富硒核桃降血压肽及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了富硒核桃降血压肽及其制备方法与应用。本发明专利技术方法包括如下步骤：取富硒核桃，通过低温连续相变萃取技术对富硒核桃进行脱脂，得到富硒脱脂核桃粕；对所得富硒脱脂核桃粕进行酶解，所采用的酶为胰蛋白酶，酶解条件为：温度30～40℃，pH7～8.5，酶解时间2～4h，底物浓度5～7％，加酶量0.2％～0.4％；将所得酶解液超滤分离，冻干分子量小于等于3KDa的组分，即获得所述的富硒核桃降血压肽。所得分子量<3KDa的小肽组分，ACE抑制率为77.78％，硒含量为1.348mg/kg。本发明专利技术提供的工艺操作简单，可适用于工业化生产，提高富硒核桃粕的利用附加值，并为富硒核桃降血压肽的应用奠定理论基础。论基础。

Selenium rich walnut antihypertensive peptide and its preparation method and Application

【技术实现步骤摘要】
富硒核桃降血压肽及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及富硒核桃降血压肽及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]核桃(学名：Juglans regia L.)，又称胡桃，或羌桃，是属于胡桃科胡桃属植物。在核桃种植产业中，榨油后的核桃粕利用附加值很低，亟需研究如何对其进行深入的开发和利用。
[0003]硒(Selenium)是一种非金属元素，是动物体必需的营养元素和植物有益的营养元素等。硒与其他微量营养素一样，在人和动物的生活中起着重要的作用，如硒酶和硒蛋白。硒半胱氨酸位于谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性中心。这种酶对各种代谢途径形成的过氧化物具有保护作用。除了减少氧化应激，硒还参与保护DNA免受损伤和细胞衰老，以及通过减少活性氧物种的致癌效应。硒还会影响生殖系统(尤其是男性)、激素(主要是甲状腺)和免疫功能的正常功能。因此，饮食中缺乏硒会影响许多疾病的发生，包括甲状腺功能减退、感染易感性、肿瘤、类风湿关节炎或心力衰竭。所以硒被认为是人体系统内稳态的关键微量元素，特别是对免疫系统和甲状腺的正常功能。
[0004]有研究表明，心血管疾病死亡和心血管疾病过早死亡是由高血压引起的。因此，确定预防和治疗高血压的有效策略是很重要的。植物性药物被广泛用于治疗与心血管相关的各种症状，在预防和治疗包括高血压在内的各种疾病方面具有潜在的应用价值。
[0005]血管紧张素转化酶(Angiotensin
‑
converting enzyme，ACE)是调节血管的重要因子，ACE抑制肽，又称降血压肽，能够显著降低血管紧张素转化酶活性，具有降低血压的作用。近年来，植物蛋白源ACE抑制肽的制备及活性分析成为了生物活性肽研究的热点。

