一种用于扁蓿豆组织培养的培养基制造技术

一种用于诱导扁蓿豆愈伤组织的培养基，包括诱导培养基和继代培养基，所述诱导培养基为：MS+0.18

【技术实现步骤摘要】
一种用于扁蓿豆组织培养的培养基


[0001]本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及一种用于扁蓿豆组织培养的培养基。

技术介绍

[0002]扁蓿豆(Medicago ruthenica)，属于豆科扁蓿豆属，分布于我国东北、内蒙古、宁夏及甘肃等省区，是典型的上繁草，其叶的形状是两头小，上中部大，略成非对称的“菱形”，是优质的饲用草种，可作为人工草地混播草种，也可作为水土保持植物，是比较有经济利用价值的豆科牧草。
[0003]近些年，人们对畜牧养殖的要求不断提升，对扁蓿豆需求量逐渐增多，而在现有技术中，扁蓿豆的培育均为种子生产，其单产水平较低；因此应用现代生物育种技术、建立组培体系培育扁蓿豆成为扁蓿豆种植资源开发利用的主要研究方向，所以，需要一种提高萹蓄豆繁殖速度和繁殖量的培养基。

技术实现思路

[0004]本专利技术首次应用现代生物育种技术，提出一种扁蓿豆组织培养的培养基，提供一种用于诱导扁蓿豆愈伤组织的培养基，以获得高诱导率和高增殖倍数的扁蓿豆愈伤组织的，使用本专利技术可以快速诱导愈伤组织并进行增殖扩繁，加快扁蓿豆组织培养速度。
[0005]本专利技术解决技术问题所采用的技术方案是：一种用于扁蓿豆组织培养的培养基，包括诱导培养基和继代培养基，所述诱导培养基为：MS+0.18
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0.22mg/L 6
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BA+0.48
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0.53mg/L NAA +0.18
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0.22mg/L 2,4
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D +0.45
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0.55g/L CH；所述继代培养基为：MS+0.45
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0.55mg/L 6
‑
BA+0.08
‑
0.12mg/L NAA+0.45
‑
0.55g /L CH。
[0006]而且，所述诱导培养基为MS+0.20mg/L 6
‑
BA+0.50mg/L NAA+0.20mg/L 2,4
‑
D +0.50g/L CH。
[0007]而且，所述继代培养基为MS+0.50mg/L 6
‑
BA+0.10mg/L NAA +0.5g/L CH。
[0008]本专利技术的优点和积极效果是：1、本专利技术首次应用现代生物育种技术，提供一种用于诱导扁蓿豆愈伤组织的培养基，以获得高诱导率和高增殖倍数的扁蓿豆愈伤组织的，使用本专利技术可以快速诱导愈伤组织并进行增殖扩繁，加快扁蓿豆繁殖速度。
[0009]2、本专利技术采用了一定配比的诱导培养基对扁蓿豆外植体进行愈伤组织的诱导，诱导率高达86%，可以在短时间内获得大量的愈伤组织，增加了扁蓿豆愈伤组织的诱导速度及繁殖量。
[0010]3、本专利技术采用了一定配比的继代培养基对扁蓿豆的愈伤组织进行增殖培养，增殖倍数可达到4.6，在本专利技术所采用诱导培养基诱导出的愈伤组织的基础上，进一步获得大量
愈伤组织，增加了扁蓿豆组织培养速度。
[0011]4、本专利技术筛选出扁蓿豆组织培养在不同时期的最佳培养基，按照本专利技术的方法可满足扁蓿豆各个时期的营养需要和生长发育，提高了扁蓿豆组织培养过程中的诱导率和增殖倍数，是实现扁蓿豆规模化生产的关键和核心技术。
[0012]5、本专利技术操作简便，成本低廉，诱导效率高，为大规模推广应用奠定了理论和实践基础。
具体实施方式
[0013]下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术，但实施例仅是范例性的，并不对本专利技术的范围构成任何限制。以下实施例中， 6
‑
BA为细胞分裂素； NAA为1
‑
萘乙酸；所述2，4
‑
D为2，4
‑
D
‑
丁酯；CH为水解酪蛋白。
[0014]相关计算公式如下：诱导率=未污染愈伤组织个数/未污染接种外植体个数
×
100%；愈伤组织增殖倍数=培养后愈伤组织质量/接入时愈伤组织质量。
[0015]实施例1选取生长健壮的扁蓿豆叶柄作为外植体，将外植体进行消毒处理。
