一种生物降解及转化有机污染物的方法技术

本发明专利技术公开了一种生物降解及转化有机污染物的方法，包括以下步骤：将白腐真菌Phanerochaete sordida YK

【技术实现步骤摘要】
一种生物降解及转化有机污染物的方法


[0001]本专利技术涉及微生物降解领域，具体涉及一种生物降解及转化有机污染物的方法。

技术介绍

[0002]4,4
’‑
二羟基二苯甲酮(4,4
’‑
dihydroxybenzophenone)是一种重要的工业添加剂，多被用于生产具备防晒作用的产品(例如化妆品，个人护理产品，产品外包装等)，因其稳定的化学结构，很难在环境中自然降解，不断蓄积，对生态和生物体健康存在潜在危害。常用的处理有机污染物的方法是物理化学方法，但是处理过程中易对环境造成二次污染。白腐真菌因其强降解能力和降解广谱性，被广泛应用于有机污染物的生物降解研究，但是目前却并没有关于针对4,4
’‑
二羟基二苯甲酮的降解及其代谢产物的制备方案。

技术实现思路

[0003]针对现有技术中存在的问题，本专利技术的目的是提供一种生物降解及转化有机污染物的方法。
[0004]本专利技术的目的采用以下技术方案来实现：
[0005]一种生物降解及转化有机污染物的方法，包括以下步骤：
[0006]步骤1，将白腐真菌Phanerochaete sordida YK
‑
624接种至固体培养基进行传代培养；
[0007]步骤2，将传代培养后的白腐真菌Phanerochaete sordida YK
‑
624接种至液体培养基继续培养；
[0008]步骤3，向液体培养基中加入4,4
’‑
二羟基二苯甲酮进行生物制备，静置培养；
[0009]步骤4，将生物制备后的菌体与培养液分离，将分离后的培养液浓缩至原液体培养基体积1/10左右，加入等体积的有机溶剂进行萃取，得到有机相萃取液；
[0010]步骤5，对有机相萃取液进行浓缩至干，并用进行梯度洗脱，应用进行产物跟踪；
[0011]步骤6，将步骤(5)得到的产物再次进一步分离纯化，即得到高纯度的4
‑
羟苯甲酸
‑4‑
羟基苯酯。
[0012]优选地，所述步骤1中，固体培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)，马铃薯葡萄糖琼脂培养基的体积为1L，成分包括：淀粉4g、葡萄糖20g、琼脂15g、加水至1L。
[0013]优选地，所述步骤1中，传代培养至菌丝体长满平板，整个过程持续时间为3天。
[0014]优选地，所述步骤2中，液体培养基为马铃薯葡萄糖液体培养基(PDB)，马铃薯葡萄糖液体培养基的体积为1L，成分包括：淀粉4g、葡萄糖20g、加水至1L。
[0015]优选地，所述步骤2中，在液体培养基继续培养的时间为3天。
[0016]优选地，所述步骤3中，4,4
’‑
二羟基二苯甲酮加入至液体培养基后至浓度为0.5mmol/L。
[0017]优选地，所述步骤3中，静置培养的温度为30℃，时间为7天。
[0018]优选地，所述步骤4中，浓缩处理为旋蒸浓缩，浓缩至体积为400
‑
500mL。
[0019]优选地，所述步骤4中，有机溶剂为乙酸乙酯，萃取的次数为2
‑
3次。
[0020]优选地，所述步骤5中，浓缩为旋蒸浓缩，梯度洗脱使用的是硅胶柱色谱法，产物跟踪使用的是薄层色谱法。
[0021]优选地，所述步骤5中，梯度洗脱的洗脱液为正己烷、乙酸乙酯、甲醇的一种或多种混合物。
[0022]优选地，所述步骤6中，色谱制备柱型号为：Develosil InertSustain C30，5m，20
×
250nm。
[0023]本专利技术的有益效果为：
[0024]本专利技术提供了一种利用白腐真菌对4,4
’‑
二羟基二苯甲酮的生物降解从而制备转化为4
‑
羟苯甲酸
‑4‑
羟基苯酯的生物制备方法。利用具备高降解性能的白腐真菌对有机污染物4,4
’‑
二羟基二苯甲酮进行生物降解的同时，收集其代谢产物4
‑
羟苯甲酸
‑4‑
