一种具有多重耐受性的酿酒酵母及其分离方法、应用技术

本发明专利技术公开了一种具有多重耐受性的酿酒酵母及其分离方法、应用，属于酿酒酵母领域。本发明专利技术从大曲中分离得到一株兼具耐高温、耐酸、耐乙醇的高发酵力酿酒酵母S.cerevisiae NJ002。使用响应面法优化该酵母的培养条件后，其生长和发酵力均显著提高。将该酵母菌用于制作强化大曲，可显著提高大曲的发酵力。本发明专利技术在提升大曲发酵力、节约粮食、提高效率、节能减排等方面具有重要价值，在企业应用可增加企业和社会效益。和社会效益。和社会效益。

Saccharomyces cerevisiae with multiple tolerance and its separation method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种具有多重耐受性的酿酒酵母及其分离方法、应用


[0001]本专利技术涉及酿酒酵母领域，具体是一种具有多重耐受性的酿酒酵母及其分离方法、应用。

技术介绍

[0002]白酒是中国传统饮料，白酒企业每年要消耗大量的粮食和能源。提高生产效率、降低粮食和能源消耗，对企业和社会均具有重要价值。大曲含有大量功能微生物，是酿造白酒的重要材料，其发酵力直接决定了白酒的出酒率及粮食利用率。开发高发酵力酵母菌并将其用于制作大曲，可提高大曲发酵力，从而节约粮食、降低能耗，增加企业和社会效益。
[0003]大曲制作及白酒酿造的过程往往具有较苛刻的环境条件，如高温、低pH、高乙醇等。这些环境条件可严重影响酵母菌的生长及生存，从而影响酵母菌的应用效果。一株酵母菌很难同时兼具高发酵力、耐高温、耐酸、耐乙醇等特点。因此，开发可同时满足上述条件的优良酵母菌仍是一个重要研究方向。
[0004]此外，不同的地域、原料、生产工艺等因素，也会影响酵母菌的应用效果。丰富微生物资源库，增加可供企业选择的优良酵母菌资源，对于解决这些问题也具有重要意义。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种具有多重耐受性的酿酒酵母及其分离方法、应用，以解决现有技术酿酒酵母菌存在的发酵力、适应性不足的问题。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术所采用的技术方案为：
[0007]一种具有多重耐受性的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，所述酿酒酵母为菌株S.cerevisiae NJ002，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.24735。
[0008]所述菌株S.cerevisiae NJ002在25
‑
60℃的条件下良好生长。
[0009]所述菌株S.cerevisiae NJ002在pH为2
‑
9的条件下良好生长。
[0010]所述菌株S.cerevisiae NJ002在乙醇含量为0
‑
12％vol的条件下良好生长。
[0011]所述菌株S.cerevisiae NJ002的培养条件通过响应面法进行优化。
[0012]进一步的，经响应面法优化确定，所述菌株S.cerevisiae NJ002在葡萄糖15.24％、氮源物质5.09％、乙醇0.83％vol的条件下其生长和发酵力显著提高。
[0013]一种具有多重耐受性的酿酒酵母的分离方法，包括以下步骤：
[0014]步骤1、从高发酵力大曲中分离、纯化酵母菌；
[0015]步骤2、检测步骤1得到的酵母菌的发酵力，基于检测结果筛选得到具有高发酵力的酿酒酵母菌株。
[0016]步骤3、检测步骤2得到的酿酒酵母的耐受性，基于检测结果筛选得到所述具有多重耐受性的酿酒酵母菌株。
[0017]一种具有多重耐受性的酿酒酵母在酒类生产中的应用，以提高酒类原料的发酵
力。
[0018]一种提高大曲发酵力的方法，将所述的具有多重耐受性的酿酒酵母，加入大曲原料中以提高大曲发酵力。
[0019]与现有技术相比，本专利技术的优点为：
[0020]本专利技术提供了一种具有耐高温、耐酸、耐乙醇且发酵力高等多重优良特性的酿酒酵母及其分离方法和培养条件优化方法，本专利技术的酿酒酵母可应用于酒类尤其是大曲，能够提高发酵力。本专利技术在节约粮食、提高效率、节能减排等方面具有重要价值。
