大豆属调节元件及其用途制造技术

本文提供了衍生自或获得自多种大豆属物种的调节元件，如启动子和终止子。此类调节元件可用于植物如大豆的表达盒。此类表达盒通常含有启动子和终止子序列以控制每个编码序列的表达。对于某些性状，如昆虫抗性和除草剂耐受性，可能需要使用具有中到高组成型表达的启动子和终止子。动子和终止子。动子和终止子。

Soybean regulating element and its application

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】大豆属调节元件及其用途
[0001]相关申请
[0002]本申请要求于2019年11月25日提交的临时申请62/939,762的优先权，并通过引用将其全部内容并入本文。


[0003]本专利技术涉及调节元件，例如启动子和终止子，其可用于植物如大豆中的表达盒。
[0004]序列表
[0005]本申请附有2020年11月16日创建的命名为82000_ST25.txt的序列表，其大小为大约54kb。本序列表通过引用以其全文并入本文。本序列表随同此申请经由EFS
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Web提交，并且符合37C.F.R.
§
1.824(a)(2)
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(6)和(b)。

技术介绍

[0006]转基因植物是理想性状，如昆虫抗性和除草剂耐受性的重要来源。为了产生此类性状，通常将一个或多个核酸引入含有表达盒的植物中，这些表达盒表达一种或多种性状的一种或多种编码序列。此类表达盒通常含有启动子和终止子序列以控制每个编码序列的表达。对于某些性状，如昆虫抗性和除草剂耐受性，可能需要使用具有中到高组成型表达的启动子和终止子。此类启动子和终止子的选择仍然有限。仍然需要额外的启动子和终止子序列以驱动基因表达，以实现稳健的蛋白质生产，理想情况是在所有或大多数大豆组织中。

