化合物、缀合物及其用途制造技术

本发明专利技术提出了化合物，该化合物具有式(I)和(II)所示结构。本发明专利技术还提出了该化合物与药物分子连接的缀合物，以及所述化合物和缀合物的用途，例如在检测和治疗中的用途。例如在检测和治疗中的用途。

【技术实现步骤摘要】
化合物、缀合物及其用途


[0001]本专利技术涉及生物
，具体地，本专利技术涉及化合物、缀合物及其用途，更具体地，本专利技术涉及化合物、缀合物、制备化合物的方法、组合物及其用途。

技术介绍

[0002]去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoproteinreceptor，ASGPR)是数量丰富的一种异源低聚物的内吞型受体，主要存在于肝脏实质细胞朝向窦状隙一侧的细胞膜表面，具有对糖的特异性识别，由于各种糖蛋白在用酶水解或用酸解除去末端唾液酸后，暴露出的次末端是半乳糖残基，所以ASGPR的糖结合特异性实际上在于半乳糖基，故又称半乳糖特异性受体。ASGPR主要分布于肝脏实质细胞，其他细胞含量低，因此成为肝脏定向转运的最佳受体。
[0003]末端为非还原性的半乳糖(Gal)或N
‑
乙酰半乳糖胺(GalNAc)残基的糖蛋白均可以被ASGPR识别，GalNAc与ASGPR结合的亲和性比Gal高约50倍(lobst STet al,J Biol Chem，1996，271(12):6686
‑
6693)。体外实验表明，成簇的糖残基可以通过同时占据受体的结合位点而使其亲和性远高于不成簇的糖残基，亲和力的次序为：四触角>三触角>>双触角>>单触角半乳糖苷(Lee YC，et al，J Biol Chem，1983，258(1):199
‑
202)。
[0004]ASGPR受体介导的肝靶向寡核苷酸是核酸创新药物研究领域的新突破。2012年，美国Alnylam制药公司将前人研究的三触角GalNAc结构同小干扰RNA(siRNA)共价联接，实现了体内siRNA的肝靶向递送。应用这项技术，研究人员开展了淀粉样病变、血友病、高胆固醇血症、肝脏卟啉、乙型肝炎等疾病的药物开发，2019年第一个GalNAc
‑
siRNA药物上市，两个药物正在申请上市，十几个候选药物已经进入临床研究中(http://www.alnylam.com/product
‑
pipeline/)。2014年，美国ISIS制药将三触角GalNAc与反义核酸共价连接，实现动物体内肝靶向给药，连接后反义核酸的活性提高了10倍(Prakash TPet al，Nucleic Acids Res.42,8796
‑
807)。
[0005]然而，ASGPR受体介导的肝靶向寡核苷酸技术仍需要进一步开发和改进。

