甲基阿魏酸作为miR-378b抑制剂的新用途及其应用制造技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，具体涉及甲基阿魏酸作为miR

【技术实现步骤摘要】
甲基阿魏酸作为miR
‑
378b抑制剂的新用途及其应用


[0001]本专利技术涉及医药
，具体涉及甲基阿魏酸作为miR
‑
378b抑制剂的新用途及其应用。

技术介绍

[0002]肝脏作为糖脂代谢的中枢器官，能够维持机体的能量稳态。肝脏是胰岛素作用和分解代谢的主要靶器官之一，也是胰岛素抵抗发生的场所。胰岛素抵抗会导致包括肝脏在内的胰岛素敏感组织对胰岛素的生物学效应下降，表现为肝糖原输出增多，糖摄取减少，降低了糖原合成，最终导致肝脏糖脂代谢紊乱。近年来国内外流行病学调查发现乙醇的摄入与胰岛素抵抗、胰岛素分泌功能障碍和代谢综合征的高发密切相关。长期酗酒，酒精损伤肝脏和非肝组织，肝脏内源性的脂肪酸（FA）、甘油三酯（TG）生成增多，致使TG在肝脏严重堆积诱发肝脂肪变性，而蓄积的脂肪会使肝细胞对胰岛素的敏感性下降，形成恶性循环。
[0003]microRNA(miRNA)是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其大小长约22个核苷酸。近年来越来越多的研究表明，miRNA参与糖脂代谢相关的多种生物过程，包括脂肪分化、脂质代谢和改善胰岛素敏感性等，并在代谢性疾病的进程中扮演重要角色。miR
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378b是miR
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378家族的成员，它们是同源序列。大量研究表明，miR
‑
378b在许多组织中普遍表达。有文献报道miR
‑
378a
‑
3p对脂代谢和胰岛素信号传导的关键基因有多层次的调控作用。此外，在高脂饮食喂养的肥胖小鼠的脂肪肝和HepG2细胞中，miR
‑
378的表达显著上调，破坏糖脂代谢稳态。最新研究表明，miR
‑
378b的表达在ALD小鼠肝脏和L
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02细胞中显著升高，并通过靶向PI3K
‑
AKT通路中IR和p110α以及CaMKK2
‑
AMPK通路中CaMKK2损害肝脏糖脂代谢过程。
[0004]积极开展有效中草药及其单体药物防治酒精所致外周肝脏糖脂代谢紊乱的临床研究,成为糖脂代谢领域面临的新课题。甲基阿魏酸（methylferulicacid,MFA）是从广西民族特色中草药蝉翼藤茎皮提取得到的有机酸类化合物，化学名为3,4
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二甲氧基
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苯丙烯酸，分子结构式如下所示。MFA的抗氧化应激、抗炎、抗细胞凋亡和保护肝脏的作用前已被证实。最近的研究表明，MFA通过PI3K/AKT通路和AMPK通路调控酒精所致肝胰岛素抵抗和肝脂肪变的进程，进而改善肝脏糖脂代谢紊乱。然而，MFA作用的具体靶点以及调控方式还需进一步探索。目前miRNA抑制剂相关的改善肝脏糖脂代谢紊乱产品较少，也尚无报道MFA作为miR
‑
378b抑制剂在防治肝脏糖脂代谢进程中的作用。
[0005]甲基阿魏酸分子结构式：。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供甲基阿魏酸的新用途。
[0007]本专利技术的技术方案是：甲基阿魏酸作为miR
‑
378b抑制剂的新用途，包括以下过程：S1、甲基阿魏酸通过抑制过表达miR
‑
378b导致的肝脂肪空泡的大小及数量，降低肝脂肪变性的面积和肝损伤；S2、甲基阿魏酸改善了过表达miR
‑
378b小鼠的糖耐量受损状态；S3、甲基阿魏酸通过抑制miR
‑
378b的表达激活PI3K
‑
AKT信号通路，缓解小鼠肝脏胰岛素抵抗；S4、甲基阿魏酸通过抑制miR
‑
378b的表达激活CaMKK2
‑
AMPK信号通路抑制肝脏脂质沉积，改善糖脂代谢。
[0008]进一步地，miR
‑
378b基因作为甲基阿魏酸的作用靶标。
[0009]进一步地，所述miR
‑
378b基因通过与IR、p110α以及CaMKK2 3
’
UTR结合而靶向作用于这些靶基因。
[0010]进一步地，本专利技术的实施还提供miR
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378b过表达调节物，用PCR方法从小鼠基因组DNA中扩增出小鼠miR
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378b的全序列，克隆到经BamHI和HindIII酶切的pAAV
‑
