适用于MassARRAY质谱平台Iplex分析的肺癌相关基因的突变检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种适用于MassARRAY质谱平台Iplex分析的肺癌相关基因的突变检测试剂盒，可用于检测肺癌相关的多达九个基因突变，包括ALK、EGFR、BRAF、MET、ERBB2、KRAS、NRAS、PIK3CA和PTEN，69个位点共计186种基因型。通过对基因的检测实现对肺癌的准确检测，为健康产业做出突出贡献。业做出突出贡献。

【技术实现步骤摘要】
适用于MassARRAY质谱平台Iplex分析的肺癌相关基因的突变检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及一种生物
，特别是涉及一种适用于MassARRAY质谱平台Iplex分析的肺癌相关基因的突变检测试剂盒。

技术介绍

[0002]肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高，男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位，女性发病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌有不同的组织学类型，如鳞癌、腺癌等。此外，肿瘤有不同的发展时期，如早期、中期、晚期。更重要的是，肺癌有不同的驱动基因，而每个驱动基因代表不同的肿瘤生物学行为(包括肿瘤的生长方式、扩散转移等)。调查发现，60％—70％的肺癌患者确诊时即为晚期。如果确诊时就为晚期肺癌，这时患者已经丧失手术或放射治疗的机会。这种病人在以前只能做化疗，而现在事实表明，化疗如果不加以选择，效果并不是很好，因为肺癌不是一种疾病，而是由不同致病基因组成的一组疾病。因此，晚期肺癌患者需要做基因检测，清楚自己是哪种驱动基因引起的肺癌，例如有没有EGFR基因突变、ALK融合基因突变、ROS1融合基因突变等。等到明确肺癌的分子病理特征后，再进行针对性治疗，这时的疗效将非常好。
[0003]总而言之，现在治疗肺癌，尤其晚期肺癌，不但要清楚是什么组织类型的肺癌，还要清楚肺癌的分子病理特征，这时基因检测就尤为重要。
[0004]目前，关于肺癌的基因检测研究还并不深入。

