一种增强型荧光探针及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种增强型荧光探针，通过以下方法制备所得：将4.00 mL1.0

【技术实现步骤摘要】
一种增强型荧光探针及其应用


[0001]本专利技术涉及荧光探针领域，具体涉及一种增强型荧光探针及其应用。

技术介绍

[0002]罗丹明6G(rhodamine6G，Ｒh6G)是一种水溶性阳离子荧光染料，因其在弱酸性、中性及碱性环境下有强荧光释放，常被用于荧光标记或定量分析。
[0003]近二十年来，依托氧化剂
‑
碘化钾
‑
罗丹明6G体系荧光猝灭反应测定氧化性物质的报道有很多，然而基于碘
‑
罗丹明6G缔合物的荧光增强型探针的研究应用较少。

技术实现思路

[0004]弱酸性环境下的罗丹明 6G以阳离子形式存在，碘合离子（I3‑
） 带负电，二者通过静电引力发生缔合反应，缔合物荧光较弱，基于此，本专利技术制备了一种增强型荧光探针(I3‑
‑
Rh6G)，并提供了该增强型荧光探针在TritonX
‑
100作用下用于抗坏血酸、盐酸羟胺、安乃近及卡托普利含量分析的应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种增强型荧光探针，通过以下方法制备所得：将4.00 mL1.0
×
10
‑
4 mol/L罗丹明6G和2.50 mL 5.0
×
10
‑
4 mol/L碘液混合，振荡至深红色出现，加入0.1 mol/L pH=4.2的醋酸盐缓冲液2.50 mL，1.0
×
10
‑
3 mol/L Triton X
‑
100溶液1.00 mL，混合均匀，即得增强型荧光探针I3‑
‑
Rh6G。
[0006]中性表面活性剂TritonX
‑
100可以有效改善探针的微环境，确保其长时间处于弱荧光状态，不分解、不沉淀，同时对游离型罗丹明6G的荧光释放具有增敏性。还原性药物分子结构中含有特定的化学基团，诸如抗坏血酸中的烯醇式结构（
‑
CH=CH
‑
OH）、盐酸羟胺中的羟胺结构（H2N
‑
OH）、安乃近、卡托普利结构中的巯基（
‑
SH）等，它们能将探针I3‑
‑
Rh6G结构中的I3‑
还原为I
‑
，瞬间释放强荧光，依据荧光重现的程度与待测物质浓度之间的线性关系，便可间接地测定该物质含量。因此，在TritonX
‑
100作用下的本专利技术的探针I3‑
‑
Rh6G直接用于抗坏血酸、盐酸羟胺、安乃近及卡托普利含量分析，其功效明显优于碘
‑
罗丹明B缔合物。
[0007]在中性表面活性剂和醋酸盐缓冲体系中，探针I3‑
‑
Rh6G可在较宽的pH范围内(pH=2.2～4.7)高灵敏、高选择性地检测还原性药物，还原性药物浓度与荧光增量（ΔF）具有良好的线性关系，抗坏血酸、盐酸羟胺、安乃近及卡托普利检出限为1.39
×
10
‑
9 mol/L、1.38
×
10
‑
9 mol/L、2.65
×
10
‑
9 mol/L、3.83
×
10
‑
9 mol/L；探针更易制备且环境适应性强，长期存放不沉降，不变质，最低检测限可达到1.38
×
10
‑
9 mol/L。样品测定的平均回收率为97%~102%，相对标准偏差(RSD)在1.6%~3.2%之间，方法受常见金属阳离子和阴离子干扰较小。
附图说明
[0008]图1为 I3‑
‑
Rh6G和I3‑
‑
Rh6G+AA的荧光光谱图中： [I3‑
‑
Rh6G]=8.0
×
10
‑
6 mol/L，[AA]=7.5
×
10
‑
6 mol/L。
[0009]图2 为不同体积Rh6G荧光强度；图中：a: 1.0
×
10
‑
4 mol/L Rh6G;b: 1.0
×
10
‑
4 mol/L Rh6G+ TritonX
‑
100。
[0010]图3 为加入不同体积碘液（I3‑
）时荧光强度变化。
[0011]图4为探针I3‑
‑
Rh6G的荧光强度与pH关系曲线。
具体实施方式
[0012]为了使本专利技术的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0013]试验资料1.1 仪器与试剂荧光分光光度计(上海,Hitachi)； pH酸度计(梅特勒
‑
托利多仪器上海有限公司)。
[0014]罗丹明6G (分析纯；配制浓度：1.0
×
10
‑
4 mol/L)；碘液（I3‑
）(配制浓度：5.0
×
10
‑
4 mol/L)；Triton X
‑
100 (分析纯；配制浓度：1.0
×
10
‑
3 mol/L)；抗坏血酸(分析纯)、盐酸羟胺(分析纯)、安乃近(标准物质)、卡托普利(标准物质)配制浓度均为5.0
×
10
‑
4 mol/L；醋酸盐缓冲液：0.1 mol/L，pH=4.5。
[0015]碘 (分析纯)、碘化钾(分析纯)、醋酸钠(分析纯)、冰醋酸(分析纯)均购自国药集团化学试剂有限公司。
[0016]1.2 探针制备将4.00 mL1.0
×
10
‑
4 mol/L罗丹明6G和2.50 mL 5.0
×
10
‑
4 mol/L碘液混合，振荡至深红色出现，加入0.1 mol/L醋酸盐缓冲液（pH=4.2）2.50 mL，1.0
×
10
‑
3 mol/L Triton X
‑
100溶液1.00 mL，混合均匀，即得增强型荧光探针I3‑
‑
Rh6G，低温、密封环境下可长期保存。
[0017]1.3测定方法按方法1.2制得探针I3‑
‑
Rh6G 9.00 mL，在此基础直接加入抗坏血酸/盐酸羟胺/安乃近/卡托普利样品液（样品液设置浓度约为5.0
×
10
‑
4 mol/L）0.25 mL，常温反应25 min后定容，蒸馏水作参比，在发射波长548 nm处测量其荧光强度F，同步完成样品空白F0测定，计算ΔF (ΔF＝F
‑ꢀ
F0)和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种增强型荧光探针，其特征在于：通过以下方法制备所得：将4.00 mL1.0
×
10
‑
4 mol/L罗丹明6G和2.50 mL 5.0
×
10
‑
4 mol/L碘液混合，振荡至深红色出现，加入0.1 mol/L pH=4.2的醋酸盐缓冲液2.50 mL，1.0
×
10
‑
3 mol/L Triton X
‑
100溶液1.00 mL，混合均匀，即得增强型荧光探针I3‑
‑
Rh6G。2.如权利要求1所述的一种增强型荧光探针的应用，其特征在于：在TritonX
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：李花，白莹，张爱菊，
申请(专利权)人：甘肃医学院，
类型：发明
国别省市：