技术实现思路

[0006]为解决相关问题，本专利技术的首要目的在于提供一种富硒核桃降血压肽的制备方法。
[0007]本专利技术的另一目的在于提供通过上述制备方法得到的富硒核桃降血压肽。
[0008]本专利技术的另一目的在于提供上述富硒核桃降血压肽的应用。
[0009]为了实现上述专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0010]一种富硒核桃降血压肽的制备方法，包括如下步骤：
[0011]S1、取富硒核桃，通过低温连续相变萃取技术对富硒核桃进行脱脂，得到富硒脱脂核桃粕；
[0012]S2、对步骤S1所得富硒脱脂核桃粕进行酶解，所采用的酶为胰蛋白酶，酶解条件为：温度30～40℃，pH 7～8.5，酶解时间2～4h，底物浓度5～7％，加酶量0.2％～0.4％；优选为：温度35～40℃，pH 7～8，酶解时间2～3h，底物浓度5％～6％，加酶量0.3％～0.4％；最优选为：温度35℃，pH 7.5，酶解时间2.52h，底物浓度5.39％，加酶量0.33％。
[0013]S3、将步骤S2所得酶解液超滤分离，冻干分子量小于等于3KDa的组分，即获得所述
的富硒核桃降血压肽。
[0014]优选的，所述的步骤S1中，脱脂前先将富硒核桃脱壳、去衣和粉碎。
[0015]优选的，步骤S1中所述的脱脂的条件为：萃取温度43～47℃、萃取压力0.45～0.55Mpa、萃取时间50～70min、解析温度58～62℃；进一步优选为：萃取温度45℃、萃取压力0.5Mpa、萃取时间1h、解析温度60℃。
[0016]优选的，步骤S1中所述的富硒脱脂核桃粕的硒含量为1.633～1.654mg/kg。
[0017]优选的，步骤S3中所述的超滤的条件为3000～5000r/min超滤25～35min；进一步优选为4000r/min超滤30min。
[0018]优选的，步骤S3中所述的冻干的条件为
‑
45～35℃真空干燥20～30h；进一步优选为
‑
40℃真空干燥24h
[0019]一种富硒核桃降血压肽，通过上述制备方法制备得到。
[0020]上述富硒核桃降血压肽在下述至少一种情况中的应用：
[0021](1)在制备降血压产品中的应用；
[0022](2)在制备抗氧化产品中的应用；
[0023](3)在制备抗癌产品中的应用；
[0024](4)在制备抗炎产品中的应用。
[0025]本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0026]本专利技术以富硒核桃为原料，采用酶法制备降血压肽，通过温度、时间、pH、底物浓度、加酶量等的实验设计优化，得到酶解富硒核桃的最佳工艺参数组合。其中，制备得到的分子量<3KDa的小肽组分，ACE抑制率为77.78％，硒含量为1.348mg/kg。且根据硒元素分布与ACE抑制活性可知，<3KDa的小肽组分的硒含量显著大于酶解物(0.822mg/kg)和>3KDa组分(0.323mg/kg)，而其ACE抑制率也显著大于酶解物(68.00％)和>3KDa组分(39.22％)，这说明超滤处理得到的小肽对硒元素起到了出乎意料的显著富集效果，同时在ACE抑制活性上发挥了重要的协同作用。
[0027]本专利技术提供的工艺操作简单，可适用于工业化生产，提高富硒核桃粕的利用附加值，并为富硒核桃降血压肽的应用奠定理论基础。
附图说明
[0028]图1为蛋白酶种类对酶解物ACE抑制率的影响检测结果图；
[0029]图2为酶解温度对ACE抑制率的影响检测结果图；
[0030]图3为pH对ACE抑制率的影响检测结果图；
[0031]图4为酶解时间对ACE抑制率的影响检测结果图；
[0032]图5为底物浓度对ACE抑制率的影响检测结果图；
[0033]图6为加酶量对ACE抑制率的影响检测结果图；
[0034]图7为酶解时间和底物浓度对酶解反应ACE抑制率的影响响应面图与等高线；其中：(1)响应面图(2)等高线；
[0035]图8为酶解时间和加酶量对酶解反应ACE抑制率的影响响应面图与等高线；其中：(1)响应面图(2)等高线；
[0036]图9为底物浓度和加酶量对酶解反应ACE抑制率的影响响应面图与等高线图；其
中：(1)响应面图(2)等高线；
[0037]图10为超滤分离各组分ACE抑制率检测结果图；
[0038]图11为氨基酸分析色谱图；其中：1天冬氨酸2苏氨酸3丝氨酸4谷氨酸5甘氨酸6丙氨酸7缬氨酸8蛋氨酸9异亮氨酸10亮氨酸11酪氨酸12苯丙氨酸13组氨酸14赖氨酸15精氨酸。
具体实施方式
[0039]下面结合实施例和附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。
[0040]实施例1
[0041]1材料与方法
[0042]1.1原料与试剂
[0043]1.1.1原料
[0044]富硒核桃：购自湖北恩施。
[0045]1.1.2试剂
[0046]血管紧张素转化酶(ACE本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种富硒核桃降血压肽的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：S1、取富硒核桃，通过低温连续相变萃取技术对富硒核桃进行脱脂，得到富硒脱脂核桃粕；S2、对步骤S1所得富硒脱脂核桃粕进行酶解，所采用的酶为胰蛋白酶，酶解条件为：温度30～40℃，pH 7～8.5，酶解时间2～4h，底物浓度5～7％，加酶量0.2％～0.4％；S3、将步骤S2所得酶解液超滤分离，冻干分子量小于等于3KDa的组分，即获得所述的富硒核桃降血压肽。2.根据权利要求1所述的富硒核桃降血压肽的制备方法，其特征在于：步骤S2中所述的酶解条件为：温度35～40℃，pH 7～8，酶解时间2～3h，底物浓度5％～6％，加酶量0.3％～0.4％。3.根据权利要求1所述的富硒核桃降血压肽的制备方法，其特征在于：步骤S2中所述的酶解条件为：温度35℃，pH 7.5，酶解时间2.52h，底物浓度5.39％，加酶量0.33％。4.根据权利要求1所述的富硒核桃降血压肽的制备方法，其特征在于：步骤S1中所述的富硒脱脂核桃粕的硒含量为1.633～1.654mg/kg。5.根据权利要求1～3任一项所述的富硒核桃降血压肽的制备方法，其特征在于：步骤S1中所述的脱脂的条件...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗建银，郭俊斌，唐德剑，卢蔼纯，祁蒙，苏嘉毅，夏曾润，杨迅，冉佳鑫，
申请(专利权)人：安康市富硒产品研发中心，
类型：发明
国别省市：