一种丁香粗多糖的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种丁香粗多糖的制备方法，其提取的丁香粗性多糖，简单易行，每10g丁香药材能够提取粗多糖0.96～11.8g，通过苯酚

【技术实现步骤摘要】
一种丁香粗多糖的制备方法及应用


[0001]本专利技术属于中药和保健品
，涉及一种丁香粗多糖的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]丁香为桃金娘科植物丁香(Eugeniacaryophllata Thunb.)的干燥花蕾，称公丁香或雄丁香，当花蕾由绿色转红时采摘，晒干，分布于从欧洲东南部到东亚的温带地区。2020年版《中国药典》，丁香药材具温中降逆，补肾助阳功效。用于脾胃虚寒，呃逆呕吐，食少吐泻，心腹冷痛，肾虚阳痿。丁香现代药理作用有抗炎镇痛、解热、抑制微生物、抗凝血、耐缺氧、降血压、抗病毒、镇咳祛痰作用等。“丁香，药食同源之物也。”食疗方面，丁香是世界名贵的香料植物，用于烹调、添加剂、制茶等。丁香花里含有齐墩果酸、黄酮及苷类、酚类、多糖等物质。其中，广泛存在于动物、植物、微生物中的多糖具有多种生物活性，如抗肿瘤，抗氧化，降血糖，降血脂，免疫调节，抗病毒，抗辐射等，并且具有对人体副作用小、来源广泛、营养保健和药物活性等特点。
[0003]因此，有必要研发一种丁香粗多糖的制备方法来获得高品质的丁香粗多糖及其应用。

