LDLR在肿瘤免疫治疗、增强免疫细胞免疫效应中的应用制造技术

一种LDLR在肿瘤免疫治疗、增强免疫细胞免疫效应中的应用。揭示了胆固醇代谢相关基因、蛋白对免疫细胞免疫效应、抗肿瘤活性的调控作用，且该调控过程不完全依赖于胆固醇的摄取，从而为了促进肿瘤免疫治疗或增强免疫细胞免疫效应提供新的策略和靶点，克服了现有技术的技术偏见。LDLR基因或其蛋白能作为靶点被调节以改善相应CTL的杀伤效果，应用于肿瘤免疫治疗中，以显著提高CTL细胞抗肿瘤活性，提高肿瘤免疫治疗效果。除了直接作用LDLR外，也能通过抑制肿瘤和/或免疫细胞中LDLR调控相关基因、蛋白，如PCSK9，而提高CTL的抗肿瘤作用。在此基础上，还能联合免疫检查点阻断剂PD

【技术实现步骤摘要】
LDLR在肿瘤免疫治疗、增强免疫细胞免疫效应中的应用


[0001]本专利技术涉及免疫治疗领域，更具体地，涉及一种LDLR在肿瘤免疫治疗、增强免疫细胞免疫效应中的应用。

技术介绍

[0002]恶性肿瘤是一种严重危害人类生命、健康的重大疾病，目前，恶性肿瘤的治疗手段主要包括手术治疗、放疗、化疗和免疫治疗。其中，肿瘤免疫治疗旨在通过调动机体的免疫系统，提供抗肿瘤效力，从而抑制和杀伤肿瘤细胞，是当前肿瘤治疗的一种重要手段。尤其是以T细胞为核心的免疫疗法，在多种类型肿瘤中均取得了一定的疗效。
[0003]T细胞是获得性免疫系统中的重要组成成分，它可以识别特定抗原并介导细胞免疫反应，在抵抗外来病原体感染、肿瘤免疫和自身免疫性疾病中发挥着重要作用。以T细胞为核心的免疫疗法，如靶向PD
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1和CTLA
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4的免疫检测点阻断治疗和嵌合抗原受体T(CAR
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T)细胞治疗都已在肿瘤治疗中取得了很好的效果，并已经被批准应用于临床治疗。其能通过增强患者自身免疫系统功能以治疗肿瘤，具有反应快、副作用小、疗效持久等特点。
[0004]但是，该类疗法也存在一定的缺陷，如，受肿瘤微环境等因素影响而不能充分的发挥抗肿瘤作用，且抗肿瘤效应容易受到肿瘤微环境的调控而被抑制，在部分肿瘤中响应率低，对于部分病人而言疗效甚微。因此探究肿瘤免疫治疗的调控机制，进一步开发新的靶点和治疗策略以提高免疫细胞免疫效应，尤其是T细胞抗肿瘤活性，仍是目前基础研究和临床研究的焦点。
[0005]在肿瘤发生、进展的过程中，表现较为明显的特征之一就是肿瘤微环境的构成，具体的，肿瘤中的免疫抑制性基质细胞、髓系细胞、淋巴系细胞以及肿瘤细胞自身，共同构成免疫抑制性的肿瘤微环境。该类肿瘤微环境会抑制如CD8
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T细胞免疫细胞的抗肿瘤活性，且除了如营养物质葡萄糖等匮乏、低氧状态等肿瘤微环境特性而引起免疫细胞效应功能的抑制外，部分研究也发现肿瘤微环境可以通过代谢调控而影响免疫细胞抗肿瘤效应。其中就有研究指出，胆固醇代谢重编程可能影响CD8
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T细胞的活化，在肿瘤免疫治疗中调控CD8
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T细胞抗肿瘤活性。在此基础上，现有技术展开有就胆固醇相关调控基因，如PSCK9等，在肿瘤免疫治疗中的作用的研究，旨在从代谢层面研究提高免疫治疗的策略。但是，近来也有研究表明，PCSK9缺陷导致的肿瘤生长衰减不受宿主LDLR状态或胆固醇水平影响。所以，肿瘤组织是否通过影响免疫细胞胆固醇代谢而抑制相应的抗肿瘤效应，且是否有其他机制影响胆固醇代谢相关基因、蛋白而抑制免疫细胞抗肿瘤活性均不可得知。而本申请则意在研究免疫细胞胆固醇代谢相关基因、蛋白与肿瘤微环境、免疫效应受抑制等表现的相关性，探索能解决现有技术中免疫治疗受抑制等问题的治疗策略以及相应的靶点，以获得新的治疗靶点、策略而提高免疫细胞尤其是T细胞的抗肿瘤活性，弥补现有技术免疫治疗所存在的空缺。

