海洋PiericidinF及其衍生物在治疗宫颈癌中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种海洋微生物来源的化合物6

【技术实现步骤摘要】
海洋Piericidin F及其衍生物在治疗宫颈癌中的应用
一、

[0001]本专利技术是涉及一种新型的海洋微生物来源的化合物6
‑
甲氧基
‑2‑
(((2E，5E，7E，11E)
‑
10
‑
甲氧基
‑
3,7,9,11
‑
四甲基十三烷基
‑
2,5,7,11
‑
四烯
‑1‑
基)
‑3‑
甲基吡啶
‑4‑
醇6
‑
methoxy
‑2‑
((2E,5E,7E,11E)
‑
10
‑
methoxy
‑
3,7,9,11
‑
tetramethyltrideca
‑
2,5,7,11
‑
tetraen
‑1‑
yl)
‑3‑
methylpyridin
‑4‑
ol(Piericidin F)在治疗E6/E7阳性宫颈癌中的应用，属于化学药领域。
二、
技术介绍

[0002]宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，发病率仅次于乳腺癌。目前，全球每年宫颈癌新发病例超过46万，而我国每年新增13万余例，占全球病例的28％以上，同时临床病例显示，近年来宫颈癌发病呈现地区增长及发病年龄提前的特点。美国国立综合癌症网络(NCCN)在2018年公布的《宫颈癌临床实践指南》显示，基于顺铂的化疗是临床上宫颈癌的主要治疗方法。然而，长期使用顺铂及其衍生物会导致严重的耐药性，并伴有肾毒性，耳毒性和骨髓抑制。诱发宫颈癌的原因有很多，其中持续感染高危型人乳头瘤病毒(HPV)是诱发细胞癌变的最重要原因。目前已有研究表明，超过90％的宫颈癌与HPV感染有关。感染HPV病毒后，病毒基因整合到宿主细胞基因组中，表达致病癌蛋白E6/E7，这是宫颈癌的主要致病因素。因为这两种致癌蛋白在肿瘤细胞中选择性表达，所以E6/E7已被广泛研究作为E6/E7阳性宫颈癌治疗的潜在靶标。
[0003]目前已有多项研究表明，天然产物能够在不同水平靶向HPV E6/E7癌蛋白，具有良好的抗宫颈癌活性。例如，源自中草药的丹参酮IIA和汉黄芩素可通过在转录水平下调E6/E7诱导宫颈癌细胞凋亡。因此，寻找天然产物中靶向癌蛋白E6/E7的候选物作为潜在的抗宫颈癌先导化合物是一种有前景的策略。
[0004]Piericidins是由链霉菌产生的一种α
‑
吡啶酮类化合物，自1965年发现至今，已分离得到5类包括20余种Piericidin类化合物。近年来的研究指出，Piericidin类化合物除了具有抗菌、抗虫以及血管舒张等活性外，还具有良好的抗肿瘤活性。因此，我们从链霉菌属CHQ
‑
64的非产生突变株中分离并表征了一种新型杀粉蝶菌素类生物碱Piericidin F，研究了Piericidin F对人宫颈癌HeLa细胞的细胞毒性，并试图说明其活性的分子机制。
[0005]本专利技术以前并没有Piericidin F在治疗E6/E7阳性宫颈癌中的应用。而且Piericidin F能够从链霉菌分离提取，易获得，能够对Hela细胞的增殖产生抑制作用，是一种非常有前途的抗肿瘤药物。
[0006]6‑
甲氧基
‑2‑
(((2E，5E，7E，11E)
‑
10
‑
甲氧基
‑
3,7,9,11
‑
四甲基十三烷基
‑
2,5,7,11
‑
四烯
‑1‑
基)
‑3‑
甲基吡啶
‑4‑
醇的化学名为：36
‑
methoxy
‑2‑
((2E,5E,7E,11E)
‑
10
‑
methoxy
‑
3,7,9,11
‑
tetramethyltrideca
‑
2,5,7,11
‑
tetraen
‑1‑
yl)
‑3‑
methylpyridin
‑4‑
ol(Piericidin F)化学结构式见图1。
三、
技术实现思路