技术实现思路

[0004]本专利技术目的是提供一种丁香粗多糖的制备方法及应用，解决上述问题。
[0005]本专利技术的技术方案是：
[0006]一种丁香粗多糖的制备方法，该方法包括：
[0007](1)取公丁香药材干燥粉碎，得干粉备用；
[0008](2)向所述干粉中加入去离子水，在加热条件下提取多次，合并提取液，得水提液；
[0009](3)将所述水提液减压浓缩，得浓缩水提液，边搅拌边缓慢向所述浓缩水提液中加入乙醇，获得第一混合物，将所述第一混合物搅拌均匀，静置，离心，得上清液；
[0010](4)向所述上清液中加入乙醇，获得第二混合物，室温静置过夜，离心，获得沉淀，真空冷冻干燥，研磨成粉状，得丁香粗多糖。
[0011]进一步的，在步骤(1)中，所述干粉过60目筛。
[0012]进一步的，在步骤(2)中，所述干粉与去离子水的料液比为1kg：20～30L，所述加热温度为80～100℃，所述提取次数为2～3次，每次2～3小时。
[0013]进一步的，在步骤(3)中，所述减压浓缩的温度为50～60℃，浓缩比例为1g∶2.5～1∶5mL。
[0014]进一步的，在步骤(3)中，所述搅拌的转速为160r/min。
[0015]进一步的，在步骤(3)中，所述乙醇的浓度为95％，所述第一混合物中乙醇的浓度为15～25％。
[0016]进一步的，在步骤(3)中，所述静置的温度为5℃，时间为5～6小时，所述离心的转速为4000r/min，时间为10min。
[0017]进一步的，在步骤(4)中，所述乙醇的浓度为95％，所述第二混合物中乙醇的浓度为75～85％。
[0018]进一步的，在步骤(4)中，所述离心的转速为4000r/min，时间为10min，所述真空冷冻干燥的工作压力为60Pa，时间为24～30小时。
[0019]本专利技术的另一技术方案是：一种丁香粗多糖，在降低Ⅱ型糖尿病血糖和体外清除自由基中的应用。
[0020]本专利技术提供了一种丁香粗多糖的制备方法，所制得的丁香粗多糖具有较强的体外清除自由基和体内降血糖作用，为丁香粗多糖在制备抗氧化和降血糖药物和食物的应用奠定了基础。
附图说明
[0021]图1为丁香粗多糖体外清除DPPH自由基的紫外扫描图；
[0022]图2为丁香粗多糖对Ⅱ型糖尿病小鼠的空腹血糖水平的影响型糖尿病小鼠的空腹血糖水平的影响示意图；
[0023]图3为丁香粗多糖对Ⅱ型糖尿病小鼠耐受量的影响示意图；
[0024]图4为丁香粗多糖对Ⅱ型糖尿病小鼠肝糖原、肌糖原的影响型糖尿病小鼠肝糖原、肌糖原的影响示意图；
[0025]图5为丁香粗多糖对Ⅱ型糖尿病小鼠肝脏中SOD、MDA、CAT的含量和GSH
‑
Px活性的影响示意图；
[0026]图6为丁香粗多糖对Ⅱ型糖尿病小鼠胰岛形态的影响(HE,
×
400)示意图；
[0027]图7为western blot检测GLUT
‑
2、GS蛋白含量图。
具体实施方式
[0028]1、主要试剂与材料
[0029]丁香药材，购自安徽亳州中药材市场；葡萄糖、苯酚、无水乙醇、浓硫酸、四硼酸钠十水合物均购自国药集团化学试剂有限公司；TG试剂盒、LDL
‑
C试剂盒、超氧化物歧化酶试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶试剂盒、丙二醛试剂盒、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；葡萄糖过氧化氢酶试剂盒购自上海荣盛生物药业有限公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒购自碧云天生物科技研究所；Western及IP细胞裂解液购自凯基生物公司。
[0030]2、主要仪器
[0031]高速冷冻离心机(德国Eppendorf公司)；电子分析天平(Mettler
‑
Toledo公司)；多功能酶标仪(美国伯腾仪器有限公司)；医用离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)；超声细胞破碎仪(宁波科生仪器厂)；电泳系统(TOYOBO Biotech.Co.Ltd)；HH系列数显恒温水浴锅(江苏科析仪器有限公司)。
[0032]3、本专利技术的目的是提供一种丁香粗多糖的制备方法，包括以下步骤：
[0033](1)丁香药材预处理：取公丁香药材干燥粉碎，过60目筛，得干粉备用；
[0034](2)丁香粗多糖提取：
[0035]A、按料液比20～30倍量(W/V)向干粉中加入去离子水，加热至90～100℃提取2～3次，每次2～3小时，合并提取液，得水提液；
[0036]B、所得水提液减压浓缩，减压浓缩的温度为50～60℃浓缩比例为1∶2.5～1∶5(W/V)，得浓缩水提液；在磁力搅拌器搅拌情况下，缓缓向所得浓缩水提液中加入95％乙醇以得到乙醇浓度为15～25％的第一混合物，搅拌均匀，5℃静置5～6小时后离心，得上清液；
[0037]C、向所得上清液中加入95％乙醇以得到乙醇浓度为75～85％(实测体积浓度)的第二混合物，室温静置过夜，离心，以得到沉淀，冷冻24～30小时，干燥，研磨成粉状，得丁香粗多糖。
[0038]4、在得到丁香粗多糖后，将所得粗多糖加水溶解后，以4000rpm离心10分钟，取上清液，
①
测定丁香粗多糖中多糖、糖醛酸和蛋白质含量；
②
用于体外抗氧化活性实验；
③
将所得粗多糖加水溶解分散后，用于体内降血糖实验。
[0039]为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例进一步说明本专利技术的技术方案。但是本专利技术不限于所列出的实施例，还应包括在本专利技术所要求的权利范围内其他任何公知的改变。
[0040]此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本专利技术至少一个实现方式中的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种丁香粗多糖的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)取公丁香药材干燥粉碎，得干粉备用；(2)向所述干粉中加入去离子水，在加热条件下提取多次，合并提取液，得水提液；(3)将所述水提液减压浓缩，得浓缩水提液，边搅拌边缓慢向所述浓缩水提液中加入乙醇，获得第一混合物，将所述第一混合物搅拌均匀，静置，离心，得上清液；(4)向所述上清液中加入乙醇，获得第二混合物，室温静置过夜，离心，获得沉淀，真空冷冻干燥，研磨成粉状，得丁香粗多糖。2.根据权利要求1所述的一种丁香粗多糖的制备方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述干粉过60目筛。3.根据权利要求1所述的一种丁香粗多糖的制备方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述干粉与去离子水的料液比为1kg：20～30L，所述加热温度为80～100℃，所述提取次数为2～3次，每次2～3小时。4.根据权利要求1所述的一种丁香粗多糖的制备方法，其特征在于：在步骤(3)中，所述减压浓缩的温度为50～60℃，浓缩比例为1g∶2.5～1∶5mL。5.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐乃玉，薛洁，张真庆，李笃信，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：