HDAC6抑制剂在选择性诱导T细胞扩增中的用途制造技术

本发明专利技术涉及HDAC6抑制剂，例如化合物ACY

【技术实现步骤摘要】
HDAC6抑制剂在选择性诱导T细胞扩增中的用途


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体涉及HDAC6抑制剂在选择性诱导T细胞扩增中的用途。

技术介绍

[0002]记忆性干细胞样T细胞(T memory stem cells,TSCM)是T细胞的一个亚群，兼具记忆性细胞和干细胞的特点，处于记忆性T细胞早期分化阶段，能够分化为中央记忆性T细胞(central memory T cells,TCM)、效应记忆性T细胞(effector memory T cells,TEM)和效应性T细胞(effector T cells,TEF)。
[0003]现有研究表明，TSCM细胞与TCM细胞或TEM细胞相比，具有更强大的抗肿瘤能力，在机体内的生存能力也更加卓越，因此在肿瘤免疫治疗中具有很好的应用价值。由于TSCM细胞在人外周血T细胞中所占比例很少，约为2％
‑
4％，如何诱导TSCM细胞大量增殖成为关键。
[0004]然而，现有技术中缺乏较为简便高效地扩增TSCM细胞的方法，并存在使T细胞的增殖效率降低的缺点，不利于将获得的细胞进行下一步的应用。比如，用化合物TWS119培养诱导TSCM细胞的同时，T细胞的增殖效率会大幅度降低，T细胞仅能扩增1
‑
3倍。
[0005]这样的问题限制了TSCM细胞的应用，因此，需要一种能选择性扩增 TSCM细胞的方法，期望对T细胞的增殖效率影响较小，且不影响T细胞杀伤效率等与治疗能力相关的细胞特性。

