长非编码RNALINC01963作为肺癌肿瘤标志物及治疗靶点制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，具体属于分子生物学技术领域，尤其涉及长非编码RNA LINC01963作为肺癌肿瘤标志物及治疗靶点的应用。本发明专利技术提供了长非编码RNA LINC01963作为肺癌肿瘤标志物及治疗靶点，长非编码RNA LINC01963在肺癌患者中低表达，其表达与患者淋巴结转移和临床分期显著相关，作为肺癌的诊断标志物具有较高的准确性，LINC01963过表达抑制了肺癌细胞增殖、迁移、侵袭和管形成，促进了肺癌细胞的凋亡，因此可以成为肺癌基因治疗的重要靶点。的重要靶点。的重要靶点。

【技术实现步骤摘要】
长非编码RNALINC01963作为肺癌肿瘤标志物及治疗靶点


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体属于分子生物学
，尤其涉及长非编码RNA LINC01963作为肺癌肿瘤标志物及治疗靶点的应用。

技术介绍

[0002]肺癌被认为是全球男性癌症相关死亡率的第一大原因，女性死亡率的第四大原因。2018年全球癌症统计数据显示，肺癌新发病例2093876例，死亡1761007例，占新发癌症病例的11.6%和癌症相关死亡病例的18.4%。近年来，尽管在化疗、放疗、手术、免疫治疗和靶向治疗等方面取得了很大的努力，但预后不良伴有耐药和复发的情况仍屡见不鲜。由于65% 的肺癌病例在初次诊断时被归类为中晚期，导致患者5年生存率只有4
‑
17%。因此，提高肺癌的早期诊断率和改进肺癌的治疗手段是目前亟待解决的问题。
[0003]长链非编码RNA（lncRNA），长度超过200个核苷酸，是一组缺乏编码蛋白质能力的RNA，过去被认为是无用的“暗物质”或“转录噪声”。然而，越来越多的证据逐渐揭示了 lncRNA 在包括生理和病理在内的多个生物过程中的重要作用。值得注意的是，lncRNA 的异常表达在包括 肺癌在内的多种恶性肿瘤的发展中发挥重要作用，并且是肺癌诊断和预后的有潜力的生物标志物。LINC01963是一种新出现的lncRNA，被认为是口腔和口咽鳞状细胞癌的潜在预后指标。然而，LINC01963在肺癌中的作用至今仍不清楚。

