新型抗癌肽及其用途制造技术

本发明专利技术涉及用于治疗癌症的药学上可接受的组合物，所述组合物包含一个或多个肽，所述肽的序列包含基序GLLxLLxALLLxAG，其中x独立地选自精氨酸(R)、组氨酸(H)、赖氨酸(K)、天冬氨酸(D)或谷氨酸(E)以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。本发明专利技术还涉及药学上可接受组合物的肽、包含所述药学上可接受组合物的试剂盒、编码所述肽的核苷酸和表达所述肽的载体。编码所述肽的核苷酸和表达所述肽的载体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新型抗癌肽及其用途


[0001]本专利技术涉及可用于治疗癌症的抗癌肽(ACPs)家族。

技术介绍

[0002]肿瘤在细胞水平上是异质性的，由一系列不同亚型的癌细胞组成。在这些亚型中，癌症干细胞(cancer stem cells，CSC)逐渐被认为是使用现有抗癌药物进行传统药物治疗的主要难点。乳腺癌是世界上第二常见的癌症，主要发生于女性。多项研究表明，乳腺癌干细胞可能对传统抗癌药物产生耐药性，从而存活、自我更新、分化和复发1‑6。肿瘤干细胞很容易对抗癌药物产生耐药性，而实体瘤的化疗通常会导致患者中耐药肿瘤干细胞的比例显著增加。这可能导致复发和转移的形成。此外，同一患者体内的乳腺肿瘤可能不同，常规抗癌药物可能会失效7‑9。由于阿霉素等常用抗癌药物对健康组织的毒性通常很高，导致肝脏、肾脏和心脏等器官的急性损伤，因此难以进行高剂量治疗
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。因此，迫切需要开发新的抗癌药物，以提高对癌细胞的选择性，在足以杀死实体瘤中所有巨块型癌症和癌症干细胞的剂量下，使健康组织不受损害。