技术实现思路

[0006]本专利技术提供了使用HDAC6抑制剂，具体为化合物ACY
‑
1215、ACY241 选择性诱导T细胞扩增的方法，及HDAC6抑制剂在制备TSCM细胞中的用途。本专利技术人发现，HDAC6抑制剂如化合物ACY
‑
1215、ACY241均在几乎不影响T细胞增殖的情况下，能够显著提升TSCM细胞占T细胞的比例，为体外扩增TSCM细胞提供了新的技术手段。
[0007]组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases，HDACs)可调节与细胞生长、转移、凋亡相关的多种细胞途径。HDACs抑制剂可以影响多种细胞效应，诱导细胞凋亡，阻碍细胞循环，抑制血管生成，其作为一种抗肿瘤制剂被广泛研究。HDAC6因其独特的结构和功能受到越来越多的关注，成为多种疾病潜在的治疗靶点，最受关注的主要是其在肿瘤及中枢神经系统中的作用。
[0008]研究证实，HDAC6抑制剂在治疗阿尔茨海默病、脑胶质瘤及神经保护方面的作用也受到越来越多研究者的关注。目前发现的HDAC6抑制剂主要包括ACY241、ACY
‑
1215、Tubacin、Tubastatin A等，这些抑制剂具有相似但不尽相同的特性及应用，主要用于抗肿瘤及中枢神经系统保护等方面。因HDAC6具有较高的特异性，疗效好，不良反应少，具有良好的应用前景。
[0009]化合物ACY
‑
1215的分子式为C
24
H
27
N5O3，名称为2
‑
(二苯基氨基)
‑
N
‑
[7
‑
(羟基氨基)
‑7‑
氧代庚基]‑5‑
嘧啶羧酰胺，分子量为433.5，CAS号为：1316214
‑
52
‑
4，分子结构式如
下所示：
[0010][0011]化合物ACY
‑
1215是一种有效的选择性HDAC6抑制剂，对HDAC6 的IC50值为4.7nM，对其他亚型的IC50值均＞1μM，对HDAC8有微弱活性(IC50值为0.1μM)。ACY
‑
1215在低剂量能有效诱导α
‑
微管蛋白乙酰化，仅在较高剂量下引起组蛋白H3、H4上赖氨酸的乙酰化，证实了其对HDAC6的特异性抑制作用。
[0012]在波替单抗(硼替佐米)处理过的多发性骨髓瘤细胞(MM细胞)中，随着多泛素化蛋白水平的增加，该药可显著破坏聚集体的形成，表明波替单抗和该药联用可抑制蛋白酶体和聚集体形成。低剂量ACY
‑
1215联合波替单抗可产生协同抗MM细胞增殖作用，同时延长内质网应激和促进细胞凋亡。在2种不同的异种移植SCID小鼠模型中，小鼠皮下注射人类MM细胞和静脉注射表达荧光素酶的人MM细胞后，联用上述两药，肿瘤生长明显减缓，小鼠总体存活时间显著延长。目前ACY
‑
1215单用或与地塞米松、波替单抗、来那度胺联用的治疗方式正在进行Ⅰ期、Ⅱ期临床试验。
[0013]化合物ACY241的分子式为C
24
H
26
ClN5O3，名称为2
‑
[(2
‑
氯苯基)苯基氨基]‑
N
‑
[7
‑
(羟基氨基)
‑7‑
氧代庚基]‑5‑
嘧啶甲酰胺，分子量为467.95，CAS 号为：1316215
‑
12
‑
9，分子结构式如下所示：
[0014][0015]ACY241是一种口服有活性的选择性HDAC6抑制剂，对HDAC6和 HDAC3的IC50值分别为2.6和46nM。在多种实体瘤细胞系中，用ACY241 和紫杉醇(paclitaxel)联用，能显著增加癌细胞死亡率。在卵巢癌细胞中，较低浓度ACY241能选择性地抑制HDAC6，而高浓度导致Ⅰ类HDAC均被抑制，在体内具有较好的安全性。
[0016]目前没有关于HDAC6抑制剂类以及以上两种化合物在选择性促进记忆性干细胞样T细胞增殖中的相关报道。
[0017]具体而言，本专利技术包括以下内容。
[0018]1.诱导记忆性干细胞样T细胞增殖的方法，其包括使用HDAC6抑制剂处理包含或能够产生所述记忆性干细胞样T细胞的细胞群(如PBMC细胞、CD3
+
T淋巴细胞、CD8
+
T淋巴细胞或CD4
+
T淋巴细胞)。
[0019]2.根据项1所述的方法，其中，所述HDAC6抑制剂为选自TubastatinA TFA，Tubastatin A，Pracinostat(SB939)，UF010，SKLB
‑
23bb，ACY
‑
775， BRD73954，
Citarinostat(化合物ACY
‑
241)，HPOB，MPI
‑
5a，CG347B， Tubastatin A HCl，Tubacin，TH34，WT161，CAY10603，ACY
‑
738，Tinostamustine(EDO
‑
S101)，BG45，Nexturastat A，SR
‑
4370，化合物 ACY
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.诱导记忆性干细胞样T细胞增殖的方法，其包括使用HDAC6抑制剂处理包含或能够产生所述记忆性干细胞样T细胞的细胞群(如PBMC细胞、CD3
+
T淋巴细胞、CD8
+
T淋巴细胞或CD4
+
T淋巴细胞)。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述HDAC6抑制剂为选自Tubastatin A TFA，Tubastatin A，Pracinostat(SB939)，UF010，SKLB
‑
23bb，ACY
‑
775，BRD73954，Citarinostat(化合物ACY
‑
241)，HPOB，MPI
‑
5a，CG347B，Tubastatin A HCl，Tubacin，TH34，WT161，CAY10603，ACY
‑
738，Tinostamustine(EDO
‑
S101)，BG45，Nexturastat A，SR
‑
4370，化合物ACY
‑
1215中的一种或多种，优选选自化合物ACY
‑
1215、化合物ACY241。3.根据权利要求2所述的方法，其中化合物ACY241的浓度为0.001至10uM，优选为0.001至0.1uM，更优选为0.001至0.03uM，独立地，化合物ACY
‑
1215的浓度为0.001至10uM，优选0.001至0.1uM，更优选0.001至0.01uM。4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中所述记忆性干细胞样T细胞经过基因修饰，例如表达嵌合抗原受体(CAR)或T细胞受体(TCR)。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述记忆性干细胞样T细胞包括为CD45RO
+
或CD45RO
‑
，且为CCR7
+
的记忆性干细胞样T细胞。6.根据权利要求5中任一项所述的方法，其中所述记忆性干细胞样T细胞进一步表达以下表型标志物中的一个或多个：CD45RA
+
、CD95
+
、CD27
+
、CD62L
+...

【专利技术属性】
技术研发人员：凌有国，朱丽萍，黄洁，吴昊天，
申请(专利权)人：江苏集萃医学免疫技术研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：