The invention provides a carboxyl group
【技术实现步骤摘要】
一种羧基
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四氯
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荧光素的制备方法
[0001]本专利技术涉及含氯荧光素制备
,尤其是一种羧基
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四氯
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荧光素的制备方法。
技术介绍
[0002]自1871年Bayer首次合成荧光素以来,荧光素及其衍生物被广泛用于各种荧光探针,如药理学、生理学、分子生物学、细胞生物学、分子遗传学、环境化学、单个分子检测、信息科学、荧光标记、激光染料等方面。荧光素及其衍生物属于呫吨类结构,即由一个桥氧键将两个苯环固定在同一个平面上,这样的刚性平面结构使得荧光素及其衍生物分子具有长波长(吸收和发射都在可见光区),其高摩尔吸光系数和高量子产率与其它常用荧光染料相比,具有对生物体友好无毒或低毒的优点。
[0003]然而,荧光素的这种特殊结构也给其带来的特殊性质,例如,对pH敏感,在生物体内的生理环境下荧光量子效率急剧下降,对光敏感,抗光漂白能力弱,在强光下荧光衰减明显,检测特异性不强等。这些特殊性质也极大地限制了其进一步的应用。
[0004]为了改善荧光素类染料的光学性能,国内外许多生物及化学工作者在荧光素的底环或顶环上引入不同功能的化学基团,对其结构进行修饰以达到不同的功能。例如,1963年,Guilbault成功地应用荧光素二丁酸酯检测了脂酶的活性,Miller合成出四种乙基取代的荧光素衍生物用于测定白鼠肝细胞中细胞色素P
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450的活性;1997 年,Riondet利用羧基荧光素检测大肠埃希氏菌细胞内部的pH值,得到满意 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种羧基
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四氯
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荧光素的制备方法,以对氯间苯二酚和二氯偏三酸酐为原料,通过环合反应制得5,6
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羧基
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四氯
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荧光素粗品,其特征在于,利用重结晶方法对5,6
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羧基
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四氯
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荧光素粗品进行提纯,得到5,6
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羧基
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四氯
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荧光素纯品;将5,6
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羧基
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四氯
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荧光素纯品溶解于有机溶剂Ⅰ中,室温下逐滴滴入酸溶液,充分反应后过滤,洗涤滤饼并烘干,得到5
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羧基
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四氯
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荧光素,向滤液中缓慢加入异丙醚,充分反应后过滤,洗涤滤饼并烘干得到6
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羧基
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四氯
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荧光素;所述有机溶剂Ⅰ为乙腈、四氢呋喃、二氧六环、N,N
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二甲基甲酰胺、乙二醇二甲醚中的一种,所述酸溶液为盐酸、硫酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、三氟乙酸、醋酸中的一种。2.根据权利要求1所述的羧基
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四氯
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荧光素的制备方法,其特征在于,5,6
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羧基
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四氯
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荧光素纯品与有机溶剂Ⅰ的投料比为1:2
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10。3.根据权利要求2所述的羧基
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四氯
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荧光素的制备方法,其特征在于,从5,6
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羧基
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四氯
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荧光素纯品分离出5
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羧基
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四氯
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荧光素、6
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羧基
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四氯
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荧光素包括以下步骤:步骤1,5,6
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羧基
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四氯
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荧光素、有机溶剂Ⅰ加入玻璃反应釜,70℃温度下搅拌2小时,待固体充分溶解后停止加热,反应体系逐渐冷却至室温;步骤2,逐滴滴入酸溶液,...
【专利技术属性】
技术研发人员:余明辉,王锋,
申请(专利权)人:合肥华纳生物医药科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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