碳酸二甲酯在提取植物表皮蜡质中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种碳酸二甲酯在提取植物表皮蜡质中的应用；本发明专利技术利用分析纯碳酸二甲酯提取植物表皮蜡质。碳酸二甲酯与氯仿提取相比，蜡质组分未发生明显改变，两种处理效果相当；同时该溶剂具有低毒、环保、绿色等特点，可有效用于植物表皮蜡质提取。有效用于植物表皮蜡质提取。有效用于植物表皮蜡质提取。

Application of dimethyl carbonate in extracting plant epidermal wax

【技术实现步骤摘要】
碳酸二甲酯在提取植物表皮蜡质中的应用


[0001]本专利技术属于水果工程
，具体涉及碳酸二甲酯在提取植物表皮蜡质中的应用

技术介绍

[0002]蜡质是覆盖在植物表皮细胞外的一层由亲脂性化合物构成的疏水层，是抵御生物和非生物胁迫的第一屏障，它具有控制非气孔水分损失和气体交换，保护植物免受紫外线或高辐射、真菌或昆虫引起的机械损伤以及其他非生物和生物环境胁迫的作用。蜡质主要是由碳原子数在16
‑
34碳之间的超长链脂肪酸及其衍生物(包括烷烃、醇、醛、脂肪酸和酯等)组成，还包括萜类和其他微量次级代谢物如固醇和类黄酮类物质。
[0003]梨果实表皮蜡质的提取和检测对研究蜡质与果实生理代谢相关性具有重要意义。
[0004]常用的表皮蜡质提取方法为有机溶剂浸泡法和粘合剂粘取法，对于粘合剂粘取法，往往只能粘取外蜡且过程繁琐，蜡质损耗量大，不常使用。有机溶剂提取法运用广泛，目前提取植物表皮蜡质常采用三氯甲烷(氯仿)、二氯甲烷等有机溶剂，但三氯甲烷、二氯甲烷等试剂易挥发，对光敏感，遇光照会与空气中的氧作用，逐渐分解而生成剧毒的光气(碳酰氯)和氯化氢，且有麻醉性，有致癌可能性。对长期从事该工作的实验人员健康危害很大，因此对该方法进行改进，并提出申请。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的不足，本专利技术的目的是提供碳酸二甲酯在提取植物表皮蜡质中的应用。
[0006]本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：
[0007]碳酸二甲酯在提取植物表皮蜡质中的应用。
>[0008]作为本申请的优选技术方案，所述植物为梨。
[0009]优选的，所述梨品种为“翠冠”。
[0010]作为本申请的优选技术方案，所述碳酸二甲酯酸为98％及98％以上分析纯。
[0011]一种提取植物表皮蜡质的绿色溶剂，所述溶剂为碳酸二甲酯。
[0012]作为本申请的优选技术方案，所述的植物为梨。
[0013]本专利技术的有益效果：
[0014]本专利技术提供的碳酸二甲酯在提取植物表皮蜡质中的应用，与现有技术相比，具有如下有益效果：
[0015](1)本专利技术通过用碳酸二甲酯来提取
‘
翠冠
’
梨果实来提取梨蜡质。碳酸二甲酯毒性约为氯仿的1/14，属低毒溶剂；与氯仿提取效果相比，碳酸二甲酯提取时蜡质组分未发生明显改变，处理效果相当。
[0016](2)本专利技术用碳酸二甲酯提取植物表皮实蜡质，由于碳酸二甲酯是一类低毒，环保安全的有机溶剂，所以用该溶剂提取蜡质，与氯仿相比会大幅减少对实验人员身体的毒害。
[0017](3)本专利技术用碳酸二甲酯替代氯仿提取植物表皮蜡质，只需更换提取溶剂，其它操作与常规蜡质提取方法一致，操作简单，方便在生产中推广，具有良好的应用前景。
附图说明
[0018]图1是碳酸二甲酯和氯仿提取植物表皮蜡质，各类物质占蜡质总量百分比比较；单位：％；
[0019]图2
‑
4是碳酸二甲酯和氯仿提取植物表皮蜡质，各类物质具体组分含量比较，其中，图2是烷烃比较，图3是脂肪酸比较，图4是萜类物质比较。单位：μg cm
‑2；
具体实施方式
[0020]以下结合实施例对本专利技术做进一步详细说明。所用试剂或者仪器设备未注明生产厂商的，均视为可以通过市场购买的常规产品。