[0007]本专利技术的目的之一是证明了Piericidin F抗E6/E7阳性宫颈癌的作用。
[0008]本专利技术的目的之二是检测Piericidin F体外对HeLa细胞抑制作用及克隆形成的影响。
[0009]本专利技术的目的之三是检测Piericidin F对HeLa细胞凋亡以及线粒体膜电位的影响。
[0010]本专利技术的目的之四是探究了Piericidin F对E6/E7蛋白表达及功能的影响。
[0011]本专利技术的目的之五是探究了Piericidin F诱导E6/E7蛋白降解的降解途径。
[0012]为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：
[0013]采用MTT技术，检测Piericidin F对E6/E7阳性的人宫颈癌细胞(HeLa)增殖的抑制作用。
[0014]采用平板克隆技术，检测Piericidin F在体外对HeLa细胞单克隆形成的影响。
[0015]采用Hoechst 33342染色、WesternBlotting和MTT技术，检测Piericidin F对HeLa细胞凋亡的影响。
[0016]采用流式细胞术和SRB法，检测Piericidin F对HeLa细胞线粒体膜电位(MMP)的影响。
[0017]采用Western Blotting技术，检测Piericidin F对癌蛋白E6/E7及其功能的影响。
[0018]采用Western Blotting技术，探究癌蛋白E6/E7的降解途径。
[0019]与现有技术相比，本专利技术的优点和技术效果是：本专利技术证明了Piericidin F的抗E6/E7阳性宫颈癌的作用，发现其对HeLa细胞有明显的抑制作用，与传统的化疗药物和靶向药物相比，该化合物能够从致病源头E6/E7发挥作用，而不是非特异性的细胞毒作用或者作用在E6/E7下游信号通路。同时系统性的阐明了其治疗E6/E7阳性宫颈癌的分子机制。
[0020]Piericidin F能够在体外有效地抑制人宫颈癌细胞(HeLa)的增殖。同时，Piericidin F还能够在体外抑制HeLa细胞单克隆的形成，而且Piericidin F能够诱导HeLa细胞发生caspase依赖的细胞凋亡并破坏HeLa细胞的线粒体功能。我们进一步探究了Piericidin F抑制HeLa细胞增殖的分子机制，发现Piericidin F能够降解癌蛋白E6/E7并抑制其功能。而且，Piericidin F通过UPS诱导癌蛋白E6/E7的降解。说明Piericidin F对本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.6
‑
甲氧基
‑2‑
(((2E，5E，7E，11E)
‑
10
‑
甲氧基
‑
3,7,9,11
‑
四甲基十三烷基
‑
2,5,7,11
‑
四烯
‑1‑
基)
‑3‑
甲基吡啶
‑4‑
醇及其衍生物在治疗E6/E7阳性宫颈癌中的应用。其化学结构式为：2.根据权利要求1所述的抗宫颈癌作用，其特征在于所说的肿瘤细胞为：E6/E7阳性的人宫颈癌细胞系。3.根据权利要求1所述的抗宫颈癌方面的应用，其特征在于：所述的6
‑
甲氧基
‑2‑
(((2E，5E，7E，11E)
‑
10
‑
甲氧基
‑
3,7,9,11
‑
四甲基十三烷基
‑
2,5,7,11
‑
四烯
‑1‑
基)
‑3‑
甲基吡啶
‑4‑
醇可以制作治疗E6/E7阳性的宫颈癌的药物。4.根据权利要求1所述的抗宫颈癌方面的应用，其特征在于：所述的6
‑
甲氧基
‑2‑
(((2E，5E，7E，11E)
‑
10
‑
甲氧基
‑
3,7,9,11
‑
四甲基十三烷基
‑
2,5,7,11
‑
四烯
‑1‑
基)
‑3‑
甲基吡啶
‑4‑
醇可以在体外有效地抑制HeL...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘明，车茜，陈一凡，李德海，董辉，卢绪秀，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：