技术实现思路

[0004]本专利技术涉及一种肺癌的诊断标志物，所述诊断标志物为长非编码RNA LINC01963。
[0005]进一步的，所述LINC01963在肺癌中低表达，所述低表达的范围是正常细胞的0.2
‑
0.8倍。
[0006]本专利技术还提供了一种用于诊断肺癌的试剂盒，所述试剂盒包括检测LINC01963表达水平的试剂。
[0007]进一步的，所述试剂为特异性扩增LINC01963的引物。
[0008]进一步的，所述特异性扩增LINC01963的引物序列为： LINC01963，F：5
’‑
CCCGGTGTAGGGTAAATGCA
‑3’ꢀ
and R：5
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ATTGGCCACTCCCGGATTTT
‑3’
；GAPDH，F：5
’‑ꢀ
CTGGGCTACACTGAGCACC
‑3’ꢀ
and R：5
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AAGTGGTCGTTGAGGGCAATG
‑3’
。
[0009]本专利技术还提供了一种治疗肺癌的药物组合物，所述药物组合物含有LINC01963。
[0010]进一步的，所述药物组合物为含有LINC01963的质粒。
[0011]本专利技术的主要有益效果在于：1、本专利技术提供了长非编码RNA LINC01963作为肺癌肿瘤标志物及治疗靶点；2、长非编码RNA LINC01963在肺癌患者中低表达，低表达范围是正常细胞的0.2
‑
0.8倍，其表达与患者淋巴结转移和临床分期显著相关，作为肺癌的诊断标志物具有较高的准确性；3、LINC01963过表达抑制了肺癌细胞增殖、迁移、侵袭和管形成，促进了肺癌细胞
的凋亡，因此可以成为肺癌基因治疗的重要靶点。
附图说明
[0012]图1：LINC01963在肺癌中低表达并且可以充当肺癌的诊断生物标志物；图2：LINC01963的表达对肺癌细胞的克隆形成和迁移的影响；图3：LINC01963的表达对肺癌细胞的侵袭和凋亡的影响；图4：LINC01963的表达对肺癌细胞的血管生成的影响附图标记。
具体实施方式
[0013]以下将结合本专利技术的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述和讨论，显然，这里所描述的仅仅是本专利技术的一部分实例，并不是全部的实例，基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术的保护范围。
[0014]为了便于对本专利技术实施例的理解，下面将结合附图以具体实施例为例作进一步的解释说明，且各个实施例不构成对本专利技术实施例的限定。
[0015]本专利技术的实施例1，LINC01963是肺癌的潜在诊断生物标志物。
[0016]（1）、LINC01963在肺癌患者中低表达：来自癌症基因组图谱 (TGCA) 数据库的数据通过基因表达谱交互分析 (GEPIA; http://gepia.cancer
‑
pku.cn/)，以显示正常组织 (n = 59) 和肺腺癌组织(n = 483)之间LINC01963的差异表达。结果如图1A所示，LINC01963在肺腺癌中的表达显著低于正常对照。
[0017]肺癌组织和癌旁组织取自 2019 年 5 月至 2021 年 7 月确诊的 80 名患者。血清样本来自上述肺癌患者和 80 名健康志愿者。所有患者均签署知情同意书，并同意将其组织用于临床研究。 临床试验方案经第一作者医院伦理委员会（20190430095）审核通过。用匀浆器研磨组织，然后使用 Trizol 试剂从中提取总 RNA。 使用 High
‑
Capacity cDNA 反转录试剂盒(4368813, 赛默飞, 美国) 合成 cDNA。 然后通过 PowerUp
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SYBR
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Green Master Mix（A25743，赛默飞，美国）进行实时定量 PCR。条件如下：95
°
C 预变性 2 分钟，然后是 95
°
C 15 秒和 60
°
C 1 分钟，共40 个循环。 引物序列见表1。GAPDH为内源对照，数据采用2
‑
ΔΔCT
法定量。结果如图1B所示，LINC01963在肺癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织中的表达水平。
[0018]按照实施案例1（1）中的方法对收集的肺癌患者和健康志愿者的血清样本进行QRT
‑
PCR，结果如图1C所示，LINC01963在83.75%（80个配对中的67个）肺癌患者血清中下调。
[0019]（2）、LINC01963与临床病理特征的关系通过分析LINC01963的表达和患者的临床病理特征的关系（表2），得到LINC01963 表达与年龄（p = 0.621）、吸烟（p = 0.094）、分化状态（p = 0.217）和分级（p = 0.078）无显着相关，而与淋巴结转移（p = 0.003）和 临床分期 (p = 0.005) 显著相关。
[0020]绘制ROC曲线以评估血清LINC01963的诊断价值，结果如图1D所示，LINC01963的ROC曲线下面积为0.8156（95% CI 0.7492
‑
0.8821），表明LINC01963是一个很好的肺癌诊断标志本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肺癌的诊断标志物，其特征在于：所述诊断标志物为长非编码RNA LINC01963。2.根据权利要求1所述的一种肺癌的诊断标志物，其特征在于：所述LINC01963在肺癌中低表达，所述低表达的范围是正常细胞的0.2
‑
0.8倍。3.一种用于诊断肺癌的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括检测LINC01963表达水平的试剂。4.根据权利要求3所述的一种用于诊断肺癌的试剂盒，其特征在于：所述试剂为特异性扩增LINC01963的引物。5.根据权利要求4所述的一种用于诊断肺癌的试剂盒，其特征在于，所述特异性扩增LINC01963的引物序列为：LINC01963，F：5
’‑
CCCGG...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹卓，潘炯伟，叶再挺，蔡晓平，尹章勇，徐存来，
申请(专利权)人：浙江百越生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：