一种自体血制备固态或液态自然浓缩生长因子CGF的方法技术

本发明专利技术属于自然浓缩生长因子CGF制备技术领域，涉及一种自体血制备固态或液态自然浓缩生长因子CGF的方法。血液采集后，分别注入紫色无菌防凝试管和无菌真空红色采血管，紫色无菌防凝试管中加入混合防凝剂，摇匀后离心，然后取取中间CGF层，得到液态CGF；无菌真空红色采血管离心后取中间层及中间层、下层交界处凝胶，压膜器压制定型，得到固态CGF。CGF制取量大，操作方便，实用性强，具有较高的市场应用前景。景。景。

【技术实现步骤摘要】
一种自体血制备固态或液态自然浓缩生长因子CGF的方法


[0001]本专利技术属于自然浓缩生长因子CGF制备
，涉及一种自体血制备固态或液态自然浓缩生长因子CGF的方法。

技术介绍

[0002]血浆提取物的研究大致经历了富血小板血浆（Platelet
‑
rich plasma，PRP），富血小板纤维蛋白（Platelet
‑
rich fibrin，PRF），浓缩生长因子（Concentrate Growth Factors，CGF）三个阶段。PRP由于含凝血酶及动物血清，并采用一次离心法，容易被污染及致敏，面临淘汰。PRF与CGF相比，扫描电镜结果显示富血小板纤维蛋白和浓缩生长因子的上部分可见不同直径的胶原纤维排列成三维网状结构，胶原纤维上可见大量颗粒状血小板附着，无细胞结构；富血小板纤维蛋白中的胶原纤维排列成条索状，而浓缩生长因子中的胶原纤维排列成栅栏状；ELISA实验结果表明浓缩生长因子中转化生长因子、血小板衍生生长因子、胰岛素样生长因子和血管内皮生长因子的含量均高于PRP及PRF。
[0003]自体血的CGF是由Sacco首次开发出来的，但是制备过程并不完善，产品的生产过程也得不到很好的保障，影响了其疗效。
[0004]自体血CGF比自体血PRP含有更高浓度、更多数量的生长因子、纤维蛋白和大量的CD34+细胞，CGF凝胶质地柔软，富有弹性便于塑形并缓慢释放，由大量纤维蛋白交织成的三维立体网状结构组成，且纤维蛋白网的结构较疏松，具有改善并增强组织再生的功能。因此，保证生长因子的浓度及活性至关重要。自体血取出后需要立即加入一次性真空采血管立即变速连续离心，以制备固态的CGF。但若制备液态的CGF, 由于机器没有配套的防凝剂及试管、试剂和耗材，须另外采购有资质的上述试剂耗材，手续十分繁琐。
[0005]国外的Medifuge离心机（Silfradent，意大利塞法登特公司生产）造价为十几万，并需用专用试管配套离心，而国产的变速离心机仅一万左右，但只能制备固态的CGF。制备液态的CGF没有国产配套的试剂耗材，限制了CGF应用于骨性关节炎、整形美容、糖尿病足等疾病。

