一种抗体偶联药物-连接子LND1042的合成方法技术

本发明专利技术提供了一种抗体偶联药物

【技术实现步骤摘要】
一种抗体偶联药物
‑
连接子LND1042的合成方法


[0001]本专利技术涉及一种抗体偶联药物
‑
连接子LND1042(MPB
‑
VC
‑
PAB
‑
DMAE
‑
PNU159682)的合成方法，属于有机药物制备


技术介绍

[0002]抗体药物偶联物(Antibody drug conjugate，简称ADC)是一类新型的抗肿瘤药物，其原理是将细胞毒素连接在抗体上，通过抗体对癌细胞表面特定抗原的识别，通过内吞作用进入癌细胞，从而将细胞毒素运输到靶点，达到靶向性治疗恶性肿瘤的目的。ADC与传统的小分子抗肿瘤药物相比，因能借助抗体的靶向识别性与毒素的高活性，故更具备特异性和有效性。
[0003]ADC包括三个不同的组成部分，即抗体、连接子和细胞毒素。抗体实现靶向性，连接子保证在ADC在血液转运过程中的稳定性，而到达作用靶点后，毒素发挥对癌细胞的杀伤作用。
[0004]根据作用机制的不同，适用于ADC的毒素分为微管类抑制剂(Microtubule inhibitors)，DNA损伤剂(DNA damaging agents)，RNA聚合酶抑制剂(RNApolymerase inhibitors)等。
[0005]目前，市场上销售和临床试验中的ADC所采用的毒素主要为微管类抑制剂，主要包括DNA拓扑异构酶I(topoisomerase I)抑制剂设计的化合物，比如Dxd，以及基于美登素(Maytansine
‑
based)设计的化合物，比如DM1和DM4；DNA拓扑异构酶II(topoisomerase II)抑制剂设计的化合物，比如一种高效的蒽环类新霉素代谢产物PNU
‑
159682具有出色的细胞毒性。
[0006]连接子方面，主要应用的为不可裂解型，如缬氨酸
‑
瓜氨酸(Valine
‑
Citriline)和环己基甲酸(MCC)，经过溶酶体水解后，药物仍然具有活性，并通过连接区与某个氨基酸残基结合在一起。
[0007]抗体药物偶联物的形成方式有多种。既可以通过抗体上的氨基或巯基和药物连接子进行化学反应偶联，也可以对抗体进行修饰，在抗体上引入特定功能基后，再和药物连接子进行化学反应偶联或酶催化反应偶联。
[0008]其中，抗体药物毒素分子LND1042(MPB
‑
VC
‑
PAB
‑
DMAE
‑
PNU159682，结构如下)是一种新型的用于抗体偶联药物的中间体。
[0009][0010]我们开发的LND1042的合成方法包括以下两种路线。
[0011]合成线路一：
[0012][0013]在路线一的开发中，化合物LND1042
‑
4的合成收率很低，反应有很多副反应发生，制约着整个路线的收率和成本控制。
[0014]合成线路二：
[0015][0016]由于在路线一中化合物LND1042
‑
4的合成收率很低，反应有很多副反应发生，换用路线二，用保护基团保护的DMAE(N，N
′‑
二甲基乙二胺)，再通过脱保护拿到高收率的LND1042
‑
4。
[0017]在实际的合成实践中，Boc保护的LND1042
‑
4(LND1042
‑
5)的反应转化率和收率很高，但是在脱保护阶段Boc保护的LND1042
‑
4，尝试不同的脱保护试剂如：HCl/二氧六环、HCl/EtOAc、HCl/Et2O、TFA、TosOH/THF
‑
CH2C12、Me3SiI/CHCl3或者CH3CN，收率都偏低，并且有很多副反应(水解、断链等)发生；
[0018]将保护基团换成Fmoc后，Fmoc保护的LND1042
‑
4(LND1042
‑
5)的反应转化率和收率同样很高，但是在脱保护阶段Fmoc保护的LND1042
‑
4，尝试不同的脱保护试剂如：二乙胺、二异丙胺、1，8
‑
二偶氮杂双螺环[5.4.0]十一
‑7‑
烯(DBU)、哌啶、乙醇胺、环己胺、吗啡啉、吡咯烷酮2等反应有很多副反应发生，收率偏低。
[0019]所以路线二最终的总收率依然很低，难以放大生产。

