一种棘胸蛙多肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种棘胸蛙多肽的制备方法及应用，其中，棘胸蛙多肽的制备方法，包括：将棘胸蛙粉末浸泡于石油醚脱脂处理，得到脱脂棘胸蛙粉末；向脱脂棘胸蛙粉末加水，混匀，调pH和温度，加入木瓜蛋白酶酶解4h，灭酶，离心取上清，冷冻干燥，得到棘胸蛙多肽。由此，可获得具有抗氧化能力的棘胸蛙多肽，可实现棘胸蛙高附加值的综合利用。加值的综合利用。

【技术实现步骤摘要】
一种棘胸蛙多肽及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物医学
，具体涉及一种棘胸蛙多肽及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]棘胸蛙，隶属蛙科、棘蛙属，俗称石蛙、石鸡等，因其肉质细腻且富含丰富的蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸和葡萄糖，以及钙、磷、铁和多种维生素，被美食家称为“百蛙之王”，具有滋补强身、清心润肺、健肝胃、补虚损，以及解热毒、治疳疾等功效。
[0003]近年来关于棘胸蛙种群分布、生态习性、繁殖行为、人工养殖、防病害、营养成分等研究报道较多，尚缺乏对其生物活性的系统研究。

技术实现思路

[0004]为解决上述问题，本专利技术的实施例提出了一种棘胸蛙多肽的制备方法，其包括以下步骤：
[0005]将棘胸蛙粉末浸泡于石油醚脱脂处理，得到脱脂棘胸蛙粉末；
[0006]向脱脂棘胸蛙粉末加水，混匀，调pH和温度，加入木瓜蛋白酶酶解4h，灭酶，离心取上清，冷冻干燥，得到棘胸蛙多肽。
[0007]根据本专利技术实施例的一种棘胸蛙多肽的制备方法，该方法将棘胸蛙粉末经石油醚脱脂后，再用木瓜蛋白酶酶解处理，可获得具有抗氧化能力的棘胸蛙多肽。
[0008]可选地，还包括：将所述棘胸蛙多肽经葡聚糖凝胶SephadexG
‑
50柱层析分离后，再经葡聚糖凝胶SephadexG
‑
15柱层析分离。由此，将棘胸蛙多肽经葡聚糖凝胶SephadexG
‑
50柱层析和葡聚糖凝胶SephadexG
‑
15柱层析纯化后，可提高棘胸蛙多肽的抗氧化能力。
[0009]可选地，棘胸蛙粉末与石油醚的料液比为1:4。
[0010]可选地，将棘胸蛙粉末浸泡于石油醚脱脂处理48h，每隔8h换一次石油醚溶液，37℃烘干，得到脱脂棘胸蛙粉末。
[0011]可选地，脱脂棘胸蛙粉末与水的料液比为1:40。
[0012]可选地，木瓜蛋白酶的加入量为1％。
[0013]可选地，取棘胸蛙多肽用超纯水配制浓度为50～100mg/mL的溶液，经过葡聚糖凝胶SephadexG
‑
50柱层析分离，上样体积：3mL，流速0.3mL/min，每管3mL，用超纯水进行洗脱3～5个柱体积，根据220nm下的吸光度曲线收集洗脱组分，收集吸光度值较高的组分，分别测定DPPH自由基清除率IC
50
；取经葡聚糖凝胶SephadexG
‑
50纯化出的DPPH自由基清除率IC
50
较低的组分，用超纯水配成浓度为25～50mg/mL的溶液，经过葡聚糖凝胶SephadexG
‑
15柱层析分离，上样体积：3mL，流速0.3mL/min，每管3mL，用超纯水进行洗脱3～5个柱体积，根据220nm下的吸光度曲线收集洗脱组分，收集吸光度值较高的组分，分别测定DPPH自由基清除率IC
50
。
[0014]根据本专利技术的实施例，本专利技术还提出上述的制备方法制得的棘胸蛙多肽。该棘胸蛙多肽具有较好的抗氧化能力，可实现棘胸蛙高附加值的综合利用。
[0015]根据本专利技术的实施例，本专利技术还提出上述的棘胸蛙多肽在制备抗氧化剂中的应用，以实现棘胸蛙高附加值的综合利用。
[0016]本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。
附图说明
[0017]图1为根据本专利技术实施例的VC的DPPH自由基清除率；
[0018]图2为根据本专利技术实施例的棘胸蛙酶解产物的DPPH自由基清除率；
[0019]图3为根据本专利技术实施例的VC的吸光度值；
[0020]图4为根据本专利技术实施例的棘胸蛙酶解产物的吸光度值；
[0021]图5为根据本专利技术实施例的棘胸蛙木瓜蛋白酶酶解产物SephadexG
‑
50纯化后的吸光度值；
[0022]图6为根据本专利技术实施例的棘胸蛙木瓜蛋白酶酶解产物SephadexG
‑
15纯化后的吸光度值。
具体实施方式
