鼠尾草酸在制备防治流感药物中的用途制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，具体涉及鼠尾草酸在制备防治流感药物中的用途。本发明专利技术通过大量的实验数据证明，鼠尾草酸在细胞水平对流感病毒有显著的抗病毒效果，并且通过动物实验证明鼠尾草酸对感染流感病毒的小鼠具有显著的保护作用，提高小鼠的存活率。并且鼠尾草酸可以于植物中提取得到，来源广泛、安全性高，非常适于制成防治流感病毒的药物。非常适于制成防治流感病毒的药物。非常适于制成防治流感病毒的药物。

【技术实现步骤摘要】
鼠尾草酸在制备防治流感药物中的用途


[0001]本专利技术属于生物医药
更具体地，涉及鼠尾草酸在制备防治流感药物中的用途。

技术介绍

[0002]流行性感冒简称流感，是一种由流感病毒(Influenza Virus，IVs)引起的急性呼吸道传染病，根据波及范围的大小不同，流感可分为大流行性流感和季节性流感。流感作为人畜共患病，宿主广泛，禽类以及哺乳动物均可以被感染，其中水禽为流感病毒的主要宿主。能够感染禽类的流感病毒被统称为禽流感病毒，其中，所有禽流感病毒均属于甲型流感病毒。一般情况下禽流感病毒只感染其天然宿主，而禽流感的H5N1和H7N9两种亚型也具有感染人类并引起人类疾病的潜力，其中，H5N1亚型流感病毒更是属于高致病性禽流感病毒，对禽类和人类都造成了极大的危害。
[0003]在传统的防治方法中，疫苗接种是预防流感最有效的策略之一。但是，对于一些高危人群如老人、儿童等，疫苗接种很难使其产生有效免疫；另一方面，由于流感病毒的高变异性，需要不断地更新有效疫苗用于预防流感病毒的感染，而从鉴定毒株到研发出相应的疫苗通常至少需要六个月的时间。因此，抗流感病毒的药物仍然是目前防治流感疾病的主要防治方法，具有至关重要的作用。
[0004]FDA批准用于临床治疗流感的药物主要包括M2离子通道抑制剂(金刚烷胺和金刚乙胺)、神经氨酸酶(NA)抑制剂(帕拉米韦、奥司他韦和扎那米韦)，以及近年来日本开发的病毒聚合酶抑制剂法匹拉韦和Cap依赖型核酸内切酶抑制剂巴沙洛韦，品种十分有限。而经过研究发现，长期单一用药容易导致流感流行株具有耐药性，如1970年代开始使用的金刚烷胺和金刚乙胺因长期使用，目前的流感毒株已全面耐药，WHO已经不推荐金刚烷胺和金刚乙胺作为季节性流感病毒治疗药物；近年来，对奥司他韦耐药的报道也日益增多(Tani N,Kawai N,Chong Y,et al.Susceptibility of epidemic viruses to neuraminidase inhibitors and treatment
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emergent resistance in the Japanese 2019
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20 influenza season[J].Journal of Infection,2022,84(2):151
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157)。因此，抗流感病毒新药的研发迫在眉睫。