技术实现思路

[0007]本文提供了获得自或衍生自大豆属物种，例如银毛大豆(Glycine argyrea)、灰色大豆(Glycine canescens)、澎湖大豆(Glycine clandestine)、大豆(Glycine max)和短绒野大豆(Glycine tomentella)的调节元件，如启动子和终止子。此类调节元件可用于构建用于表达目的编码序列，如表达植物中目的性状的编码序列的表达盒。如本文所述，测试了几种启动子和终止子序列，并且其显示与对照启动子或终止子相比在叶、根、种子荚和/或胚中具有提高的表达水平。因此，本披露的一些方面涉及此类调节元件和其在表达盒、载体和转基因植物及植物细胞中的用途。
[0008]在一些实施例中，本披露提供了表达盒，其包含与SEQ ID NO:1
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5、8
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29或31中的一个或多个具有至少90％同一性(例如，至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性)的核苷酸序列，其中该核苷酸序列可操作地连接至异源核苷酸序列。在一些实施例中，本披露提供了表达盒，其包含含有SEQ ID NO:1
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5、8
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29或31中的一个或多个或其生物活性片段的核苷酸序列，其中该核苷酸序列可操作地连接至异源核苷酸序列。在一些实施例中，本披露提供了表达盒，其包含与SEQ ID NO:1
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5中的一个或多个具有至少90％同一性(例如，至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性)的第一核苷酸序列和与SEQ ID NO:8
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29中的一个或多个具有至少90％同一性(例如，至少91％、
至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性)的第二核苷酸序列，其中该第一和/或第二核苷酸序列可操作地连接至异源核苷酸序列。
[0009]在一些实施例中，该异源核苷酸序列是编码目的RNA或蛋白质的目的核酸。在一些实施例中，该目的RNA或蛋白质能赋予植物所希望的特征，如抗生素抗性、病毒抗性、昆虫抗性、疾病抗性、对其他有害生物的抗性、除草剂耐受性、改善的营养价值、工业过程中改善的性能或改变的繁殖能力。在一些实施例中，该异源核苷酸序列编码选择性标记。在一些实施例中，该表达盒进一步包含选择性标记。
[0010]在一些实施例中，本披露提供了包含上述实施例中任一项所述的表达盒的载体。在一些实施例中，该载体是质粒、病毒或土壤杆菌(Agrobacterium)。
[0011]在一些实施例中，本披露提供了植物细胞，其包含上述实施例中任一项所述的表达盒或载体。在一些实施例中，该植物细胞是双子叶植物细胞。在一些实施例中，该植物细胞是大豆细胞。在一些实施例中，本披露提供了包含该植物细胞的转基因植物。在一些实施例中，该植物是双子叶植物。在一些实施例中，该植物是大豆植物。在一些实施例中，本披露提供了来自转基因植物的种子。
[0012]在一些实施例中，本披露提供了一种方法，该方法包括将上述实施例中任一项所述的表达盒或载体引入植物或植物细胞中。在一些实施例中，该方法进一步包括将该植物或植物细胞置于由表达盒或载体表达目的RNA或蛋白质和/或选择性标记的条件下。在一些实施例中，该方法进一步包括将该植物与第二植物杂交或自交该植物以产生子代植物。
[0013]在一些实施例中，本披露提供了通过上述实施例中任一项所述的方法产生的转基因植物，或其植物部分。在一些实施例中，该植物是双子叶植物。在一些实施例中，该植物是大豆植物。
附图说明
[0014]图1是显示T1大豆幼苗叶中Bx9表达的图。Hom＝纯合，Het＝杂合。24244＝prGaUbi599400；24245＝prGcUbiPI339656；24246＝prGtUbiPI505267；24247＝prGaEF1aPI599400；24249＝prGaSAMSPI599400，阴性对照；24276＝prGmSAMS，阳性对照。标记A010A、A021A、A027A等分别代表不同的事件。
[0015]图2是显示在生殖阶段的T1大豆成熟叶中Bx9表达的图。Hom＝纯合，Het＝杂合。24244＝prGaUbi599400；24245＝prGcUbiPI339656；24246＝prGtUbiPI505267；24247＝prGaEF1aPI599400；24249＝prGaSAMSPI599400，阴性对照；24276＝prGmSAMS，阳性对照。标记A027A、A021A、A023A等分别代表不同的事件。
[0016]图3是显示在生殖阶段的T1大豆根中Bx9表达的图。Hom＝纯合，Het＝杂合。24244＝prGaUbi599400；24245＝prGcUbiPI339656；24246＝prGtUbiPI505267；24247＝prGaEF1aPI599400；24249＝prGaSAMSPI599400，阴性对照；24276＝prGmSAMS，阳性对照。标记A027A、A021A、A023A等分别代表不同的事件。
[0017]图4是显示T1大豆种子荚中Bx9表达的图。Hom＝纯合，Het＝杂合。24244＝prGaUbi599400；24245＝prGcUbiPI339656；24246＝prGtUbiPI505267；24247＝prGaEF1aPI599400；24249＝prGaSAMSPI599400，阴性对照本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种表达盒，其包含与SEQ ID NO:1
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5、8
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29或31中的一个或多个具有至少90％同一性的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列可操作地连接至异源核苷酸序列。2.一种表达盒，其包含含有SEQ ID NO:1
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5、8
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29或31中的一个或多个或其生物活性片段的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列可操作地连接至异源核苷酸序列。3.一种表达盒，其包含与SEQ ID NO:1
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5或31中的一个或多个具有至少90％同一性的第一核苷酸序列和与SEQ ID NO:8
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29中的一个或多个具有至少90％同一性的第二核苷酸序列，其中所述第一和/或第二核苷酸序列可操作地连接至异源核苷酸序列。4.如权利要求1至3中任一项所述的表达盒，其中所述异源核苷酸序列是编码目的RNA或蛋白质的目的核酸。5.如权利要求4所述的表达盒，其中所述目的RNA或蛋白质能赋予植物所希望的特征，如抗生素抗性、病毒抗性、昆虫抗性、疾病抗性、对其他有害生物的抗性、除草剂耐受性、改善的营养价值、工业过程中改善的性能或改变的繁殖能力。6.如权利要求1至5中任一项所述的表达盒，其中所述异源核苷酸序列编码选择性标...

【专利技术属性】
技术研发人员：周爱灵，J，
申请(专利权)人：先正达农作物保护股份公司，
类型：发明
国别省市：