一种茉莉酸甲酯对映异构体的分离测定方法技术

本发明专利技术涉及化学分析技术领域，具体公开了一种茉莉酸甲酯对映异构体的分离测定方法。该方法运用空气辅助液液微萃取技术萃取植物样本中的茉莉酸甲酯，用气相色谱质谱联用技术分离测定茉莉酸甲酯中的对映异构体。该方法能够精确定量和定性茉莉酸甲酯的四种对映异构体，为植物样本中茉莉酸甲酯对映异构体的定量和定性测定提供了可靠的分析方法。该方法的线性相关系数R2>0.9971，平均相对标准偏差<15％，回收率为80.60～107.03％，检出限为0.08～0.12ng/mL，定量限为0.28

【技术实现步骤摘要】
一种茉莉酸甲酯对映异构体的分离测定方法


[0001]本专利技术属于化学分析
，具体涉及一种茉莉酸甲酯对映异构体的分离测定方法。

技术介绍

[0002]茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate，ME
‑
JA)作为抗性激素在植物抵抗生物胁迫和非生物胁迫过程中发挥重要作用。其具有两个手性中心，因此存在四种对映异构体：(+)
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(3R,7S)
‑
epi
‑
ME
‑
JA、(+)
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(3S,7S)
‑
ME
‑
JA、(
‑
)
‑
(3R,7R)
‑
ME
‑
JA以及(
‑
)
‑
(3S,7R)
‑
epi
‑
ME
‑
JA。ME
‑
JA异构体在植物体内的分布和生理活性作用各不相同，对ME
‑
JA的手性分析及高灵敏检测可进一步揭示ME
‑
JA对植物的生理调控作用。气质联用法由于其成本效益和高灵敏度，已成为对ME
‑
JA进行定性和定量分析的常用方法。
[0003]文章“Isolation of the four methyl jasmonate stereoisomers and their effects on selected chiral volatile compounds in red raspberries”中，Gema Flores等人使用全甲基化β
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环糊精柱，通过固相萃取
‑
高效液相色谱法分离了ME
‑
JA中存在的四种对映异构体。但该方法难以保证批次间的重复性，且固相萃取柱成本较高。文章“Determination of chiral jasmonates in flowers by GC/MS after monolithic material sorptive extraction”中，Wen Ma等人建立了采用整体材料吸附萃取
‑
GC/MS法测定花卉中茉莉酸和ME
‑
JA对映异构体的含量，采用具有手性固定相的毛细管气相色谱柱。使用选择性离子检测模式，ME
‑
JA的检测限(S/N＝3)为0.257ng/mL，定量限(S/N＝10)为0.856ng/mL。文章“Separating and identifying the four stereoisomers of methyl jasmonate by RP
‑
HPLC and using cyclodextrins in a novel way”中，Adri
á
n Matencio等人使用反相高效液相色谱法分离和鉴定了ME
‑
JA对映异构体，具体采用了250mm C18色谱柱和不同比例的环糊精。但是，以上方法由于存在分离度较差、定量限或检测限较高等原因，因此均不能对四种ME
‑
JA对映异构体单体进行定量分析。
[0004]综上，现有的分离测定ME
‑
JA对映异构体单体的技术仍有较大的改进之处。

