小花清风藤新多糖及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种小花清风藤新多糖，其平均分子质量为4.057

【技术实现步骤摘要】
小花清风藤新多糖及其应用


[0001]本专利技术提供一种小花清风藤新多糖及在制药上的应用，属于天然产物分离提取


技术介绍

[0002]小花清风藤(Sabia parvuflora Wall.ex Roxb.)是清风藤属一种常绿木质藤本植物。主要分布在贵州黔西南州等喀斯特地貌的天然丛林或灌木丛中，广西和云南也有零星分布[唐继方,邓朝义,卢永成.黔西南州小花清风藤资源分布及利用状况调查.贵州林业科技,2002,30(3):8
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10,18]。以小花清风藤为主要原料开发的“花桅清肝颗粒”(国药准字Z20025804)，该药治疗黄疽性肝炎的有效率达93％。据报道，以小花清风藤茎叶鲜品水煎服或制成的冲剂口服，单药治疗甲型肝炎31例和乙型肝炎12例，前者转阴有效率96.8％，后者93.6％[温迪,孙庆文,潘国吉,等.清风藤属药用植物研究进展.贵州科学,2016,34(3):25
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31]。现代药理学研究证明，小花清风藤具有保肝护肝[李建桥,李玉玲,胡建忠,等.小花清风藤水提物对乙酰氨基酚致小鼠药物性肝损伤保护作用.中国药理学与毒理学杂志,2019,33(09):733.；张学学,赵东晓,李建桥,等.小花清风藤茎叶提取工艺优化及保肝活性研究.华中师范大学学报(自然科学版),2020,54(1):65
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69,73.]、抗病毒[曲新艳,张会敏,张晓娟,等.小花清风藤水提物体内抗流感病毒的研究.生物技术通讯,2015,26(6):802
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804.]、类风湿关节炎[王茂林,王永萍,杨奕樱,等.小花清风藤对类风湿关节炎大鼠TNF
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α和MMP
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9表达的影响.湖南中医杂志,2018,34(3):154
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157.；许欢,潘书涵,王永萍,等.小花清风藤醇提液对RA大鼠相关蛋白的影响.中药药理与临床,2018,34(6):87
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92.]、降血脂[Fan D,Wang Q,Wang Y,et al.New compounds inhibiting lipid accumulation from the stems of Sabia parviflora.Fitoterapia,2018,128:218
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223.]和抗氧化活性[王小贤,田甜,苏香萍,等.小花清风藤绿茶制备工艺及其抗氧化活性.食品工业,2019,40(7):29
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33.]等药理活性。根据文献记载，小花清风藤的化学成分主要分为五环三萜类[陈谨,邓赟,唐天君,等.小花清风藤三萜成分的研究.中草药,2004,1:20
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21.]、生物碱类[赵兰君,王玉伟,李志峰,等.小花清风藤化学成分的分离与鉴定.中草药,2018,49(3):544
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548.]、芳香苷类[朱仝飞,李萍,孙庆文,等.小花清风藤叶的化学成分研究.广西植物,2019,39(4):511
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515.]、苯丙素类[邓赟,陈谨,陈斌,等.小花清风藤生物碱成分的研究.天然产物研究与开发,2003,4:322
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323.]、黄酮类[潘国吉,孙庆文,徐文芬,等.小花清风藤中黄酮类成分的研究.中成药,2020,42(3):662
‑
665.]。小花清风藤化学成分研究主要集中在醇提物上，对其水提物的化学成分研究却鲜有报道，其水提物的保肝护肝活性也仅限于水部位总提物的药理活性研究。

