(3)中，二氯甲烷和甲醇的体积比8:2的混合溶剂的体积用量以脂肪样品的的质量计为8～20mL/g，优选10mL/g。
[0024]所述步骤(3)中，二次提取一般是震荡5～10min，超声提取20～30min。
[0025]所述步骤(3)中，离心一般12000～15000r/min转速下离心。
[0026]所述步骤(4)中，用来复溶的甲醇溶液的体积用量以脂肪样品的质量计为1～3mL/g，优选2mL/g。
[0027]所述步骤(4)中，中性氧化铝粉的用量与脂肪样品的质量比为0.5～1：1，优选0.5:1。
[0028]所述中性氧化铝粉末粒度优选100
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200目。
[0029]所述步骤(5)中，滤膜为0.22μm滤膜。
[0030]进一步，所述步骤(1)的样品前处理优选按以下步骤进行：
[0031](1)5.0g奶粉样品提取脂肪样品，所得脂肪样品加入10mL甲醇溶液震荡5min，超声提取20min，以12000r/min高速离心，得到有机相A及残渣A；(2)取上层有机相A经C18固相萃取柱净化，平衡5min，甲醇淋洗，用12mL的二氯甲烷和甲醇的体积比8:2的混合溶剂作为洗脱剂进行洗脱，所得洗脱液经氮吹浓缩近干，加入2.0mL甲醇溶液复溶；(3)残渣A加入10mL二氯甲烷和甲醇的体积比8:2的混合溶剂进行二次提取，震荡5min，超声提取20min，以12000r/min高速离心，得到有机相B及残渣B；(4)取上层有机相B，氮吹浓缩近干，加入2.0mL甲醇溶液复溶，加入0.5g中性氧化铝粉充分震荡，以12000r/min高速离心，得到上清液C及沉淀C；(5)合并(2)中的2.0mL甲醇溶液和(4)中的上清液C，氮吹浓缩，甲醇定容至2.0mL，过0.22μm滤膜，得供试品溶液待分析。
[0032]进一步，所述步骤(B)中采用高效液相色谱
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四极杆静电场轨道阱高分辨质谱仪。
[0033]进一步，所述步骤(B)中，高效液相色谱的条件为：
[0034]C18色谱柱，流动相A：0.02mM乙酸钠的甲醇
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水溶液，其中甲醇、水的体积比为9:1；流动相B：0.02mM乙酸钠的异丙醇
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甲醇溶液，其中异丙醇、甲醇的体积比为1:本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.液相色谱
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高分辨质谱快速测定奶粉中氯丙醇酯含量的方法，所述氯丙醇酯为缩水甘油
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棕榈酸酯、缩水甘油
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硬脂酸酯、3
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氯丙醇
‑2‑
硬脂酸单酯、3
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氯丙醇
‑1‑
棕榈酸单酯、3
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氯丙醇
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1,2
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棕榈酸二酯、2
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氯丙醇
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1,3
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硬脂酸二酯、3
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氯丙醇
‑1‑
棕榈酸
‑2‑
硬脂酸二酯中的一种或多种；其特征在于所述方法包括以下步骤：(A)样品前处理(1)从奶粉样品中提取脂肪样品，脂肪样品用甲醇提取，离心，得到有机相A及残渣A；(2)取步骤(1)的有机相A经C18固相萃取柱净化，甲醇淋洗，二氯甲烷和甲醇的体积比8:2的混合溶剂作为洗脱剂进行洗脱，所得洗脱液经氮吹浓缩近干，加入甲醇溶液复溶；(3)取步骤(1)的残渣A加入二氯甲烷和甲醇的体积比8:2的混合溶剂进行二次提取，离心，得到有机相B及残渣B；(4)取步骤(3)的有机相B，氮吹浓缩近干，加入甲醇溶液复溶，加入中性氧化铝粉充分震荡后离心，得到上清液C及沉淀C；(5)合并步骤(2)的甲醇溶液和步骤(4)的上清液C，氮吹浓缩，甲醇定容至2.0mL，滤膜过滤，得到供试品溶液；(B)高效液相色谱
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高分辨质谱检测供试品溶液用高效液相色谱
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高分辨质谱联用仪检测，采用外标法定量，得到奶粉中7种氯丙醇酯含量。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(2)中，洗脱剂的体积为2个C18固相萃取柱的柱体积。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(4)中，中性氧化铝粉的用量与脂肪样品的质量比为0.5～1：1。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(4)中，所述中性氧化铝粉末粒度为100
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200目。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(B)中，高效液相色谱的条件为：C18色谱柱，流动相A：0.02mM乙酸钠的甲醇
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水溶液，其中甲醇、水的体积比为9:1；流动相B：0.02mM乙酸钠的异丙醇
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【专利技术属性】
技术研发人员：周洁，李双，方科益，陈树兵，
申请(专利权)人：宁波海关技术中心，
类型：发明
国别省市：