技术实现思路

[0005]本专利技术旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种ME
‑
JA对映异构体的分离测定方法，该方法能够定性并且精确定量四种ME
‑
JA对映异构体，为植物样品中ME
‑
JA对映异构体的定性和定量测定提供了可靠、高效的分析方法。
[0006]本专利技术的第一方面，提供一种ME
‑
JA对映异构体的分离测定方法，包括以下步骤：
[0007]S1、用乙腈提取植物样本，超声，固液分离，得到乙腈提取液；
[0008]S2、将步骤S1所述的乙腈提取液与净化剂填料、氯化钠和水混合，固液分离，取上清，加入正辛醇进行空气辅助液液微萃取；
[0009]S3、离心，取有机层作为待测液；
[0010]S4、采用气相色谱
‑
质谱联用法(GC
‑
MS/MS)分析步骤S3所述待测液。
[0011]在本专利技术的一些实施方式中，所述乙腈和水的体积比为1mL：4
‑
6mL，例如1mL：4
‑
5mL、1mL：4mL。
[0012]在本专利技术的一些实施方式中，所述净化剂填料为GCB、PSA、中性氧化铝中的至少两种，且至少包含GCB。
[0013]在本专利技术的一些实施方式中，所述气相色谱中采用的色谱柱以化学键合的β
‑
环糊精为固定相。
[0014]根据本专利技术实施方式的ME
‑
JA对映异构体的分离测定方法，至少具备如下有益效果：
[0015]该方法首次运用空气辅助液液微萃取技术萃取植物样本中的ME
‑
JA，有机试剂的使用量少，对环境友好，步骤简单，能够实现植物样品中ME
‑
JA的快速萃取。净化剂填料可以有效地去除植物样本中对检测有较大影响的干扰物，例如，PSA可作为极性相和弱阴离子交换剂，具有去除脂肪酸、糖类和其他共萃取物的能力，对茶多酚、叶绿素也有净化作用；中性氧化铝可有效去除脂肪，其可选择性吸附强极性脂肪类物质，用于吸附黄酮类，糖苷类，酚醇类，有机酸等极性分子，也作为脂肪载体吸附油脂和色素；GCB表面总体表现为疏水性，可以吸附非极性和弱极性化合物，其次，其表面存在一些极性位点，能吸附极性化合物，可以用来分离化合物和去除色素，另外，其对咖啡因有净化作用，从而进一步降低基质效应，提高了回收率。使用本专利技术上述特定的净化剂填料进行杂质去除的处理能够得到较高的回收和净化处理效果。采用正辛醇作为萃取剂，有助于提高萃取效率，加入适量的水，能够在实现萃取分层的同时保证检测效果。GC
‑
MS/MS技术能够分离测定ME
‑
JA对映异构体，分别精确定量ME
‑
JA中的四种对映异构体。具有操作简便、灵敏度高、重复性好、定量准确的优点。
[0016]在本专利技术的一些实施方式中，所述植物样本为茶叶。
[0017]在本专利技术的一些实施方式中，所述植物样本与乙腈的质量体积比为100mg：0.5
‑
1.5mL，例如100mg：0.5
‑
1.2mL、100mg：0.5
‑
1.0mL、100mg：0.6
‑
1.5mL、100mg：0.6
‑
1.2mL、100mg：0.6
‑
1.0mL、100mg：0.8
‑
1.5mL、100mg：0.8
‑
1.2mL、100mg本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种茉莉酸甲酯对映异构体的分离测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、用乙腈提取植物样本，超声，固液分离，得到乙腈提取液；S2、将步骤S1所述的乙腈提取液与净化剂填料、氯化钠和水混合，固液分离，取上清，加入正辛醇进行空气辅助液液微萃取；S3、离心，取有机层作为待测液；S4、采用气相色谱
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质谱联用法分析步骤S3所述待测液；所述乙腈和水的体积比为1：4
‑
6；所述净化剂填料为GCB、PSA、中性氧化铝中的至少两种，且至少包含GCB；所述气相色谱中采用的色谱柱以化学键合的β
‑
环糊精为固定相。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述植物样本与乙腈的质量体积比为100mg：0.5
‑
1.5mL。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超声的时间为20
‑
30min。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述净化剂填料中，GCB的质量分数为40
‑
60％。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述净化剂填料与所述植物样本的质量比为1
‑
5：10。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以所述氯化钠和水的总重量计，其中，所述氯化钠的质量分数为5
‑
10...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗洲飞，朱咸鑫，李辉，曾慧，夏目清，
申请(专利权)人：湖南农业大学，
类型：发明
国别省市：