技术实现思路

[0003]在本专利技术的第一方面，提供了一种用于治疗癌症的药学上可接受的组合物，所述组合物包含一个或多个肽，所述肽的序列包含基序GLLxLLxLLLxAAG，其中每个x独立地选自精氨酸(R)、组氨酸(H)、赖氨酸(K)、天冬氨酸(D)或谷氨酸(E)，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。
[0004]专利技术人惊奇地发现，符合所要求保护的公式的一系列肽提高了对癌细胞的选择性，在足以杀死实体瘤中所有巨块型癌症和CSC的剂量下，使健康组织不受伤害。与许多传统抗癌药物不同，本文开发的成孔膜活性的肽靶向并破坏质膜以杀死癌细胞。这消除了必须将药物运输到细胞质中的复杂性，因此，与传统化疗药物相比，所述肽改善了肿瘤的渗透性。当前要求保护的肽通过选择性地靶向癌细胞的质膜并在其中形成孔来发挥作用，从而通过使其电化学梯度发生短路来杀死细胞。不希望受到理论的约束，我们认为这些肽直接靶向癌细胞膜的脂质成分和化学微环境。因此，由于肿瘤细胞很难改变其脂质成分，肽诱导耐药性的可能性要小得多(类似于细胞很难对洗涤剂产生耐药性)
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。
[0005]所公开的几种肽具有抗巨块型癌症和CSC的纳摩尔活性，与当前批准的抗癌药物(如盐霉素)相当。此外，在目前最好的体外乳腺癌模型之一，即通过将细胞生长成球形团块来模拟真实实体瘤的乳腺球体模型中，本文公开的几种肽对癌细胞表现出优异的活性，同时对正常健康细胞保持较低的毒性。
[0006]所述肽以L和D型氨基酸形式(后者是体内抗蛋白酶降解稳定性的主要优势)发挥作用，以极低微摩尔浓度(在某些情况下为纳摩尔浓度)选择性地消除二维生长的癌细胞，以及三维(球状)癌细胞培养物。非癌人类乳腺和肾细胞需要3到200倍以上的浓度才会受到伤害。
[0007]这些肽价格低廉，合成简单，易于修饰和高通量筛选，并为特异性靶向癌细胞提供化学和结构库。
[0008]当前要求保护的肽是从头设计的，没有已知的天然类似物，通过与现有肽数据库的比较证实了这一点。这类短柔性肽的免疫原性较低，因此适合制药应用。
[0009]如本文所述，术语“肽”指任何包含通过肽键或修饰的肽键彼此连接的氨基酸的肽，即肽电子等排体。所述肽通常将包含天然存在的氨基酸，但可包括通过自然过程(例如翻译后加工)或通过化学修饰技术修饰的氨基酸序列，这在本领域是众所周知的。这些修饰在基础文本中有很好的描述。所述修饰可以发生在肽中的任何位置，包括肽主链、氨基酸侧链和氨基或羧基末端。应了解，相同类型的修饰可在给定肽中的多个位点以相同或不同程度存在。此外，给定的肽可能包含许多类型的修饰。
[0010]优选地，所述肽是分离的肽。术语“分离”指将肽从其原始环境中去除。例如，存在于活体动物中的肽未被分离，但从自然系统中的部分或全部共存物质中分离出的相同肽或此类肽的片段是分离的肽。这类肽可以是载体的一部分和/或所述肽可以是组合物的一部分，并且仍然是分离的，因为这类载体或组合物不是其自然环境的一部分。
[0011]包含所述肽的药物组合物可用于人类或动物在人类和兽医中的用途，并且通常将包含一种或多种合适的赋形剂。用于治疗用途的可接受赋形剂在药学领域是众所周知的，并在Remington's Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.(A.R.Gennaro edit.1985)中进行了描述。药物赋形剂的选择可以根据预期的给药途径和标准药学实践进行选择。所述药物组合物可包括作为赋形剂的任何合适的粘合剂、润滑剂、悬浮剂、包衣剂或增溶剂，或除此之外的赋形剂。
[0012]可在所述药物组合物中提供防腐剂、稳定剂和染料。防腐剂的例子包括苯甲酸钠、山梨酸和对羟基苯甲酸酯。也可使用抗氧化剂和悬浮剂。
[0013]所述药物组合物还可包含促进耐受的佐剂和/或促进耐受的细胞。促进耐受的佐剂包括IL
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10、重组霍乱毒素B亚单位(rCTB)、Toll样受体2的配体，以及调节免疫应答的生物制剂和单克隆抗体，如抗CD3和共刺激阻断剂，它们可以与所述肽共同施用。促进耐受的细胞包括未成熟树突状细胞和经维生素D3(1α,25
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二羟基维生素D3)或其类似物处理的树突状细胞。
[0014]当癌症被“治疗(treated)”时，这意味着癌症的一个或多个临床表现得到改善。这并不意味着癌症的症状已经完全治愈，从而使其不再出现在患者身上，尽管在某些方法中，情况可能是这样。“治疗(treatment)”使得一种或多种癌症症状比治疗前减轻。例如，肿瘤可以缩小或完全根除。
[0015]本专利技术的第二方面涉及用于制备治疗癌症的药物的药学上可接受的组合物，所述组合物包含一个或多个肽，所述肽的序列包含基序GLLxLLxALLLxAG，其中每个x独立地选自精氨酸(R)、组氨酸(H)、赖氨酸(K)、天冬氨酸(D)或谷氨酸(E)，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。
[0016]在一个实施方案中，所述肽可包含选自SEQ ID NO:1
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36中的任一个或其混合物的序列。在另一实施方案中，肽可由SEQ ID NO:1
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36中任一个的序列组成。
[0017]在一个实施方案中，所述药学上可接受的组合物包含具有包含基序GLLxLLELLLxAAG的序列的肽，其中x选自精氨酸(R)、组氨酸(H)、赖氨酸(K)、天冬氨酸(D)或
谷氨酸(E)及其混合物。专利技术人惊奇地发现，具有这种序列的肽对癌细胞有更好的选择性。
[0018]在一个实施方案中，所述药学上可接受的组合物包含具有包含基序GLLxLLxALLLxAG的序列的肽，其中x选自精氨酸(R)、组氨酸(H)、赖氨酸(K)、天冬氨酸(D)或谷氨酸(E)及其混合物，但其中所述序列不包含SEQ ID NO:29或SEQ ID NO:33。
[0019]在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于治疗癌症的药学上可接受的组合物，所述组合物包含一个或多个肽，所述肽的序列包含基序GLLxLLxLLLxAAG，其中每个x独立地选自精氨酸(R)、组氨酸(H)、赖氨酸(K)、天冬氨酸(D)或谷氨酸(E)以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。2.一种用于制备治疗癌症的药物的药学上可接受的组合物，所述组合物包含一个或多个肽，所述肽序列包含基序GLLxLLxLLLxAAG，其中每个x独立地选自精氨酸(R)、组氨酸(H)、赖氨酸(K)、天冬氨酸(D)或谷氨酸(E)，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。3.根据任一前述权利要求所述的药学上可接受的组合物，其中所述基序为GLLxLLELLLxAAG。4.根据任一前述权利要求所述的药学上可接受的组合物，其中所述序列不包括SEQ ID NO:29或SEQ ID NO:33。5.根据权利要求1或2所述的药学上可接受的组合物，其中所述序列包含选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:26的序列及其混合物。6.根据权利要求3所述的药学上可接受的组合物，其中所述序列包含选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:26的序列及其混合物。7.根据权利要求3所述的药学上可接受的组合物，其中所述序列包含选自SEQ ID NO:25和/或SEQ ID NO:26的序列。8.根据任一前述权利要求所述的药学上可接受的组合物，其中所述癌症为乳腺癌。9.根据任一前述权利要求所述的药学上可接受的组合物，其中所述基序进一步包含C末端的色氨酸残基(W)。10.根据任一前述权利要求所述的药学上可接受的组合物，其中所述肽序列包含基序GLLxLLxLLLxAAG。11.根据任一前述权利要求所述的药学上可接受的组合物，其中所述组合物用于与化疗剂联合使用。12.根据任一前述权利要求所述的药学上可接受的组合物，其中所述组合物用于静脉给药。13.根据任一前述权利要求所述的药学上可接受的组合物，其中所述组合物用于以1nM至约10000nM、优选约10nM至约5000nM、更优选约100nM至约500nM的剂量施用。14.根据任一前述权利要求所述的药学上可接受的组合物，其中所述肽为L型。15.根据任一前述权利要求所述的药学上可...

【专利技术属性】
技术研发人员：马丁，
申请(专利权)人：伦敦大学国王学院，
类型：发明
国别省市：