技术实现思路

[0005]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种适用于MassARRAY质谱平台Iplex分析的肺癌相关基因的突变检测试剂盒，用于解决现有技术中缺乏有效的关于肺癌的基因检测的问题。
[0006]本专利技术可适用于MassARRAY质谱平台Iplex分析的肺癌相关九个基因，基因包括ALK、EGFR、BRAF、MET、ERBB2、KRAS、NRAS、PIK3CA、和PTEN。所述检测试剂盒针对的位点如表1。
[0007]表1检测位点
[0008][0009][0010][0011]本专利技术一方面提供了用于检测肺癌的检测试剂，所述检测试剂包括ALK基因突变检测引物组、EGFR基因突变检测引物组、BRAF基因突变检测引物组、MET基因突变检测引物组、ERBB2基因突变检测引物组、KRAS基因突变检测引物组、NRAS基因突变检测引物组、PIK3CA基因突变检测引物组、和PTEN基因突变检测引物组中任一种或几种；所述ALK基因突
变检测引物组包括基因ALK扩展引物和延伸引物，所述EGFR基因突变检测引物组包括基因EGFR扩展引物和延伸引物，所述BRAF基因突变检测引物组包括基因BRAF扩展引物和延伸引物，所述MET基因突变检测引物组包括基因MET扩展引物和延伸引物，所述ERBB2基因突变检测引物组包括基因ERBB2扩展引物和延伸引物，所述KRAS基因突变检测引物组包括基因KRAS扩展引物和延伸引物，所述NRAS基因突变检测引物组包括基因NRAS扩展引物和延伸引物，所述PIK3CA基因突变检测引物组包括基因PIK3CA扩展引物和延伸引物，所述PTEN基因突变检测引物组包括基因PTEN扩展引物和延伸引物。
[0012]进一步地，所述几种可以是两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种或九种。
[0013]进一步地，所述扩展引物选自以下任一组或几组：
[0014](1)SEQID NO.1
‑
SEQ IDNO.4；(2)SEQID NO.5
‑
SEQ IDNO.6；(3)SEQID NO.7
‑
SEQ IDNO.8；(4)SEQID NO.9
‑
SEQ IDNO.14；(5)SEQID NO.15
‑
SEQ IDNO.20；(6)SEQID NO.21
‑
SEQ IDNO.26；(7)SEQID NO.27
‑
SEQ IDNO.36；(8)SEQID NO.37
‑
SEQ IDNO.46；(9)SEQID NO.47
‑
SEQ IDNO.50；(10)SEQID NO.51
‑
SEQ IDNO.56；(11)SEQID NO.57
‑
SEQ IDNO.64；
[0015]所述延伸引物选自以下任一组或几组：
[0016](12)SEQID NO.65
‑
SEQ IDNO.71；(13)SEQID NO.72
‑
SEQ IDNO.79；(14)SEQID NO.80
‑
SEQ IDNO.88；(15)SEQID NO.89
‑
SEQ IDNO.95；(16)SEQID NO.96
‑
SEQ IDNO.103；(17)SEQID NO.104
‑
SEQ IDNO.111；(18)SEQID NO.112
‑
SEQ IDNO.118；(19)SEQID NO.119
‑
SEQ IDNO.125；(20)SEQID NO.126
‑
SEQ IDNO.128；(21)SEQID NO.129
‑
SEQ IDNO.135；(22)SEQID NO.136
‑
SEQ IDNO.142。
[0017]10、其中，(1)所述ALK基因突变检测引物组中，基因ALK扩展引物序列如SEQID NO.21、22、23、24、27、28、29、30所示，延伸引物序列如SEQID NO.104、105、106、107、109、110、111、112、113、114、118所示；(2)所述EGFR基因突变检测引物组中，基因EGFR扩展引物序列如SEQID NO.7、8、9、10、11、12、15、16、17、18所示，延伸引物序列如SEQID NO.80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、94、96、97、98、99、100所示；(3)所述BRAF基因突变检测引物组中，基因BRAF扩展引物序列如SEQID NO.31、32、33、34所示，延伸引物序列如SEQID NO.116、117所示；(4)所述MET基因突变检测引物组中，基因MET扩展引物序列如SEQID NO.35、36、51、52所示，延伸引物序列如SEQID NO.115、130、135所示；(5)所述ERBB2基因突变检测引物组中，基因ERBB2扩展引物序列如SEQID NO.13、14所示，延伸引物序列如SEQID NO.93、95所示；(6)所述KRAS基因突变检测引物组中，基因KRAS扩展引物序列如SEQID NO.1、2、3、4、5、6、19、20、57、58所示，延伸引物序列如SEQID NO.65、66、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种适用于肺癌的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括ALK基因突变检测引物组、EGFR基因突变检测引物组、BRAF基因突变检测引物组、MET基因突变检测引物组、ERBB2基因突变检测引物组、KRAS基因突变检测引物组、NRAS基因突变检测引物组、PIK3CA基因突变检测引物组和PTEN基因突变检测引物组中任一种或几种；所述ALK基因突变检测引物组包括基因ALK扩展引物和延伸引物，所述EGFR基因突变检测引物组包括基因EGFR扩展引物和延伸引物，所述BRAF基因突变检测引物组包括基因BRAF扩展引物和延伸引物，所述MET基因突变检测引物组包括基因MET扩展引物和延伸引物，所述ERBB2基因突变检测引物组包括基因ERBB2扩展引物和延伸引物，所述KRAS基因突变检测引物组包括基因KRAS扩展引物和延伸引物，所述NRAS基因突变检测引物组包括基因NRAS扩展引物和延伸引物，所述PIK3CA基因突变检测引物组包括基因PIK3CA扩展引物和延伸引物，所述PTEN基因突变检测引物组包括基因PTEN扩展引物和延伸引物。2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，包括以下特征的任一项或多项：(1)所述ALK基因突变检测引物组中，基因ALK扩展引物序列如SEQ ID NO.21、22、23、24、27、28、29、30所示，延伸引物序列如SEQ ID NO.104、105、106、107、109、110、111、112、113、114、118所示；(2)所述EGFR基因突变检测引物组中，基因EGFR扩展引物序列如SEQ ID NO.7、8、9、10、11、12、15、16、17、18所示，延伸引物序列如SEQ ID NO.80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、94、96、97、98、99、100所示；(3)所述BRAF基因突变检测引物组中，基因BRAF扩展引物序列如SEQ ID NO.31、32、33、34所示，延伸引物序列如SEQ ID NO.116、117所示；(4)所述MET基因突变检测引物组中，基因MET扩展引物序列如SEQ ID NO.35、36、51、52所示，延伸引物序列如SEQ ID NO.115、130、135所示；(5)所述ERBB2基因突变检测引物组中，基因ERBB2扩展引物序列如SEQ ID NO.13、14所示，延伸引物序列如SEQ ID NO.93、95所示；(6)所述KRAS基因突变检测引物组中，基因KRAS扩展引物序列如SEQ ID NO.1、2、3、4、5、6、19、20、57、58所示，延伸引物序列如SEQ ID NO.65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、101、102、103、137、138、140所示；(7)所述NRAS基因突变检测引物组中，基因NRAS扩展引物序列如SEQ ID NO.37、38、47、48、49、50、55、56所示，延伸引物序列如SEQ ID NO.124、126、127、128、131、133所示；(8)所述PIK3CA基因突变检测引物组中，基因PIK3CA扩展引物序列如SEQ ID NO.25、26、41、42、43、44、45、46、53、54、59、60、61、62、63、64所示，延伸引物序列如SEQ ID NO.108、120、121、122、123、125、129、132、134、136、139、141、142所示；(9)所述PTEN基因突变检测引物组中，基因PTEN扩展引物序列如SEQ ID NO.39、40所示，延伸引物序列如SEQ ID NO.119所示。3.根据权利要求2所述的检测试剂，其特征在于，所述扩展引物和延伸引物分别组合形成11组,分别为：组合1：SEQ ID NO.1
‑
SEQ ID NO....

【专利技术属性】
技术研发人员：何逖，吴帅来，姚浩，
申请(专利权)人：上海吉凯医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：