一种p38MAPK抑制剂在制备治疗睑板腺功能障碍药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供一种p38MAPK抑制剂在制备治疗睑板腺功能障碍药物中的应用。p38MAPK信号通路抑制剂SB203580可以有效阻断IL

Application of p38MAPK inhibitor in the preparation of drugs for the treatment of meibomian gland dysfunction

【技术实现步骤摘要】
一种p38 MAPK抑制剂在制备治疗睑板腺功能障碍药物中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别是涉及一种p38 MAPK抑制剂在制备治疗睑板腺功能障碍药物中的应用。

技术介绍

[0002]睑板腺是人体中位于眼睑的特化的大皮脂腺，又被称之为没有毛干的毛囊。睑板腺作为皮脂腺的一种特殊类型，其腺泡也遵循全分泌的分泌模式。腺泡的外周部为基底细胞，基底细胞逐渐向腺泡中心移动，依次经历分化中细胞阶段和成熟细胞阶段，成为超成熟细胞，同时持续合成和累积脂质。大多数腺泡中央的细胞都会经历核的固缩与碎裂，最终在向分支导管移动的过程中，成熟的腺泡细胞膜崩解，脂质和其他细胞成分被释放到导管系统的管腔中。整个细胞的内容物形成了分泌产物，称为睑酯。整个导管系统内衬有四层鳞状上皮，不同于腺泡细胞，导管上皮细胞不含脂滴，而是含有角化透明质酸颗粒。
[0003]睑板腺功能障碍(Meimomain gland dysfunction,MGD)是一种慢性弥漫性的睑板腺异常，通常以终末导管阻塞和/或腺体分泌物的质/量改变为特征。原发性MGD的发病机制尚不清楚，但其病理机制包括终末导管过度角化，管腔内细胞和脂质物质堆积，导管阻塞；导管和腺泡囊性扩张，继发性睑板腺泡萎缩和缺失；以及在某些情况下，腺周呈炎性改变。MGD的临床特征包含内部特征和外部特征。内部特征包括睑板腺开口堵塞、导管阻塞和扩张、腺体萎缩和丢失以及分泌物的质变。外部特征是由MGD引起的继发性改变，但在其他眼表疾病中也会发生，包括睑缘充血和毛细血管扩张。MGD是蒸发型干眼的最主要的病因，也会加重水液缺乏型干眼，严重影响生活质量，不仅会引起眼部刺激，还会遗留眼表炎症的后遗症和由此导致的视觉功能缺陷。
[0004]目前MGD的治疗没有金标准，现有的治疗是经验性治疗和对症治疗，包括热敷、眼睑清洁、睑板腺按摩和补充人工泪液。临床试验表明，抗生素可以显著改善严重的MGD的症状和体征。抗生素的治疗效果被认为部分由于它们的抗炎和抗菌作用，抑制了MGD相关的后睑缘炎和睑缘细菌的繁殖。