[0023]以下通过特定的具体实例说明本专利技术的技术方案。应理解，本专利技术提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以插入其他方法步骤；还应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。而且，除非另有说明，各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤的便利工具，而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本专利技术可实施的范围，其相对关系的改变或调整，在无实质变更
技术实现思路
的情况下，当亦视为本专利技术可实施的范畴。
[0024]为了更好的理解上述技术方案，下面更详细地描述本专利技术的示例性实施例。虽然显示了本专利技术的示例性实施例，然而应当理解，可以以各种形式实现本专利技术而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本专利技术，并且能够将本专利技术的范围完整的传达给本领域的技术人员。
[0025]本专利技术采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。
[0026]下面参考具体实施例，对本专利技术进行描述，需要说明的是，这些实施例仅仅是描述性的，而不以任何方式限制本专利技术。
[0027]实施例1
[0028]将宰杀处理好的棘胸蛙加入纯水进行磨浆，得到浆料，浆料冷冻干燥3天后磨粉，得到棘胸蛙粉末。
[0029]脱脂处理:将棘胸蛙粉末按照1:4的料液比加石油醚浸泡48h，每隔8h换一次石油醚溶液，37℃烘干，得到脱脂棘胸蛙粉末。
[0030]将脱脂棘胸蛙粉末按照1:40的料液比加水，搅拌均匀，将pH调至7.5及温度调为55℃后，加入1％的木瓜蛋白酶酶解4h，沸水浴灭酶，离心(4℃、10000r/min、10min)取上清，冷冻干燥(
‑
80℃、72h)，得到棘胸蛙酶解产物。
[0031]实施例2
[0032]脱脂处理:将棘胸蛙粉末按照1:4的料液比加石油醚浸泡48h，每隔8h换一次石油
醚溶液，37℃烘干，得到脱脂棘胸蛙粉末。
[0033]将脱脂棘胸蛙粉末按照1:40的料液比加水，搅拌均匀，将pH调至8.0及温度调为37℃，加入1％的胰蛋白酶酶解4h，沸水浴灭酶，离心(4℃、10000r/min、10min)取上清，冷冻干燥(
‑
80℃、72h)，得到棘胸蛙酶解产物。
[0034]实施例3
[0035]脱脂处理:将棘胸蛙粉末按照1:4的料液比加石油醚浸泡48h，每隔8h换一次石油醚溶液，37℃烘干，得到脱脂棘胸蛙粉末。
[0036]将脱脂棘胸蛙粉末按照1:40的料液比加水，搅拌均匀，将pH调至9.5及温度调为50℃，加入1％的碱性蛋白酶酶解4h，沸水浴灭酶，离心(4℃、10000r/min、10min)取上清，冷冻干燥(
‑
80℃、72h)，得到棘胸蛙酶解产物。
[0037]实施例4
[003本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种棘胸蛙多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将棘胸蛙粉末浸泡于石油醚脱脂处理，得到脱脂棘胸蛙粉末；向脱脂棘胸蛙粉末加水，混匀，调pH和温度，加入木瓜蛋白酶酶解4h，灭酶，离心取上清，冷冻干燥，得到棘胸蛙多肽。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还包括：将所述棘胸蛙多肽经葡聚糖凝胶SephadexG
‑
50柱层析分离后，再经葡聚糖凝胶SephadexG
‑
15柱层析分离。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，棘胸蛙粉末与石油醚的料液比为1:4。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将棘胸蛙粉末浸泡于石油醚脱脂处理48h，每隔8h换一次石油醚溶液，37℃烘干，得到脱脂棘胸蛙粉末。5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，脱脂棘胸蛙粉末与水的料液比为1:40。6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，木瓜蛋白酶的加入量为1％。7.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，取棘胸蛙多肽用超纯水配制浓度为50～100mg/mL的溶液，经过葡...

【专利技术属性】
技术研发人员：张铃玉，林丽婷，苏德锦，李钰琦，邓凝，吴达仁，周永波，苏进全，李健，
申请(专利权)人：福建泉州锦峰生物科技有限公司福建省健丰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：