技术实现思路

[0006]本专利技术针对传统国产离心机无法同时制备固体和液体CGF的问题中存在的问题提出一种新型的自体血制备固态或液态自然浓缩生长因子CGF的方法。
[0007]为了达到上述目的，本专利技术是采用下述的技术方案实现的：一种自体血来源的浓缩生长因子套装制备方法，能同时制备固体和液体两种CGF。
[0008]固态CGF制备：采集血10毫升，加入无菌真空红色采血管离心，按离心机S1键，自动连续变速四次离心，取得固态CGf，若需要不同形状的固态CGf，在无菌纱布上挤压塑形即可。
[0009]液态CGF制作：用采血针抽血10ml，注入紫色无菌防凝试管，摇匀，放入CGF口腔离心机，配平，按键S1，连续变速离心四次，制备成液态CGf。
[0010]离心程序如下：加速30s，2700r/min离心2min后，2400r/min离心4min；2 700r/min离心4min；3 000r/min离心3min,最后减速36s停止。离心13min后，血液分为3层，上层为贫血小板血浆（Platelet
‑
poorplasma，PPP），中层为CGF，下层为红细胞（Red bloodcell，RBC）；；离心13min后，血液分为3层，上层为贫血小板血浆（Platelet
‑
poorplasma，PPP），中层为CGF，下层为红细胞（Red bloodcell，RBC）。
[0011]防凝液可以自行配制，也可以通过直接抽取一次性使用塑料血袋血液保存袋(100ml)内混合防凝液方式，每0.3ml防凝液内含枸橼酸3.27g，枸橼酸钠26.30g、葡萄糖31.9g，碳酸二氢钠2.22g、腺嘌呤0.275g，经高压蒸汽灭菌、无菌、无热源、开封后一天内可用。
[0012]本专利技术防凝试管经再次添加含枸橼酸钠防凝剂的混合物，使得单位血液制备得到的液态CGF量高于国外离心机制备的量。且其他操作不变的情况下，不添加含枸橼酸钠混合防凝剂时单纯紫色防凝试管制备的CGF数量为每5ml制备1ml，而添加枸橼酸钠混合物的为每5ml血制备至少2mlCGF以上，制备数量及效率有大幅度提高；以上各种生长因子相互作用，相互促进，并且不添加动物血清，避免了交叉感染。
[0013]与现有技术相比，本专利技术的优点和积极效果在于：1. 用普通紫色防凝试管运输及添加液态枸橼酸钠等试剂耗材制备后，国产CGF口腔离心机可以生产固态、液态二种形态CGF。本专利技术所提供的方法，操作方便，实用性强，具有较高的市场应用前景。
[0014]2. 制取量大，自体血采集用套装里的紫色防凝试管另加采血袋的混合防凝剂后，应用国产离心管或防凝试管连续变频离心，可以很方便的制备出固态、液态二种CGF，每5ml自体血可以制备2ml以上CGF，多的时候可以制备3
‑
3.5ml。
附图说明
[0015]图1为实施例1中得到的固体CGF。
[0016]图2为实施例2中得到的液体CGF。
[0017]图3为本专利技术所用到的耗材图。
[0018]各附图标记为：1.PPP，2. PRP，3.CD34+，4.红血球。
具体实施方式
[0019]为了能够更清楚地理解本专利技术的上述目的、特征和优点，下面结合具体实施例对本专利技术做进一步说明。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
[0020]在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术，但是，本专利技术还可以采用不同于在此描述的其他方式来实施，因此，本专利技术并不限于下面公开说明书的具体实施例的限制。
[0021]实施例1如图1和图3所示，本实施例提供固体CGF制备过程，产物如图1。
[0022]（1）试剂耗材准备：准备采血针、一次性5毫升注射器2个、压脉带一个、一次性无菌换药包二个、红色无菌一次性使用真空采血管（EDTK2试管）二个，一次性采血针二个，无添
加剂。
[0023]（2）采血：将供血者手臂平放于桌面，掌心向上，护士将一个小软垫放于手臂之下，此时手臂平放的高度应与心脏高低位置不相上下。此时护士在肘弯处扎止血带、消毒和静脉穿刺。抽血穿刺时应握紧拳，针头进人血管后可以放开拳头。患者此时应保持安静平稳心态，如对静脉穿刺抽血紧张或有见血恶心及眩晕问题，可闭上双眼或扭转头部。抽血完成后立即用消毒的棉块或其他消毒止血物品压紧穿刺部位，或弯曲手臂夹住棉球，以免血液渗出。此后24小时内尽量保持抽血手臂的清洁卫生。
[0024]应用国产的变速离心机和本专利方法，用采血针抽血10ml，注入套装中无菌真空红色采血管，放入CGF口腔离心机，配平，按键S1，连续变速离心四次。具体程序如下: 2700 r/min离心2 min，2400 r/m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种自体血制备固态或液态自然浓缩生长因子CGF的方法，其特征在于，血液采集后，分别注入紫色无菌防凝试管和无菌真空红色采血管，紫色无菌防凝试管中加入混合防凝剂，摇匀后离心，然后取中间CGF层，得到液态CGF；无菌真空红色采血管离心后取中间层、中间层与下层交界处凝胶，压膜器压制定型，得到固态CGF；紫色无菌防凝试管和无菌真空红色采血管内的血液均采用如下程序离心：加速30s，2700r/min离心2min后，2400r/min离心4min；2 ...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭晓雯，谭汇泉，
申请(专利权)人：山东爱瑞达国科医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：