技术实现思路

[0005]针对现有技术存在的不足，本专利技术提供p38 MAPK信号通路抑制剂在制备治疗睑板腺功能障碍药物中的应用。
[0006]特别地，提供p38 MAPK信号通路抑制剂SB203580在制备治疗睑板腺功能障碍药物中的应用。SB203580是一种选择性的p38 MAPK信号通路抑制剂。
[0007]明胶酶MMP9(IV型胶原酶)是眼表最重要的明胶酶，它主要降解基底膜、IV型胶原和明胶。明胶是形成间质中胶原的主要成分。MMP9在眼表疾病中起关键作用，炎性细胞因子和介质诱导MMP9水平升高后增加炎症周期，蠕形螨和IL
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1β，能够上调MMP9表达。
[0008]为了探求炎症在MGD发病中的作用机制以期为临床治疗MGD提供理论基础，我们研
究了炎症因子IL
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1β及p38 MAPK信号通路对大鼠睑板腺上皮细胞的调控作用。炎症因子IL
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1β抑制大鼠睑板腺上皮细胞的增殖和分化，并诱导上皮细胞过度角化和MMP9的表达。抑制p38 MAPK信号通路虽然也抑制细胞增殖，但可阻断IL
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1β诱导的大鼠睑板腺上皮细胞分化减少、过度角化及MMP9表达增加。
[0009]在本专利技术，IL
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1β与p38 MAPK信号通路抑制剂单独作用时，都分别通过促进细胞凋亡和诱导细胞周期阻滞抑制大鼠睑板腺上皮细胞的增殖。然而两者影响的细胞周期不完全相同，IL
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1β影响细胞G1/S期转换，SB203580既影响细胞G1/S期转换又影响细胞G2/M期转换及有丝分裂。当IL
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1β联合p38 MAPK信号通路抑制剂作用于大鼠睑板腺上皮细胞时，虽然由IL
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1β诱导激活的p38 MAPK信号通路被阻断了，但细胞的增殖仍处于抑制状态。抑制p38MAPK信号通路，可以有效阻断IL
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1β对大鼠睑板腺分化和角化的影响，并减少MMP9的水平。对于睑板腺来说，脂质合成增加是功能性的分化，角化是功能丧失性的转分化。p38 MAPK信号通路抑制剂SB203580既抑制过度角化，又促进细胞分化，具有良好的临床应用前景。
[0010]说明书附图
[0011]图1IL
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1β和p38 MAPK抑制剂抑制大鼠睑板腺上皮细胞增殖：
[0012]图1A不同浓度的IL
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1β对细胞增殖能力的影响；
[0013]图1B不同浓度的SB203580对细胞增殖能力的影响；
[0014]图1C在增殖培养基MGECM中，不同给药组的细胞形态；
[0015]图1D在增殖培养基MGECM中，不同给药组增殖标志物Ki67的免疫荧光染色；
[0016]图1E在增殖培养基MGECM中，不同给药组增殖标志物Ki67的标记指数；
[0017]图1F在增殖培养基MGECM中，不同给药组增殖标志物Ki67的mRNA表达水平；
[0018]图1G在增殖培养基MGECM中，不同给药组p38 MAPK信号通路的激活水平。
[0019]图2IL
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1β和p38 MAPK信号通路的抑制剂促进睑板腺上皮细胞的凋亡并抑制细胞周期蛋白的表达：
[0020]图2A在增殖培养基MGECM中，不同给药组采用流式细胞术进行凋亡检测；
[0021]图2B在增殖培养基MGECM中，不同给药组凋亡细胞的比例；
[0022]图2C在增殖培养基MGECM中，不同给药组细胞周期蛋白Cyclin B1和Cyclin D1的蛋白表达水平。
[0023]图3p38 MAPK信号通路抑制剂促进大鼠睑板腺上皮细胞脂质合成：
[0024]图3A在分化培养基DM中，不同给药组的细胞形态；
[0025]图3B在分化培养基DM中，不同给药组细胞的中性脂质染色；
[0026]图3C在分化培养基DM中，不同给药组细胞的油红O脂质染色；
[0027]图3D在分化培养基DM中，不同给药组细胞的中性脂质染色的平均光密度；
[0028]图3E在分化培养基DM中，不同给药组p38 MAPK信号通路的激活水平。
[0029]图4p38 MAPK信号通路抑制剂促进大鼠睑板腺上皮细胞中PPARγ的表达：
[0030]图4A在分化培养基DM中，不同给药组分化标志物PPARγ的免疫荧光染色；
[0031]图4B在分化培养基DM中，不同给药组分化标志物PPARγ免疫荧光染色的平均光密度。
[0032]图5p38 MAPK信号通路抑制剂阻断IL
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1β诱导的大鼠睑板腺上皮细胞过度角化：
[0033]图5A在增殖培养基MGECM中，不同给药组过度角化标志物CK1和细胞核的免疫荧光染色；
[0034]图5B在增殖培养基MGEC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.p38 MAPK抑制剂在制备治疗睑板腺功能障碍药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，所述p38 MAPK抑制剂是SB203580。3.根据权利要求1所述的应用，SB203580通过阻断IL
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1β对大鼠睑板腺分化和...

【专利技术属性】
技术研发人员：瞿静语，寒溪，张明昌，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属协和医院，
类型：发明
国别省市：