羟基苯酯。首先，该生物降解及制备使用的是白腐真菌，该微生物具备生长繁殖快，受营养条件的限制小，从而一定程度上减少了微生物的培养成本，为今后的工业应用奠定了基础；其次，白腐真菌在降解有机污染物4,4
’‑
二羟基二苯甲酮的同时，生成了代谢产物4
‑
羟苯甲酸
‑4‑
羟基苯酯，这不仅可以应用于有机物污染物的生物去除，还能够用于4
‑
羟苯甲酸
‑4‑
羟基苯酯的生物制备领域。
附图说明
[0025]利用附图对本专利技术作进一步说明，但附图中的实施例不构成对本专利技术的任何限制，对于本领域的普通技术人员，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据以下附图获得其它的附图。
[0026]图1是实施例2中纯化后的化合物的MS图；
[0027]图2是实施例2中纯化后的化合物在CD3OD中的氢谱图的NMR图；
[0028]图3是4
‑
羟苯甲酸
‑4‑
羟基苯酯标准品的NMR图。
具体实施方式
[0029]为了更清楚的说明本专利技术，对本专利技术的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现对本专利技术的技术方案进行以下详细说明，但不能理解为对本专利技术的可实施范围的限定。
[0030]其中，4,4
’‑
二羟基二苯甲酮(降解物)(分子式：C
13
H
10
O3，分子量：214.22，英文命名：4,4
’‑
dihydroxybenzophenone(DHBP))结构式为：
[0031][0032]其中，4
‑
羟苯甲酸
‑4‑
羟基苯酯(生成物)(分子式：C
13
H
10
O4，分子量：230.22，英文命名：4
‑
hydroxyphenyl 4
‑
hydroxybenzoate)结构式为：
[0033][0034]结合以下实施例对本专利技术作进一步描述。
[0035]实施例1
[0036]一种使用白腐真菌生物降解4,4
’‑
二羟基二苯甲酮的方法，包括以下步骤：
[0037](1)将白腐真菌Phanerochaete sordida YK
‑
624用PDA培养基进行传代扩大培养，4℃冰箱内保存备用；
[0038](2)将已经在PDA培养3天的Phanerochaete sordida YK
‑
624接种至PDB培养基中，继续培养3天；
[0039](3)将液体培养后的白腐真菌中加入4,4
’‑
二羟基二苯甲酮(培养液中4,4
’‑
二羟基二苯甲本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生物降解及转化有机污染物的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，将白腐真菌Phanerochaete sordida YK
‑
624接种至固体培养基进行传代培养；步骤2，将传代培养后的白腐真菌Phanerochaete sordida YK
‑
624接种至液体培养基继续培养；步骤3，向液体培养基中加入4,4
’‑
二羟基二苯甲酮进行生物制备，静置培养；步骤4，将生物制备后的菌体与培养液分离，将分离后的培养液浓缩处理后，加入等体积的有机溶剂进行萃取，得到有机相萃取液；步骤5，对有机相萃取液进行浓缩处理后，进行梯度洗脱与产物跟踪；步骤6，再次进一步分离纯化，即得到4
‑
羟苯甲酸
‑4‑
羟基苯酯。2.根据权利要求1所述的一种生物降解及转化有机污染物的方法，其特征在于，所述步骤1中，固体培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)，马铃薯葡萄糖琼脂培养基的成分包括：淀粉4g、葡萄糖20g、琼脂15g以及加水至1L。3.根据权利要求1所述的一种生物降解及转化有机污染物的方法，其特征在于，所述步骤1中，传代培养至菌丝体长满平板，整个过程持续时间为3天。4.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王剑桥，张雪，殷茹，
申请(专利权)人：广州大学，
类型：发明
国别省市：