技术实现思路

[0005]本专利技术要解决的技术问题是克服现有常用抗流感病毒已产生耐药性的缺陷和不足，提供鼠尾草酸在制备防治流感药物中的用途。
[0006]本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
[0007]鼠尾草酸(Carnosic acid，CA)属于酚二萜化合物，分子式为C
20
H
28
O4，分子量为332.43，淡黄色固体，微溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂。鼠尾草酸广泛分布于迷迭香、鼠尾草、三叶鼠尾草和快乐鼠尾草等植物中，具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤、神经保护和抑制肥胖等生物活性。
[0008]专利技术人从迷迭香风干叶中提取获得高纯度的鼠尾草酸，采用高效液相色谱法测定鼠尾草酸的含量在98％以上。通过间接免疫荧光显微分析和病毒滴度测定等方法发现鼠尾草酸在人肺癌上皮细胞(A549)对高致病性流感病毒H5N1及H1N1等低致病性流感病毒具有显著的抗病毒效果，通过动物实验确定鼠尾草酸对感染H5N1高致病性流感病毒小鼠具有显著保护作用。证明鼠尾草酸有显著的抗流感病毒效果。
[0009]因此，本专利技术要求保护鼠尾草酸在制备防治流感药物中的用途，所述鼠尾草酸具有式I结构：
[0010][0011]其中，所述鼠尾草酸可以为市购也可以是从富含的植物中提取。
[0012]鼠尾草酸可以通过以下方法制备得到：
[0013]S1、迷迭香干叶用粉碎机粉碎后过筛(20目)，用60～80％体积分数的乙醇溶液50℃加热回流提取两次，每次2小时；收集滤液，减压蒸馏除去溶剂，得浸膏；
[0014]S2、称取H1020树脂，湿法装柱，按常规对柱中树脂进行处理；用40～60％的乙醇溶液将步骤S1所得浸膏分散均匀，加入树脂柱使鼠尾草酸被吸附，吸附温度25℃，饱和吸附时间3小时；用85～95％的乙醇溶液作为解吸剂进行解吸；回收解吸液，减压蒸馏去除溶剂，得鼠尾草酸粗品；
[0015]S3、采用硅胶柱层析法对步骤S2所得鼠尾草酸粗品进行纯化，柱层析的硅胶粒度为83～165μm，洗脱剂为乙酸乙酯:正己烷4:6(v/v)，径高比1:10；洗脱液后处理，得到的鼠尾草酸。
[0016]进一步地，所述流感由流感病毒引起，所述流感病毒为甲型流感病毒、乙型流感病毒、丙型流感病毒或丁型流感病毒。
[0017]优选地，所述流感病毒为甲型流感病毒。
[0018]优选地，所述甲型流感病毒为H1N1、H5N1、H3N2、H7N1、H7N2、H7N3、H7N7、H7N9、H9N2或H10N8甲型流感病毒。更优选地，所述甲型流感病毒为H1N1、H5N1或H3N2甲型流感病毒。
[0019]更进一步地，所述药物以鼠尾草酸或其药学上可接受的盐为有效成分。
[0020]进一步地，所述鼠尾草酸在细胞上的病毒抑制浓度为大于等于5μM。优选地，所述鼠尾草酸在细胞上的病毒抑制浓度为5～20μM。
[0021]本专利技术要求保护的鼠尾草酸在制备防治流感药物中的用途，所述药物除了对人类的治疗有益以外，还可应用于兽药领域，治疗宠物、引进品种的动物和农场的动物，包括禽类动物、哺乳动物、啮齿类动物等。
[0022]更进一步地，所述鼠尾草酸在小鼠上的病毒抑制剂量为10～40mg/kg/d。根据不同应用对象(如人或动物)可进行相应的剂量换算。
[0023]进一步地，所述药物还含有药学上可接受的辅料。
[0024]更进一步地，所述药物的剂型为口服剂、注射剂或吸入剂。优选地，所述口服剂包括片剂、胶囊、颗粒剂、散剂、口服液等。
[0025]本专利技术具有以下有益效果：
[0026]本专利技术提供了一种鼠尾草酸在制备防治流感药物中的新用途，通过大量的实验数据证明，鼠尾草酸在细胞水平对流感病毒有显著的抗病毒效果，并且通过动物实验证明鼠尾草酸对感染流感病毒的小鼠具有显著的保护作用，提高小鼠的存活率。并且鼠尾草酸可以于植物中提取得到，来源广泛、安全性高，非常适于制成防治流感病毒的药物。
附图说明
[0027]图1为实施例1中鼠尾草酸对A549细胞的细胞毒性测定结果。
[0028]图2为实施例2中间接免疫荧光方法分析不同浓度鼠尾草酸在A549细胞中对高致病性流感病毒H5N1NP蛋白表达的抑制作用的荧光图。
[0029]图3为实施例3中通过终点稀释法分析不同浓度鼠尾草酸在A549细胞中对高致病性流感病毒H5N1复制的抑制作用的数据统计图。
[0030]图4为实施例4中通过终点稀释法分析不同浓度鼠尾草酸在A549细胞中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.鼠尾草酸在制备防治流感药物中的用途，其特征在于，所述鼠尾草酸具有式I结构：2.根据权利要求1所述用途，其特征在于，所述流感由流感病毒引起，所述流感病毒为甲型流感病毒、乙型流感病毒、丙型流感病毒或丁型流感病毒。3.根据权利要求2所述用途，其特征在于，所述流感病毒为甲型流感病毒。4.根据权利要求3所述用途，其特征在于，所述甲型流感病毒为H1N1、H5N1、H3N2、H7N1、H7N2、H7N3、H7N7、H7N9、H9N2或H10N8甲型流感病毒。5.根据权利要求4所述用途，其特征在于，所述甲型流感病...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈建新，彭海英，刘雅红，亓文宝，武力，罗伟，胡海波，邱电，何应敏，
申请(专利权)人：湖南植之源农牧有限公司，
类型：发明
国别省市：