技术实现思路

[0020]为了解决上述开发的技术中存在的问题，我们开发了路线三，即本专利技术重点保护的路线方法；本专利技术的目的在于提供一种可以高效合成，易于放大，便于商业化生产的LND1042(MPB
‑
VC
‑
PAB
‑
DMAE
‑
PNU159682)的合成方法。
[0021]为了实现上述技术目的，本专利技术提供了一种抗体偶联药物
‑
连接子LND1042(MPB
‑
VC
‑
PAB
‑
DMAE
‑
PNU159682)的合成方法，该合成方法包括以下步骤：
[0022]将化合物VC
‑
PAB和MPB
‑
OSu(4
‑
(4
‑
马来酰亚胺基苯基)丁酸琥珀酰亚胺酯，LND1 042
‑
1)在第一溶剂中搅拌，加入DIPEA(N，N
′‑
二异丙基乙胺)，反应1.5h
‑
2h，反应液滴加入混合溶剂，固体析出，抽滤，烘干，得到MPB
‑
VC
‑
PAB(LND1042
‑
2)；
[0023]将所述MPB
‑
VC
‑
PAB(LND1042
‑
2)在第一溶剂中搅拌，加入DNPC(二(对硝基苯)碳酸酯)和DIPEA(N，N
′‑
二异丙基乙胺)反应2.5h
‑
4h，反应液滴入混合溶剂，固体析出，抽滤，烘干，得到MPB
‑
VC
‑
PAB
‑
PNP(LND1042
‑
3)；
[0024]将所述PNU
‑
TBS(LND1042
‑
6)溶于第二溶剂中，降温至
‑
5至0℃加入TBAF(四丁基氟化铵)，反应20
‑
30min，分液萃取，干燥浓缩，得到化合物PNU
‑
159682(LND1042
‑
7)；
[0025]将所述PNU
‑
159682(LND1042
‑
7)溶于第三溶剂，加入DNPC(二(对硝基苯)碳酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗体偶联药物
‑
连接子LND1042的合成方法，该合成方法包括以下步骤：将化合物VC
‑
PAB和4
‑
(4
‑
马来酰亚胺基苯基)丁酸琥珀酰亚胺酯在第一溶剂中搅拌，加入N，N
′‑
二异丙基乙胺，反应1.5h
‑
2h，反应液滴加入混合溶剂，固体析出，抽滤，烘干，得到MPB
‑
VC
‑
PAB；将所述MPB
‑
VC
‑
PAB在第一溶剂中搅拌，加入二(对硝基苯)碳酸酯和N，N
′‑
二异丙基乙胺反应2.5h
‑
4h，反应液滴入混合溶剂，固体析出，抽滤，烘干，得到MPB
‑
VC
‑
PAB
‑
PNP；将所述PNU
‑
TBS溶于第二溶剂中，降温至
‑
5至0℃加入四丁基氟化铵，反应20
‑
30min，分液萃取，干燥浓缩，得到化合物PNU
‑
159682；将所述PNU
‑
159682溶于第三溶剂，加入二(对硝基苯)碳酸酯，冰水搅拌降温0
‑
5℃，加入三乙胺、检测原料转化完全，得到中间体PNU
‑
PNP，加入N，N
′‑
二甲基乙二胺，0
‑
5℃反应1h
‑
2h，检测体系反应完毕，反应液浓缩，中压反相过柱纯化冻干，得到化合物PNU
‑
DMAE；将所述MPB
‑
VC
‑
PAB
‑
PNP和所述PNU
‑
DMAE溶于第一溶剂中，冰浴降温0
‑
5℃搅拌5
‑
10min，加入N，N
′‑
二异丙基乙胺，自然升温20
‑
25℃反应2
‑
3h，检测原料反应完毕，中压反相制备，收集洗脱液，冻干，得到MPB
‑
VC
‑
PAB
‑
DMAE
‑
PNU159682。2.根据权利要求1所述的合成方法，其中，所述制备MPB
‑
VC
‑
PAB时，所述VC
‑
PAB、4
‑
(4
‑
马来酰亚胺基苯基)丁酸琥珀酰亚胺酯、第一溶剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔令配，夏德银，张倩倩，李海泓，
申请(专利权)人：联宁苏州生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：