[0016]将消毒后的外植体接种至诱导培养基进行愈伤组织培养，培养周期为12天，温度为20℃，湿度为60%，所述诱导培养基的配方为：MS+0.18mg/L 6
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BA+0.48mg/L NAA+0.18mg/L 2,4
‑
D+0.45g/L CH。
[0017]优选地，外植体大小为0.27mm。
[0018]优选地，消毒的方法为：75%酒精消毒25s，升汞溶液消毒2min，最后使用无菌水清洗4次，每次冲洗25s。
[0019]测得其诱导率，具体数据见表一。
[0020]实施例2选取生长健壮的扁蓿豆叶柄作为外植体，将外植体进行消毒处理。
[0021]将消毒后的外植体接种至诱导培养基进行愈伤组织培养，培养周期为17天，温度为28℃，湿度为80%，所述诱导培养基的配方为：MS+0.22mg/L 6
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BA +0.53mg/L NAA +0.22mg/L 2,4
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D+0.55g/L CH。
[0022]优选地，外植体大小为0.30mm。
[0023]优选地，消毒的方法为：75%酒精消毒35s，升汞溶液消毒4min，最后使用无菌水清洗6次，每次冲洗35s。
[0024]测得其诱导率，具体数据见表一。
[0025]实施例3选取生长健壮的扁蓿豆叶柄作为外植体，将外植体进行消毒处理。
[0026]将消毒后的外植体接种至诱导培养基进行愈伤组织培养，培养周期为15天，温度为25℃，湿度为70%，所述诱导培养基的配方为：MS+0.20mg/L 6
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BA+0.50mg/L NAA+0.20mg/L 2,4
‑
D +0.50g/L CH。
[0027]优选地，外植体大小为0.28mm。
[0028]优选地，消毒的方法为：75%酒精消毒30s，升汞溶液消毒3min，最后使用无菌水清
洗5次，每次冲洗30s。
[0029]测得其诱导率，具体数据见表一。
[0030]实施例4选取经实施例三诱导出的长势一致的愈伤组织，接种至继代培养基进行增殖培养，继代培养基的配方为：MS+0.45mg/L 6
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BA+0.08mg/L NAA+0.45 g/L CH，培养周期为15天左右，温度为23℃，湿度为65%。
[0031]测得其增殖倍数，具体数据见表二。
[0032]实施例5选取经实施例三诱导出的长势一致的愈伤组织，接种至继代培养基进行增殖培养，继代培养基的配方为：MS+0.55mg/L 6
‑
BA+0.12mg/L NAA+0.55 g/L CH，培养周期为25天左右，温度为28℃，湿度为75%。
[0033]测得其增殖倍数，具体数据见表二。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于扁蓿豆组织培养的培养基，包括诱导培养基和继代培养基，其特征在于：所述诱导培养基为：MS+0.18
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0.22mg/L 6
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BA+0.48
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0.53mg/L NAA +0.18
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0.22mg/L 2,4
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D +0.45
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0.55g/L CH；所述继代培养基为：MS+0.45
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0.55mg/L 6
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BA+0.08
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【专利技术属性】
技术研发人员：贾振宇，马怀林，张跃华，刘亚玲，屈璐璐，闫士元，白杨，王晓龙，杜聪，郭秀芳，
申请(专利权)人：蒙草生态环境集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：