技术实现思路

[0003]针对上述技术问题，本专利技术从茎和叶中的水提物中分离纯化得到SPT1，并鉴定了其结构，评价了其保肝护肝活性和对PTP1B酶的抑制活性，实验结果证明SPT1具有一定的保
肝作用和PTP1B酶抑制活性，其结果为民间药物在肝炎治疗中的应用提供了依据。
[0004]小花清风藤新多糖，该新多糖平均分子质量为4.057
×
103Da，由α
‑
葡萄糖构成组成，糖苷键连接方式是1
→
6，结构式为：
[0005]SPT1结构及HMBC和NOESY关键部位。
13
C
‑
NMR显示葡萄糖的6个碳信号，δC 65.7，69.7，70.3，71.5，73.5，97.8。1H
‑
NMR显示末端质子信号δH 4.98(J＝2.5Hz)。通过NOESY(H
‑
6/H
‑
1)与质子耦合常数的相关性，确定葡萄糖为α型。HMBC表明H
‑
1与C
‑
6有关，说明SPT1的糖苷键连接方式是1
→
6。
[0006]所述的小花清风藤新多糖的提取方法，将小花清风藤新多糖经加水回流提取后，采用质量浓度25
‑
35％的乙醇沉淀，得到的多糖经Sephadex G
‑
100纯化、超纯水洗脱、Sephadex G
‑
200纯化、超纯水洗脱得到小花清风藤新多糖。
[0007]本专利技术的又一技术方案是将所述的小花清风藤新多糖在制备治疗保肝护肝的药物上的应用。具体的，本专利技术将小花清风藤新多糖在制备治疗四氯化碳损伤的L
‑
O2细胞的保肝护肝的药物上的应用。
[0008]本专利技术还提供一种小花清风藤新多糖在制备治疗或改善2型糖尿病或肥胖症的药物上的应用。所述的小花清风藤新多糖在制备抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B的药物上的应用。
[0009]小花清风藤是布依族、苗族的民间用药，用其根茎入药，可用于医治急性黄疸型肝炎。本专利技术对小花清风藤的茎和叶部位进行水提30％醇沉，通过葡聚糖凝胶柱色谱分离纯化得到单体多糖SPT1，利用NMR、GPC、AFM等波谱学手段鉴定多糖信息，实验结果显示：SPT1由α
‑
葡萄糖构成，连接方式为1
→
6，其平均分子质量为4.057KDa，其形貌为球形团聚体，MTT实验结果表明新多糖SPT1具有一定的保肝护肝活性。同时，PTP1B抑制活性结果表明，SPT1对PTP1B有抑制作用。抑制PTP1B活性是防治糖尿病及肥胖等代谢性疾病的有效途径。因此,本实验为进一步研究或能够找到潜在的用于治疗或改善2型糖尿病和肥胖症的新的PTP1B抑制剂提供科学依据。
[0010]《中国民族药志》记载，小花清风藤茎叶适量，煎水当茶喝可以防治黄疸型传染性肝炎。因此，本实验进一步研究了小花清风藤水提物的化学成分，丰富了小花清风藤化合物保肝活性的研究，为其物质基础研究提供了依据，为民间用药治疗肝炎提供了依据。
附图说明
[0011]图1为单糖组成分析结果，其中，A为衍生化混合对照溶液，B为衍生阴性对照溶液，C为衍生化试验溶液。
[0012]图2为小花清风藤新多糖的扫描电镜图，其中，A为放大50倍，B为放大200倍，C为放大1000倍，D为放大10000倍，E为放大20000倍。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.小花清风藤新多糖，其特征在于，该新多糖平均分子质量为4.057
×
103 Da，由α
‑
葡萄糖构成组成，糖苷键连接方式是1
→
6，结构式为：。2.权利要求1所述的小花清风藤新多糖的提取方法，其特征在于，将小花清风藤新多糖经加水回流提取后，采用质量浓度25
‑
35%的乙醇沉淀，得到的多糖经Sephadex G
‑
100纯化、超纯水洗脱、Sephadex G

【专利技术属性】
技术研发人员：刘呈雄，李曼姝，吴思靖，柯银铅，贺海波，邹坤，
申请(专利权)人：三峡大学，
类型：发明
国别省市：