附图说明
[0021]图1为酵母菌发酵力对比图。其中：CK，对照酵母(安琪酵母股份有限公司生产的白酒专用耐高温型酿酒高活性干酵母)；小写字母不同表示差异显著(P＜0.05)；图中数值均重复3次以上。
[0022]图2为PCR扩增ITS1
‑
5.8S
‑
ITS2的琼脂糖凝胶电泳图。其中：A，NJ001对应的电泳条带；B，NJ002和NJ003对应的电泳条带。
[0023]图3为系统发育树图。
[0024]图4为酵母菌的生长曲线图。其中：A，NJ001；B，NJ002；C，NJ003；D，对照酵母。OD
600
为菌液稀释5倍后的检测值；图4中数值均重复3次以上。
[0025]图5为四株酵母菌在不同温度下的生长情况对比图。其中：CK，对照酵母；OD
600
为菌液稀释5倍后的检测值；小写字母不同表示差异显著(P＜0.05)；图中数值均重复3次以上。
[0026]图6为四株酵母菌在不同pH下的生长情况对比图。其中：CK，对照酵母；OD
600
为菌液稀释5倍后的检测值；小写字母不同表示差异显著(P＜0.05)；图中数值均重复3次以上。
[0027]图7为四株酵母菌在不同乙醇含量下的生长情况对比图。其中：CK，对照酵母；OD
600
为菌液稀释5倍后的检测值；小写字母不同表示差异显著(P＜0.05)；图中数值均重复3次以上。
[0028]图8为葡萄糖含量对NJ002生长的影响曲线图。其中：OD
600
为菌液稀释5倍后的检测值；图中数值均重复3次以上。
[0029]图9为氮源物质含量对NJ002生长的影响曲线图。其中：OD
600
为菌液稀释5倍后的检测值；图中数值均重复3次以上。
[0030]图10为乙醇含量对NJ002生长的影响曲线图。其中：OD
600
为菌液稀释5倍后的检测值；图中数值均重复3次以上。
[0031]图11为各因素之间相互作用的曲面图和等高线图。其中：A，葡萄糖和氮源物质相互作用的曲面图(i)和等高线图(ii)；B，葡萄糖和乙醇含量相互作用的曲面图(i)和等高线图(ii)；C，氮源物质和乙醇含量相互作用的曲面图(i)和等高线图(ii)。
[0032]图12为优化前与优化后NJ002的生长情况对比曲线图。其中：OD
600
为菌液稀释5倍后的检测值；“***”：p<0.001；图中数值均重复3次以上。
[0033]图13为优化前与优化后NJ002的发酵力对比曲线图。其中：图中数值均重复3次以上。
[0034]图14为强化大曲的温度变化曲线图。其中：CK1，常规大曲；CK2，添加2L对照酵母的强化大曲；NJ002，添加2L NJ002的强化大曲；NJ002*2，添加4LNJ002的强化大曲。
[0035]图15为每块大曲的取样区域示意图。其中：阴影部分为大曲取样区域。
[0036]图16为强化大曲的发酵力对比曲线图。其中：CK1，常规大曲；CK2，添加2L对照酵母的强化大曲；NJ002，添加2L NJ002的强化大曲；NJ002*2，添加4L NJ002的强化大曲；图中数值均重复3次以上。
具体实施方式
[0037]下面结合附图和实施例对本专利技术进一步说明。
[0038]实施例1高发酵力酵母菌的分离鉴定
[0039]1.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有多重耐受性的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），其特征在于，所述酿酒酵母为菌株S. cerevisiae NJ002，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No. 24735。2.根据权利要求1所述的一种具有多重耐受性的酿酒酵母，其特征在于，所述菌株S. cerevisiae NJ002在25
‑
60℃的条件下良好生长。3.根据权利要求1所述的一种具有多重耐受性的酿酒酵母，其特征在于，所述菌株S. cerevisiae NJ002在pH为2
‑
9的条件下良好生长。4.根据权利要求1所述的一种具有多重耐受性的酿酒酵母，其特征在于，所述菌株S. cerevisiae NJ002在乙醇含量为0

【专利技术属性】
技术研发人员：汪焰胜，员江岚，黄训端，张部昌，高强，贾秀连，周明，
申请(专利权)人：安徽大学，
类型：发明
国别省市：