靶向B7-H3的CAR-T细胞及其在急性髓系白血病治疗中的应用制造技术

本发明专利技术提供了靶向B7

Car-t cells targeting B7-H3 and its application in the treatment of acute myeloid leukemia

【技术实现步骤摘要】
靶向B7
‑
H3的CAR
‑
T细胞及其在急性髓系白血病治疗中的应用


[0001]本专利技术涉及生物
，更具体地涉及一种靶向B7
‑
H3的CAR
‑
T细胞及其在急性髓系白血病治疗中的应用。

技术介绍

[0002]急性髓系白血病(Acute M yeloid Leukemia，AML)是急性白血病中常见的一种类型，是种起源于造血组织、高度异质性的恶性克隆性疾病，患者病死率高，长期生存率低，而且易复发，严重危害人类的健康和生命。几十年来，对AML的治疗方法基本没有变化，主要手段为化疗和造血干细胞移植。经典的化疗方案仍然是蒽环类药物联合阿糖胞苷，该方案治疗后虽然可以获得相对较高的缓解率，但患者发生耐药而复发的风险较高。
[0003]根据French
‑
American
‑
British(FAB)的AML形态学分型，可以将AML分为M0－M7八种类型。有研究表明，M3和M4亚型的患者预后优于其他亚型，而AML中最常见的(8；12)易位与良好的预后有关，但是其在M5亚型中却很少见。同时，也有报道显示M5亚型的患者预后明显差于其他AML。因此，开发更好的AML治疗方法尤为迫切，尤其是针对M5亚型的AML。
[0004]嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T，CAR T)细胞免疫疗法是通过赋予T细胞能与肿瘤细胞表面抗原相互识别的抗体，从而避开MHC的限制，诱导T细胞特异性活化，改造过的T细胞相较于天然T细胞能够更好的识别肿瘤并杀死肿瘤。近几年，CAR T疗法在癌症治疗专利技术取得了巨大的进展，被认为是最有前景的肿瘤治疗方式之一。
[0005]目前，CAR T疗法在治疗ALL中的疗效最好，应用也最广泛。其中靶向CD19的CAR在治疗成人和儿童ALL中都取得显著的疗效，缓解率可高达90％。在AML的CAR
‑
T治疗中CD123和CD33也取得了不错的成绩，但是这两个抗原在正常髓细胞中都有表达，难免会对患者产生毒副作用，仍然是目前不可忽视的一个问题。因此找到一个相对安全且疗效较佳的靶点至关重要，本领域需要开发新的治疗靶点和治疗方法。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种靶向B7
‑
H3的CAR
‑
T细胞及其在急性髓系白血病治疗中的应用。
[0007]在本专利技术的第一方面，提供了一种嵌合抗原受体(CAR)，所述嵌合抗原受体的抗原结合结构域(即，scFv)包含重链可变区和轻链可变区，
[0008]SEQ ID NO:6所示的CDR1，
[0009]SEQ ID NO:7所示的CDR2，和
[0010]SEQ ID NO:8所示的CDR3；
[0011]且所述的轻链可变区包括以下互补决定区CDR：
[0012]SEQ ID NO:9所示的CDR1
’
，
[0013]SEQ ID NO:10所示的CDR2
’
，和
[0014]SEQ ID NO:11所示的CDR3
’
。
[0015]在另一优选例中。所述嵌合抗原受体的抗原结合结构域包括SEQ ID NO:1所示的抗体重链可变区，和SEQ ID NO:2所示的抗体轻链可变区。
[0016]在另一优选例中，所述抗体重链可变区和抗体轻链可变区通过连接肽相连。
[0017]在另一优选例中，所述的抗原结合结构域的结构如下式I或II所示：
[0018]V
L
‑
V
H
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
(I)；V
H
‑
V
L
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
(II)
[0019]其中，V
H
为抗体重链可变区；V
L
为抗体轻链可变区；
“‑”
为连接肽或肽键。
[0020]在另一优选例中，所述的抗原结合结构域的结构如式II(V
H
‑
V
L
)所示。
[0021]在另一优选例中，所述V
H
的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，V
L
的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
[0022]在另一优选例中，所述连接肽为1
‑
4个连续的SEQ ID NO:4(GGGGS)所示的序列，较佳地2
‑
4个，更佳地为3个。
[0023]在另一优选例中，所述抗原结合结构域结合于B7
‑
H3，较佳地为人B7
‑
H3。
[0024]在另一优选例中，所述抗原结合结构域的重链可变区和轻链可变区来源于人源化抗体。
[0025]在另一优选例中，所述嵌合抗原受体的结构如下式III所示：
[0026]L
‑
scFv
‑
H
‑
TM
‑
C
‑
CD3ζ
ꢀꢀꢀ
(III)
[0027]其中，
[0028]L为无或信号肽序列；
[0029]scFv为靶向B7
‑
H3的scFv；
[0030]H为绞链区；
[0031]TM为跨膜结构域；
[0032]C为共刺激信号分子；
[0033]CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列。
[0034]在另一优选例中，所述的L为选自下组的蛋白的信号肽：CD8、CD28、GM
‑
CSF、CD4、CD137、或其组合。
[0035]在另一优选例中，所述的L为巨噬细胞集落刺激因子来源的信号肽。
[0036]在另一优选例中，所述的H为选自下组蛋白的铰链区：CD8、CD28、CD137、Fc、或其组合。
[0037]在另一优选例中，所述的H为CD8来源的铰链区。
[0038]在另一优选例中，所述的TM为选自下组的蛋白的跨膜区：CD28、CD3 epsilon、CD45、CD4、CD5、CD8、CD9、CD16、CD22、CD33、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137、CD154、或其组合。
[0039]在另一优选例中，所述的TM为CD8来源的跨膜区。
[0040]在另一优选例中，所述的C为选自下组的蛋白的共刺激信号分子：OX40、CD2、CD7、CD27、CD28、CD30、CD40、CD70、CD134、4
‑
1BB(CD137)、PD1、Dap10、CDS、ICAM
‑
1、LFA
‑
1(CD11a/CD18)、ICOS(CD278)、NKG2D、GITR、TLR2、或其组合。
[0041]在另一优选例中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种嵌合抗原受体(CAR)，其特征在于，所述嵌合抗原受体的抗原结合结构域包含重链可变区和轻链可变区，所述的重链可变区包括以下互补决定区CDR：SEQ ID NO:6所示的CDR1，SEQ ID NO:7所示的CDR2，和SEQ ID NO:8所示的CDR3；且所述的轻链可变区包括以下互补决定区CDR：SEQ ID NO:9所示的CDR1
’
，SEQ ID NO:10所示的CDR2
’
，和SEQ ID NO:11所示的CDR3
’
；较佳地，所述的抗原结合结构域包括SEQ ID NO:1所示的抗体重链可变区，和SEQ ID NO:2所示的抗体轻链可变区。2.如权利要求1所述的CAR，其特征在于，所述嵌合抗原受体的结构如下式III所示：L
‑
scFv
‑
H
‑
TM
‑
C
‑
CD3ζ
ꢀꢀꢀ
(III)其中，L为无或信号肽序列；scFv为靶向B7
‑
H3的scFv；H为绞链区；TM为跨膜结构域；C为共刺激信号分子；...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨林，游凤涛，范双双，李亚芬，
申请(专利权)人：博生吉医药科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：