[0021]下面以本专利技术方法在
‘
翠冠
’
梨果实表皮蜡质含量测定上的应用为例，说明其具体实施过程。
[0022]实施例1
[0023](1)碳酸二甲酯溶液准备。分析纯(AR)，98％碳酸二甲酯。
[0024](2)蜡质提取：选择大小一致，表面无机械损伤及病害的梨果实，置于500mL烧杯中，加入24mL碳酸二甲酯(分析纯)，用玻璃棒缓慢搅动，避免破坏梨果表皮，提取75s，每次浸泡一个果实，重复三次；将提取液分三份装到玻璃管中，每管2ml，每管加入0.01g/mL内标C24烷2μL，使用氮吹仪吹干；氮气吹干后，加入200μL吡啶，200μL N,O
‑
双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺，盖上管盖，将玻璃管放入封口袋中，注意严格防水；在70℃水浴锅中水浴60分钟，期间每隔15分钟涡旋震荡试管底部蜡质，使试管中的蜡质充分进行衍生化反应；将水浴后产物放在氮吹仪下吹干，待试管冷却至室温；加入1.5mL碳酸二甲酯(色谱纯)重新溶解衍生化后的蜡质，震荡混匀；用1mL一次性注射器吸取混匀后的溶液，用孔径0.45μm的有机滤膜过滤至2mL棕色瓶中。梨果实表面积的计算参照苑克俊等(2000)的方法。
[0025](3)蜡质组分测定：使用气相色谱
‑
质谱联用仪(GC
‑
MS)测定蜡质组分。GC
‑
MS分析条件：气相色谱
‑
质谱联用(Bruker)，DB
‑
5ms毛细管柱(FS 30m,0.25μm ID,0.25μmdf)，EI离子源(70eV)，扫描范围50
‑
650m/z，进样口温度280℃，离子源温度为250℃，四级杆温度150℃，氦气为载气，流量为1.2mL/min；升温程序，50℃起始，2min达到50℃，40℃/min升至200℃，保持2min，3℃/min升至320℃，保持30min。
[0026]申请人使用三氯甲烷、正己烷和碳酸二甲酯对
‘
翠冠
’
梨果实进行蜡质提取，将三氯甲烷和正己烷作为对照。结果表明碳酸二甲酯提取
‘
翠冠
’
梨果实蜡质，提出蜡质种类为44种，与氯仿相同，正己烷提取出蜡质组分37种；碳酸二甲酯提取
‘
翠冠
’
梨果实蜡质，单位面积蜡质含量为0.22mg cm
‑2，氯仿含量0.24mg cm
‑2，无显著差异，正己烷单位面积蜡质含量为0.08mg
·
cm
‑2，差异显著(P<0.05)。主要蜡质成分中，碳酸二甲酯测出烷烃39.10μg cm
‑2，氯仿36.31μg cm
‑2，无显著差异，正己烷54.96μg cm
‑2，差异显著(P<0.05)；碳酸二甲酯测出脂肪酸13.70μg cm
‑2，氯仿12.38μg cm
‑2，无显著差异，正己烷8.37μg cm
‑2，差异显著(P<0.05)；碳酸二甲酯测出三萜类155.96μg cm
‑2，氯仿175.53μg cm
‑2，无显著差异，正己烷5.29μg cm
‑2，差异显著(P<0.05)，如表1所示。正己烷与氯仿相比，能提取出更多的烷烃和伯
醇，但对三萜类物质提取效果差，差异显著。
[0027]根据化学品安全说明书查得正己烷LD50:28710mg/kg，氯仿LD50本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.碳酸二甲酯在提取植物表皮蜡质中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述植物为梨。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述梨品种为“翠冠”。4.根据权利要求2所述的应用，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：殷豪，张绍铃，胡杨，吴潇，蒙小玉，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：