MCS中，包装重组AAV腺相关病毒载体。
[0011]进一步地，所述调节物包括能够诱导肝胰岛素抵抗和肝脂肪变的miR
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378b模拟物。所述miR
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378b模拟物购买自上海吉凯基因医学科技股份有限公司的产品， miR
‑
378b模拟物公开的碱基序列为：正向: ACACTCCAGCTGGGAGTGGACTTGGAGTCA；反向: CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAGTTGAGCCTTCTGA。
[0012]进一步地，将甲基阿魏酸作为miR
‑
378b抑制剂，用于制备肝脏糖脂代谢紊乱的药物。
[0013]进一步地， 将甲基阿魏酸制成片剂、胶囊、颗粒或注射剂等剂型给药，其剂量为1
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100mg/kg甲基阿魏酸/日，可分成2
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3次服用。
[0014]本专利技术的上述技术方案的有益效果如下：本专利技术首次揭示了甲基阿魏酸作为miR
‑
378b抑制剂可用于预防或治疗肝脏糖脂代谢紊乱的用途。发现甲基阿魏酸能够逆转酒精所致肝脏和细胞中miR
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378b的高表达，另外，甲基阿魏酸通过抑制miR
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378b表达，有效上调PI3K
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AKT、CaMKK2
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AMPK信号通路，降低肝脏脂质沉积，促进细胞糖原合成，缓解肝脏炎症反应和肝损伤，改善小鼠糖耐量和胰岛素敏感性，从而达到预防或治疗肝脏糖脂代谢紊乱的效果，可作为预防或治疗肝脏糖脂代谢紊乱的药物。
[0015]本专利技术为临床应用甲基阿魏酸作为miR
‑
378b抑制剂防治肝脏糖脂代谢紊乱提供了坚实的理论基础，有助于推动甲基阿魏酸的临床应用，具有较好的应用前景。
附图说明
[0016]图1为实施例五组甲基阿魏酸对酒精喂养小鼠肝脏的病理结构改变示意图。
[0017]图2为实施例甲基阿魏酸对酒精喂养小鼠血清学指标的影响示意图；
其中，2A为小鼠肝脏中TG水平；2B为小鼠肝脏中TC水平；2C为小鼠血清中ALT水平；2D为小鼠血清中AST水平；2E为小鼠肝脏中糖原含量；2F为空腹血糖水平；2G为空腹血清胰岛素浓度；2H为胰岛素抵抗（HOMA
‑
IR）指数的稳态模型评估。
[0018]图3为实施例甲基阿魏酸对酒精喂养小鼠胰岛素敏感性的影响示意图；其中，3A为葡萄糖耐量试验和糖耐量曲线下面积（area under the本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.甲基阿魏酸作为miR
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378b抑制剂的新用途，其特征在于，包括以下过程：S1、甲基阿魏酸通过抑制过表达miR
‑
378b导致的肝脂肪空泡的大小及数量，降低肝脂肪变性的面积和肝损伤；S2、甲基阿魏酸改善了过表达miR
‑
378b小鼠的糖耐量受损状态；S3、甲基阿魏酸通过抑制miR
‑
378b的表达激活PI3K
‑
AKT信号通路，缓解小鼠肝脏胰岛素抵抗；S4、甲基阿魏酸通过抑制miR
‑
378b的表达激活CaMKK2
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AMPK信号通路抑制肝脏脂质沉积，改善糖脂代谢。2.根据权利要求1所述的甲基阿魏酸作为miR
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378b抑制剂的新用途，其特征在于：miR
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378b基因作为甲基阿魏酸的作用靶标。3.根据权利要求2所述的甲基阿魏酸作为miR
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378b抑制剂的新用途，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：李勇文，李丽，张言，卢君，杨成芳，吴丹，钟毓娟，
申请(专利权)人：桂林医学院，
类型：发明
国别省市：