L-谷氨酰胺和D-谷氨酰胺的分离检测方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种L

【技术实现步骤摘要】
L
‑
谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺的分离检测方法及应用


[0001]本专利技术涉及分析化学
，尤其是涉及一种L
‑
谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺的分离检测方法及应用。

技术介绍

[0002]L
‑
谷氨酰胺是一种氨基酸，可用于治疗胃及十二指肠溃疡、胃炎及胃酸过多，也用于改善脑功能。L
‑
谷氨酰胺是合成甘氨酰
‑
L
‑
谷氨酰胺的原料，而甘氨酰
‑
L
‑
谷氨酰胺又是复方氨基酸(15)双肽(2)注射液的原料药。鉴于控制原料药起始物料杂质对于终产物甘氨酰
‑
L
‑
谷氨酰胺的质量至关重要，对其原料的质量控制直接影响到制剂终产品的质量。因此，为更好控制原料药及制剂的质量，对L
‑
谷氨酰胺的杂质研究尤为重要。
[0003]D
‑
谷氨酰胺为L
‑
谷氨酰胺的光学异构体，两者极性相近，利用普通液相色谱洗脱体系进行检测，难以对两者进行有效的分离。目前谷氨酰胺原料在中国药典2015、美国药典USP40和日本药典JP17均有收载，但是各药典均未涉及异构体D
‑
谷氨酰胺的检测。该杂质及其检测方法也尚未有文献报道。故本专利技术对甘氨酰
‑
L
‑
谷氨酰胺原料药及其制剂质量控制有着重要意义。
[0004]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的主要目的在于提供一种L
‑
谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺的分离检测方法，以期至少部分地解决上述技术问题中的至少之一。
[0006]作为本专利技术的第一个方面，本专利技术提供了一种L
‑
谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺的分离检测方法，采用高效液相色谱法，色谱条件包括：采用手性色谱柱；以高氯酸水溶液
‑
甲醇为流动相；等度洗脱；
[0007]所述L
‑
谷氨酸的结构式如下：
[0008][0009]所述D
‑
谷氨酸的结构式如下：
[0010][0011]进一步的，所述高氯酸水溶液的pH＝1.2
‑
1.8。
[0012]进一步的，所述高氯酸水溶液与甲醇的体积比为(75
‑
85)：(15
‑
25)。
[0013]进一步的，所用检测器为紫外检测器，检测波长为190
‑
210nm。
[0014]进一步的，所用柱温为20
‑
30℃。
[0015]进一步的，所用流速为0.1
‑
0.3mL/min。
[0016]进一步的，所述手性色谱柱以共价键合手性冠醚硅胶为填充剂。
[0017]进一步的，采用高效液相色谱法，色谱条件包括：采用日本大赛璐公司的CROWNPAK CR
‑
I(+)
‑
UI021色谱柱；以pH＝1.3
‑
1.6的高氯酸水溶液
‑
甲醇为流动相，两者的体积比为(78
‑
83)：(17
‑
22)；所用检测器为紫外检测器，检测波长为195
‑
205nm；所用柱温为22
‑
28℃；所用流速为0.15
‑
0.25mL/min；等度洗脱。
[0018]进一步的，采用高效液相色谱法，色谱条件包括：采用日本大赛璐公司的CROWNPAK CR
‑
I(+)
‑
UI021色谱柱；以pH＝1.5的高氯酸水溶液
‑
甲醇为流动相，两者的体积比为80：20；所用检测器为紫外检测器，检测波长为200nm；所用柱温为25℃；所用流速为0.2mL/min；等度洗脱。
[0019]作为本专利技术的第二个方面，本专利技术还提供了上述分离检测方法在甘氨酰
‑
L
‑
谷氨酰胺原料药或其制剂的质量控制中的应用。
[0020]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0021]本专利技术提供的L
‑
谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺的分离检测方法，通过对流动相、色谱柱的优化设计，使L
‑
谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺达到有效分离，且分离度良好，不受其他杂质干扰。经过系统方法学验证，专属性强、灵敏度高，可用于甘氨酰
‑
L
‑
谷氨酰胺原料药或其制剂中D
‑
谷氨酰胺的分离检测，提高了氨基酸注射液的安全性和有效性。
附图说明
[0022]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0023]图1为实施例1
‑
1中L
‑
谷氨酰胺定位溶液的HPLC谱图；
[0024]图2为实施例1
‑
1中D
‑
谷氨酰胺定位溶液的HPLC谱图；
[0025]图3为实施例1
‑
1中空白溶剂的HPLC谱图；
[0026]图4为实施例1
‑
1中混合溶液的HPLC谱图；
[0027]图5为实施例2中L
‑
谷氨酰胺检测限的HPLC谱图；
[0028]图6为实施例2中L
‑
谷氨酰胺定量限的HPLC谱图；
[0029]图7为实施例2中D
‑
谷氨酰胺检测限的HPLC谱图；
[0030]图8为实施例2中D
‑
谷氨酰胺定量限的HPLC谱图；
[0031]图9为对照实施例1中混合溶液的HPLC谱图；
[0032]图10为对照实施例2中混合溶液的HPLC谱图；
[0033]图11为对照实施例3中混合溶液的HPLC谱图。
具体实施方式
[0034]下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获
得的常规产品。
[0035]L
‑
谷氨酰胺对照品为自制对照品，来自天津药业研究院股份有限公司。
[0036]D
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谷氨酰胺对照品为外购对照品，来自天津市九川科技有限公司。
[0037]实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种L
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谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺的分离检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，色谱条件包括：采用手性色谱柱；以高氯酸水溶液
‑
甲醇为流动相；等度洗脱；所述L
‑
谷氨酸的结构式如下：所述D
‑
谷氨酸的结构式如下：2.根据权利要求1所述的L
‑
谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺的分离检测方法，其特征在于，所述高氯酸水溶液的pH＝1.2
‑
1.8。3.根据权利要求1或2所述的L
‑
谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺的分离检测方法，其特征在于，所述高氯酸水溶液与甲醇的体积比为(75
‑
85)：(15
‑
25)。4.根据权利要求3所述的L
‑
谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺的分离检测方法，其特征在于，所用检测器为紫外检测器，检测波长为190
‑
210nm。5.根据权利要求1、2或4任一项所述的L
‑
谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺的分离检测方法，其特征在于，所用柱温为20
‑
30℃。6.根据权利要求5所述的L
‑
谷氨酰胺和D
‑
谷氨酰胺的分离检测方法，其特征在于，所用流速为0.1
‑
0.3mL/min。7.根据权利要求1、2、4或6任一项所述的L
‑
谷氨酰胺和D
...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓明，王宏玲，
申请(专利权)人：天津药业研究院股份有限公司，
类型：发明
国别省市：