技术实现思路

[0006]本申请的申请人采用季戊四醇(Pentaerythritol,PET)为主体结构形成多触角ASGPR配体，季戊四醇四个羟基中的一个羟基可以被转化为多种不同功能基团，例如氨基、叠氮，羧基、羰基等，可以与多种多样的化学基团进行连接反应，形成多样化连接的GalNAc受体。相比于Alnylam公司产品
‑
以三羟甲基氨基甲烷(TRIS)为主体结构形成的多触角ASGPR配体，本申请的多触角ASGPR配体可以获得结构更加多样化的GalNAc偶联的寡核苷酸。
[0007]基于此，在本专利技术的第一方面，本专利技术提出了一种化合物。根据本专利技术的实施方案，所述化合物具有式(I)所示结构，
[0008][0009]其中，R1为与ASGPR结合的部分；R2为
‑
CH2‑
、C6‑
14
芳香基、C2‑6烯基或C2‑6炔基；R3为
‑
O
‑
、C6‑
14
芳香基或3至10元杂环基；R4为
‑
CH2‑
、C6‑
14
芳基或3至10元杂环基；R5为
‑
OH、OH、
‑
COOH、PG是羧基保护基；PG2是羟基保护基；a、b、c和d分别独立地为1
‑
10中的任一整数；n为1
‑
3中的任一整数。根据本专利技术实施方案的式(I)所示化合物可与多种寡核苷酸链通过磷酸二酯键进行连接，连接位置可在寡核酸链的5
’
端、3
’
端或5
’
端到3
’
端之间，可连接的寡核苷酸的种类相比于现有技术大大拓展，且非局限的连接位置，给寡核酸的修饰提供了更多的选择，有利于提高核酸药物的药代性质。
[0010]根据本专利技术的实施方案，上述化合物还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：
[0011]根据本专利技术的实施方案，R1部分的末端为半乳糖或N
‑
乙酰半乳糖胺；
[0012]根据本专利技术的实施方案，所述R1部分选自下列结构：
[0013][0014]其中，q和q
’
分别独立地为1
‑
10中的任一整数。
[0015]根据本专利技术的实施方案，所述羧基保护基选自琥珀酸酯、五氟苯酚酯、其中h是1
‑
5的任一整数。
[0016]根据本专利技术的实施方案，所述羟基保护基选自甲硅烷基、单甲氧基三苯甲基(MMTr)、4,4'
‑
二甲氧基三苯甲基(DMTr)和三苯甲基。
[0017]根据本专利技术的实施方案，所述甲硅烷基选自叔丁基二甲基甲硅烷基醚(TBMDS)、叔丁基二苯基甲硅烷基(TBDPS)和三异丙基甲硅烷基醚(TIPS)。
[0018]根据本专利技术的实施方案，所述化合物具有如下所示结构：
[0019][0020][0021][0022]在本专利技术的第二方面，本专利技术提出了一种化合物。根据本专利技术的实施方案，所述化合物具有式(II)所示结构，
[0023][0024]其中，R1为与去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoproteinreceptor，ASGPR)结合的
部分；R2为
‑
CH2‑
、C6‑
14
芳香基、C2‑6烯基或C2‑6炔基；a和b分别独立地为1
‑
10中的任一整数；n为1
‑
3中的任一整数。
[0025]根据本专利技术实施方案的式(II)所示化合物可以作为偶联试剂直接与含有炔基的寡核苷酸偶联，也可以作为偶联试剂的前体与含炔基的五氟苯酚酯等带有活性基团的化合物进行温和高效率的反应，得到五氟苯酚酯的Gal或GalNAc偶联试剂，进而再与多种不同功能基团的寡核苷酸偶联，获得结构更加多样化的Gal或GalNAc偶联的寡核苷酸。
[0026]根据本专利技术的实施方案，上述化合物还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：
[0027]根据本专利技术的实施方案，R1部分的末端为半乳糖或N
‑
乙酰半乳糖胺。
[0028]根据本专利技术的实施方案，所述R1部分选自下列结构：
[0029][0030]其中，q和q
’
各自独立地为1
‑
10中的任一整本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.式(I)化合物，或其互变异构体、立体异构体或药学上可接受的盐，其中，R1为与去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoproteinreceptor，ASGPR)结合的部分；R2为
‑
CH2‑
、C6‑
14
芳香基、C2‑6烯基或C2‑6炔基；R3为
‑
O
‑
、C6‑
14
芳香基或3至10元杂环基；R4为
‑
CH2‑
、C6‑
14
芳基或3至10元杂环基；R5为
‑
OH、OH、
‑
COOH、PG是羧基保护基；PG2是羟基保护基；a、b、c和d分别独立地为1
‑
10中的任一整数；n为1
‑
3中的任一整数。2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1部分的末端为半乳糖或N
‑
乙酰半乳糖胺；
任选地，所述R1部分选自下列结构：其中，q和q
’
分别独立地为1
‑
10中的任一整数。3.根据权利要求1或2所述的化合物，其特征在于，所述羧基保护基选自琥珀酸酯、五氟苯酚酯、其中h是1
‑
5的任一整数。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的化合物，其特征在于，所述羟基保护基选自甲硅烷基、单甲氧基三苯甲基(MMTr)、4,4'
‑
二甲氧基三苯甲基(DMTr)和三苯甲基；任选地，所述甲硅烷基选自叔丁基二甲基甲硅烷基醚(TBMDS)、叔丁基二苯基甲硅烷基(TBDPS)和三异丙基甲硅烷基醚(TIPS)。5.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物具有如下所示结构：
6.式(II)化合物，或其互变异构体、立体异构体或药学上可接受的盐，其中，R1为与去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoproteinreceptor，ASGPR)结合的部分；
R2为
‑
CH2‑
、C6‑
14
芳香基、C2‑6烯基或C2‑6炔基；a和b分别独立地为1
‑
10中的任一整数；n为1
‑
3中的任一整数。7.根据权利要求6所述的化合物，其特征在于，R1部分的末端为半乳糖或N
‑
乙酰半乳糖胺；任选地，所述R1部分选自下列结构：部分选自下列结构：其中，q和q
’
分别独立地为1
‑
10中的任一整数。8.根据权利要求6所述的化合物，其特征在于，所述化合物具有如下所示结构：
9.一种缀合物，其特征在于，具有式(III)所示结构，其中，R1为与ASGPR结合的部分；R2为
‑
CH2‑
、C6‑
14
芳香基、C2‑6烯基或C2‑6炔基；R3为
‑
O
‑
、C6‑
14
芳香基或3至10元杂环基；
R4为
‑
CH2‑
、C6‑
14
芳基或3至10元杂环基；R为O或S；Rx为药物分子，所述药物分子选自细胞毒性剂、化学治疗剂、生长抑制剂、毒素、放射性同位素和寡核苷酸链；a、b、c和d分别独立地为1
‑
10中的任一整数；n为1
‑
3中的任一整数。10.根据权利要求9所述的缀合物，其特征在于，具有式(IV)所示结构，10.根据权利要求9所述的缀合物，其特征在于，具有式(IV)所示结构，其中oligo为寡核苷酸链，任选地，所述寡核苷酸链为单链寡核苷酸或双链寡核苷酸或其组合。11.一种缀合物，其特征在于，所述缀合物是通过权利要求1
‑
8任一项所述的化合物与药物分子连接而成，所述药物分子选自细胞毒性剂、化学治疗剂、生长抑制剂、毒素、放射性同位素和寡核苷酸链。12.根据权利要求11所述的缀合物，其特征在于，所述药物分子为寡核苷酸链，任选地，所述寡核苷酸链为单链寡核苷酸或双链寡核苷酸或其组合。13.根据权利要求9
‑
12任一项所述的缀合物，其特征在于，所述寡核苷酸链包括未经修饰的核苷酸和/或经过修饰的核苷酸。14.根据权利要求13所述的缀合物，其特征在于，所述经过修饰的核苷酸各自独立地选自2
′‑
甲氧基乙基修饰核苷酸、2
′‑
O
‑
烷基修饰核苷酸、2
′‑
O
‑
烯丙基修饰核苷酸、2
′‑
C
‑
烯丙基修饰核苷酸、2
′‑
氟修饰核苷酸、2
′‑
脱氧修饰核苷酸、2<...

【专利技术属性】
技术研发人员：张必良，赵浩廷，
申请(专利权)人：阿格纳生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：