技术实现思路

[0006]本专利技术旨在针对上述现有技术的至少一种不足，提供LDLR在肿瘤免疫治疗、增强
免疫细胞免疫效应中的应用，通过减小LDLR表达受到的抑制或促进LDLR表达、过表达LDLR，能够促进TCR信号转导，提高免疫细胞的抗肿瘤活性，增强包括CD8
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T细胞的免疫细胞的免疫效应，以提高肿瘤免疫治疗效果；提供新的免疫治疗靶点和策略，弥补现有技术免疫治疗所存在的空缺。
[0007]本专利技术的一个目的在于提供LDLR基因、其蛋白或其蛋白中间体作为免疫细胞上靶点在制备肿瘤免疫治疗和/或增强免疫细胞免疫效应的药物中的用途。在本专利技术的一个实施例中，发现肿瘤浸润CD8
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T细胞胆固醇转运受体低密度脂蛋白受体(Low Density Lipoprotein Receptor，LDLR)呈现表达下调的状态，且在进一步研究中，发现LDLR敲除后，CD8
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T细胞增殖、细胞因子IFNγ和TNFα产生、颗粒酶B(GzmB)释放下调，同时，细胞毒性T(CTL)细胞免疫突触形成、肿瘤杀伤活性显著下调。而在LDLR过表达的免疫细胞中，其免疫细胞抗肿瘤效应得到增强。且LDLR调控CTL细胞因子的产生以及CTL的杀伤活性并不完全依赖于LDL摄取。一方面表明了LDLR通过除胆固醇摄取外的其他机制影响免疫细胞的抗肿瘤活性，另一方面由实施例结果也表明，肿瘤浸润CD8
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T细胞中LDLR下调是引起免疫细胞免疫效应受抑制的原因之一，且LDLR的过表达能促进包括CD8
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T细胞的免疫细胞的免疫效应。所以，LDLR能够作为一个靶点存在，以实现在肿瘤免疫治疗或增强包括CTL细胞的免疫细胞的免疫效应上的应用。同时，LDLR基因表达或已形成蛋白后的过程都会受到调节而影响到免疫细胞的免疫效应，即LDLR基因、LDLR蛋白、LDLR蛋白中间体也应被保护，作为靶点应用于肿瘤免疫治疗或增强免疫细胞免疫效应的过程中。
[0008]本专利技术的另一目的在于提供LDLR基因表达或LDLR蛋白的调节剂在制备肿瘤免疫治疗和/或增强免疫细胞免疫效应的药物中的应用。进一步地，通过调节LDLR基因表达或LDLR蛋白能够直接影响免疫细胞的LDLR含量，从而调节相应的活性、免疫效应。进一步地，所述LDLR基因表达或LDLR蛋白的调节剂包括促进LDLR基因表达、避免LDLR蛋白减少的正向调节剂。有助于促进LDLR参与TCR信号转导，增强免疫细胞免疫效应，尤其是提高活化的CTL的抗肿瘤活性，促进对肿瘤的免疫杀伤作用。
[0009]进一步地，上述的肿瘤包括实体瘤、血液瘤。
[0010]进一步地，上述的肿瘤包括结直肠癌、肺癌和乳腺癌。
[0011]进一步地，LDLR基因表达或LDLR蛋白的调节剂包括PCSK9抑制剂。PCSK9是LDLR的一种调控蛋白，其介导LDLR的内吞和降解，本专利技术的一个以上实施例中表明，肿瘤组织PCSK9的表达参与调控CD8
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T细胞的LDLR表达，且敲低/敲除PCSK9后能促进免疫细胞免疫效应、抗肿瘤效果。进一步地，PCSK9抑制剂包括PCSK9抗体、CRISPR/Cas9制剂、PCSK9 shRNA和/或PF
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06446846。
[0012]进一步地，肿瘤免疫治疗和/或增强免疫细胞免疫效应的药物包括调节免疫细胞上LDLR含量、调节免疫细胞细胞膜CD3含量、调节免疫细胞上LDLR与TCR/CD3复合体相互作用、调节TCR信号转导、调节免疫突触形成和/或调节CD3转运至细胞膜的药物。
[0013]在本专利技术的一个实施例中，发现敲低LDLR后，免疫细胞的免疫突触形成也受到抑制，所以，LDLR调节剂还能应用于调节免疫突触形成的药物中。而且，本专利技术的一个以上实施例还表明，LDLR能够与TCR/CD3相互作用，调控TCR循环利用及信号转导通路，包括参与TCR复合体配体CD3转运的调控，从而直接影响免疫细胞的免疫效应、抗肿瘤活性。其调节蛋白PCSK9本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.LDLR基因、其蛋白或其蛋白中间体作为免疫细胞上靶点在制备肿瘤免疫治疗和/或增强免疫细胞免疫效应的药物中的应用。2.LDLR基因表达或LDLR蛋白的调节剂在制备肿瘤免疫治疗和/或增强免疫细胞免疫效应的药物中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，LDLR基因表达或LDLR蛋白的调节剂包括PCSK9抑制剂。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，肿瘤免疫治疗和/或增强免疫细胞免疫效应的药物包括调节免疫细胞上LDLR含量、调节免疫细胞细胞膜CD3含量、调节免疫细胞上LDLR与TCR/CD3复合体相互作用、调节TCR信号转导、调节免疫突触形成和/或调节CD3转运至细胞膜的药物。5.根据权利要求2～4任一项所述的应用，其特征在于，增强免疫细胞免疫效应包括促进T细胞的增殖和/或包括IFNγ、TNFα...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨魏，袁娟娟，蔡婷，郑晓君，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：