一种食品脂肪成分体外动态消化及益生评价的方法技术

本发明专利技术公开了一种食品脂肪成分体外动态消化及益生评价的方法，属于体外消化及生物技术领域。本发明专利技术的体外仿生动态消化是通过采集新鲜粪便并移植肠道菌群的方式较完整的将人类肠道菌群介入到含食品脂肪成分的模拟肠消化培养基中，以模仿人类的体内消化过程。本发明专利技术的仿生动态消化低损失的实现了肠道菌群的移植，基本还原了肠道菌群的菌群结构。本发明专利技术中仿生动态消化不仅较好的模拟了人体正常的消化过程，同时通过系统分析消化后的代谢产物以及产物对肠道菌群的影响(尤其反应在益生菌和有害菌的丰度水平上)可以直观的评价食品脂肪成分的益生效果。肪成分的益生效果。肪成分的益生效果。

【技术实现步骤摘要】
一种食品脂肪成分体外动态消化及益生评价的方法


[0001]本专利技术涉及一种食品脂肪成分体外动态消化及益生评价的方法，属于体外消化及生物


技术介绍

[0002]脂质作为一类低溶于水而高溶于非极性溶剂的生物有机分子，因其外的一圈疏水层使脂肪成分不能溶于水中，其次其密度较小总是呈乳状液滴悬浮在培养基的表面，难以在体外发酵中被肠道菌群利用。
[0003]目前，针对上述两点的解决方案主要是，采用表面活性剂、搅拌、采用酶处理等方法。
[0004]但是，因为油脂的密度小于水，即使使用了表面活性剂，其油脂成分仍然浮在表面，难以被利用。吐温
‑
80是实验室常用的乳化剂，在人体中它与血栓、中风、心脏病、心力衰竭、肿瘤生长或某些癌症患者复发的风险增加有因果关系。在实验室种吐温
‑
80对菌群有抑制作用，尤其在肠道菌群中，不同的菌对吐温
‑
80的敏感度不同，可能导致菌群的定向选择。通过搅拌菌群可以和油脂较好的接触，然而由于搅拌带来的剪切力，一定程度上也会破坏菌群。通过酶处理后的油脂，无法证实是否被菌群利用。而目前验证菌群是否可以对油脂进行有效利用主要是靠体外发酵。
[0005]油脂与人类的健康息息相关，人类每天会进食约50～60g的脂质成分或是服用一些由脂质为主要成分的药品。通过体外静态发酵能够了解某种摄入的油脂对肠道菌群是否有增强或者破坏菌群丰度的作用。食品中常见的如：菜籽油、花生油、鱼油。药品中如：胆酸类，固醇类。
[0006]但即使解决了上述难点，但大部分的肠道菌群为严格厌氧，少部分表现为兼性厌氧，且结肠段始终呈现碱性的动态平衡，而体外培养过程中，肠道菌群不断产酸，导致pH不断的降低。静态培养如厌氧管，不能对pH加以控制这将极大的破坏肠道菌群。
[0007]因此，如何使得脂质成分分散到培养基中，而被菌群利用，并且能够动态调控整个培养环境更真实的模拟肠道环境成了关键。另外，在肠道菌群摄食了食用油脂后，如何系统的反应油脂对肠道菌群的作用，如何评价食用油脂的益生效果也亟待阐明。

