一种用于检测半胱氨酸的(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测半胱氨酸的(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针及其制备方法。本发明专利技术利用4

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测半胱氨酸的(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针及其制备方法


[0001]本专利技术属精细有机合成
，涉及一种用于检测半胱氨酸的(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针及其制备方法。

技术介绍

[0002]半胱氨酸(Cys)、同型半胱氨酸(Hcy)和谷胱甘肽(GSH)是主要的含硫醇的氨基酸，在许多生物过程中扮演着重要的角色。其中，Cys与许多重要的细胞功能直接相关，如抗氧化防御、细胞生长、解毒和代谢等等。因此，细胞中Cys水平的异常也与各种疾病有关。Cys缺乏可导致生长速度缓慢、造血减少、皮肤损伤、头发脱色、体重比降低、血浆白蛋白水平、白细胞减少、肝脏损伤和帕金森病；相反，过量的Cys可能导致严重的神经毒性、阿尔茨海默病和心血管疾病。因此开发有效的方法用于监测半胱氨酸浓度的变化具有重要的意义。
[0003]已经报道的检测半胱氨酸的方法有很多，主要包括高效液相色谱法、原子吸收光谱法、气相色谱法、亚甲基蓝法和电化学分析等，但这些方法存在样品预处理复杂、设备昂贵、操作繁琐、检测耗时长，具有一定的局限性。相比之下，荧光探针可以作为一种简单有效的检测Cys方法，具有非侵入性、高灵敏度和高选择性等优点，并可实时成像于活细胞。其中有机小分子荧光探针具有体积小、合成简单、反应时间快、选择性好、灵敏度高、以荧光为输出信号便于实时检测等特点，近年来成为检测半胱氨酸的一种重要方法。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中存在的不足，本专利技术所要解决的技术问题是提供一种(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针，满足检测半胱氨酸的使用需求。本专利技术所要解决的另一技术问题是提供一种上述(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针的制备方法。本专利技术还要解决的一个技术问题是是提供一种上述(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针的应用。
[0005]为实现解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案为：
[0006]用于检测半胱氨酸的(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针，为6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮丙烯酸酯，其结构式为：
[0007][0008]所述的用于检测半胱氨酸的(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针的制备方法，包括如下工艺步骤：
[0009]1)以4
‑
溴
‑2‑
羟基苯乙酮为原料，与4
‑
(二苯氨基)苯硼酸进行偶联反应，得到4
‑
(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮；
[0010]2)4
‑
(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮与糠醛进行缩合环化反应，得到6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮；
[0011]3)6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮与丙烯酰氯进行酯化反应，得到6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮丙烯酸酯。
[0012]步骤1)中，4
‑
溴
‑2‑
羟基苯乙酮为原料，与4
‑
(二苯氨基)苯硼酸进行偶联反应，得到4
‑
(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮，具体的制备步骤包括：
[0013](1)将10mmol 4
‑
溴
‑2‑
羟基苯乙酮、12mmol 4
‑
(二苯氨基)苯硼酸、40mmol碳酸钠和1mmol四(三苯基膦)钯依次加入到干燥的三口烧瓶中，再加入50mL二氧六环和15mL水溶解如上固体，在氮气条件下加热到90℃反应过夜，用TLC法跟踪监测，至反应完全后停止反应；
[0014](2)反应液经减压蒸馏除去二氧六环和水后再加入乙酸乙酯，用饱和食盐水进行洗涤至中性，有机相再经无水硫酸钠干燥、过滤、浓缩后得到4
‑
(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮粗产物；
[0015](3)4
‑
(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮粗产物经硅胶柱分离(乙酸乙酯/石油醚＝1/20，v/v)，得到4
‑
(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮。
[0016]步骤2)中，4
‑
(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮与糠醛进行缩合环化反应，得到6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮，具体的制备步骤包括：
[0017](1)在0℃下将5mmol 4
‑
(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮、5mmol糠醛、10mmol氢氧化钠、50mL乙醇依次加入干燥的三口烧瓶中，在室温下反应8～10h；
[0018](2)将反应混合物倒入冰水中，用稀盐酸酸化，过滤洗涤得到黄色固体沉淀物。再将上述黄色固体、10mL乙醇和5mL 20％的NaOH水溶液依次加入干燥的三口烧瓶中，在0℃下滴加5mL 30％H2O2，在室温下反应5～6h。
[0019](3)反应液倒入冰水中，用稀盐酸中和，过滤得到6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮粗产物，然后用冷乙醇重结晶，得到6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮。
[0020]步骤3)中，6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮与丙烯酰氯进行酯化反应，得到6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮丙烯酸酯，具体的制备步骤包括：
[0021](1)将1mmol 6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮、2mmol丙烯酰氯、2mmol三乙胺，10～20mL二氯甲烷依次加入干燥的三口烧瓶中，在室温状态下反本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测半胱氨酸的(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针，其特征在于，结构式为：2.权利要求1所述的用于检测半胱氨酸的(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)以4
‑
溴
‑2‑
羟基苯乙酮为原料，与4
‑
(二苯氨基)苯硼酸进行偶联反应，得到4
‑
(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮；2)4
‑
(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮与糠醛进行缩合环化反应，得到6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮；3)6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮与丙烯酰氯进行酯化反应，得到6
‑
(4
‑
(二苯胺基)苯基)
‑2‑
(呋喃
‑2‑
基)
‑3‑
羟基色原酮丙烯酸酯。3.根据权利要求2所述的用于检测半胱氨酸的(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤1)的制备方法为：(1)将10mmol 4
‑
溴
‑2‑
羟基苯乙酮、12mmol 4
‑
(二苯氨基)苯硼酸、40mmol碳酸钠和1mmol四(三苯基膦)钯依次加入到干燥的三口烧瓶中，再加入50mL二氧六环和15mL水溶解如上固体，在氮气条件下加热到90℃反应10～12h，用TLC法跟踪监测，至反应完全后停止反应；(2)反应液经减压蒸馏除去二氧六环和水后再加入乙酸乙酯，用饱和食盐水进行洗涤至中性，有机相再经无水硫酸钠干燥、过滤、浓缩后得到4
‑
(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮粗产物；(3)4
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(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮粗产物经硅胶柱分离(乙酸乙酯/石油醚＝1/20v/v)，得到4
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(二苯氨基)苯基
‑2‑
羟基苯乙酮。4.根据权利要求2所述的用于检测半胱氨酸的(二苯氨基)苯基黄酮类荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤2)的具体制备方法为：(1)在0℃下将5mmol 4
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(二苯...

【专利技术属性】
技术研发人员：王石发，秦阿慧，巩帅，张燕，王忠龙，李明新，杨益琴，徐徐，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：