技术实现思路

[0008]本专利技术提供了一种提高油脂溶解度的体外仿生培养基，所述培养基包括淀粉、阿拉伯半乳糖、果胶、木聚糖、酵母提取物、胰蛋白胨、酪蛋白、粘蛋白、胆汁盐、复合溶解剂。
[0009]在本专利技术的一种实施方式中，所述复合溶解剂为：玉米醇溶蛋白、热凝胶、单硬脂酸甘油酯中的一种或多种。
[0010]在本专利技术的一种实施方式中，所述培养基包括淀粉3.0～8.0g
·
L、阿拉伯半乳糖0.1～3.0 g
·
L
‑1、果胶0.5～4.0g
·
L
‑1、木聚糖0.1～3.0g
·
L
‑1、酵母提取物1.0～5.0g
·
L
‑1、胰蛋白胨0.1 ～3.0g
·
L
‑1、酪蛋白0.5～4.0g
·
L
‑1、粘蛋白0.5～4.0g
·
L
‑1、胆汁盐0.02
～1.5g
·
L
‑1；所述复合溶解剂的添加量与油脂添加量的比例为(0.5：4)～(2.5：4)。
[0011]在本专利技术的一种实施方式中，复合溶解剂的添加量与油脂添加量的比例为1：4。
[0012]在本专利技术的一种实施方式中，所述复合溶解剂为：玉米醇溶蛋白和热凝胶；其中，玉米醇溶蛋白与热凝胶的比例为(0.6：3)～(1：2)。
[0013]在本专利技术的一种实施方式中，所述玉米醇溶蛋白与热凝胶的比例为1：3。
[0014]本专利技术还提供了一种提高油脂在培养基中的溶解度的方法，所述方法包括以下步骤：
[0015](1)将玉米醇溶蛋白同热凝胶混合后制成壁材，将壁材同油脂混合，并均质成含油脂乳液；
[0016](2)将步骤(1)得到的含油脂乳液添加到上述培养基中。
[0017]在本专利技术的一种实施方式中，所述玉米醇溶蛋白与热凝胶的比例为(0.6：3)～(1：2)。
[0018]在本专利技术的一种实施方式中，所述玉米醇溶蛋白与热凝胶的比例为1：3。
[0019]在本专利技术的一种实施方式中，所述壁材与油脂添加量的比例为0.5：4～2.5：4。
[0020]在本专利技术的一种实施方式中，复合溶解剂的添加量与油脂添加量的比例为1：4。
[0021]本专利技术还提供了一种食品脂肪成分体外动态消化及益生评价的方法，所述方法包括以下步骤：
[0022](1)将醇溶蛋白同热凝胶混合制成壁材，将壁材同油脂混合并均质成含油脂乳液；
[0023](2)将步骤(1)得到的含油脂乳液添加到上述不添加复合溶解剂的培养基中；
[0024](3)采集健康人类的粪便，并制成粪菌悬液，将粪菌悬液接种到步骤(2)得到的培养基中；
[0025](4)将接种完毕后的培养基置入到肠道反应器中，进行体外动态发酵；分别在0、24、 48h采集10mL发酵液以供系统的进行益生分析。
[0026]在本专利技术的一种实施方式中，步骤(2)中，所述粪菌悬液的制备方法为：步骤(2)中，所述粪菌悬液的制备方法为：称取新鲜的粪便按1：2比例添加磷酸缓冲液，用四层纱布过滤后得粪菌悬液。
[0027]在本专利技术的一种实施方式中，步骤(2)中，所述粪菌悬液在培养基中的添加量为：10％ (v/v)。
[0028]在本专利技术的一种实施方式中，所述的肠道反应器pH应控制在6.5～7.5，蠕动频率为11～20 次
·
min
‑1。
[0029]在本专利技术的一种实施方式中，所述的系统益生分析方法包括，分光光度法肠道菌群的整体生长情况，基于16s rRNA的益生菌、有害菌的相对丰度，短链脂肪酸(SCFAs)检测等。
[0030]有益效果
[0031](1)本专利技术提供了一种提高油脂在培养基中的溶解度的方法，采用本专利技术的方法，能够将油脂很好的溶解在培养基中，提高了菌株对油脂的利用率。
[0032](2)本专利技术提供了应用上述一种食品脂肪成分体外动态消化及益生评价的方法可以对食品脂肪成分进行体外动态消化并得到益生评价；本专利技术采用动态消化的方法，能够实现厌氧环境下进行动态培养，因此，本专利技术的方法较真实反应的体内状况。本专利技术的的方
法能够广泛的应用于食品安全和药品安全中。
附图说明
[0033]图1：肠道反应器示意图。
[0034]图2：几种实施案例的物种多样性分析(OTU)聚类和物种注释韦恩图。
具体实施方式
[0035]下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步地阐述。
[0036]下述实施例中所涉及的橄榄油、玉米醇溶蛋白、热凝胶购自国药集团。
[0037]下述实施例中所涉及的检测方法如下：
[0038]益生特性的检验
[0039]每4h从肠道反应器中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高油脂溶解度的体外仿生培养基，其特征在于，所述培养基的成分包括淀粉、阿拉伯半乳糖、果胶、木聚糖、酵母提取物、胰蛋白胨、酪蛋白、粘蛋白、胆汁盐、复合溶解剂。2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述复合溶解剂为：玉米醇溶蛋白、热凝胶、单硬脂酸甘油酯中的一种或多种。3.如权利要求1或2所述的培养基，其特征在于，所述培养基的成分包括淀粉3.0～8.0g
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L，阿拉伯半乳糖0.1～3.0g
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L
‑1，果胶0.5～4.0g
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L
‑1，木聚糖0.1～3.0g
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L
‑1，酵母提取物1.0～5.0g
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L
‑1，胰蛋白胨0.1～3.0g
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L
‑1，酪蛋白0.5～4.0g
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L
‑1，粘蛋白0.5～4.0g
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L
‑1，胆汁盐0.02～1.5g
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L
‑1；所述复合溶解剂的添加量与油脂添加量的比例为(0.5：4)～(2.5：4)。4.如权利要求3所述的培养基，其特征在于，所述复合溶解剂为：玉米醇溶蛋白和热凝胶；其中，玉米醇溶蛋白与热凝胶的比例为(0.6：3)～(1：2)。5.一种提高油脂在培养基中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹晓北，朱凌，李志涛，朱莉，高敏杰，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：