一种测定糖溶液和烟草浸提液中葡萄糖与木糖含量的方法技术

本专利公开了一种测定糖溶液和烟草浸提液中葡萄糖与木糖含量的方法，测定方法为紫外可见光谱法。分析糖溶液时：(1)标准溶液制备，(2)水解反应；(3)显色反应；(4)建立标准曲线或通用模型；(5)样品检测；(6)结果输出。分析烟草浸提液时：(1)烟草浸提液制备；(2)水解反应；(3)显色反应；(4)建立标准曲线或通用模型；(5)样品检测；(6)结果输出。由于采用间苯三酚显色剂、显色步骤位于水解步骤之后、水解采用浓盐酸与冰醋酸的混酸，常温条件，从而首次实现间苯三酚法用于葡萄糖的检测，且可葡萄糖与木糖同时测定，用于糖溶液、烟草浸提液中葡萄糖和木糖的检测时，操作快速简便、检测效率高、准确性高。性高。性高。

【技术实现步骤摘要】
一种测定糖溶液和烟草浸提液中葡萄糖与木糖含量的方法


[0001]本专利技术涉及烟草及烟草制品品质分析领域，尤其涉及一种测定糖溶液和烟草浸提液中葡萄糖与木糖含量的方法。

技术介绍

[0002]烟草中的糖类物质在燃烧条件下可热裂解产生各种新生化合物，从而影响卷烟的香气和口感，并且不同的糖组分还会产生不同影响。研究表明，卷烟中葡萄糖含量能够丰富卷烟香气，提高烟气的圆润性；果糖含量有利于提高烟叶的绵延性和甜度，减少杂气；木糖含量有利于提高烟气的润感与口感的甜味，使得香气质感更细腻柔滑。因此，一种准确、快速的单糖分析检测方法是实现烟草行业品控分析的重要前提。
[0003]目前，烟草行业糖的测定方法主要有费林试剂法、连续流动分析法、气相色谱法和高效液相色谱法等。其中费林试剂法和连续流动分析法测定的都是总量，不能测定单个成分的含量；气相色谱法需要糖类化合物衍生化后才能分析，操作较麻烦；相对于气相色谱法，高效液相色谱经样品前处理后可直接进样，但同样存在前处理麻烦的问题，如需用固相萃取柱预分离等，且上述方法仪器设备成本普遍较高。因此在烟草行业当中，迫切需要开发一种简单、快速的单糖分析方法。
[0004]紫外可见色谱法由于其方法简单快速、仪器价格便宜，并且检测效率高而受到各行业的广泛应用。在高温酸性条件下糖类物质能够通过水解反应生成糠醛和羟甲基糠醛，在显色剂作用下生成能够在可见光区产生具有特征吸收的糠醛衍生物。基于此发现，近年来，研究人员开发出了蒽酮
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硫酸比色法、苯酚
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硫酸比色法、3,5
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二硝基水杨酸比色法等一系列还原糖检测方法，使紫外可见色谱法可用于烟草行业糖的测定。然而，由于原料的特殊性，烟草中的烟碱、茄尼醇、单宁、色素等物质容易与糖类一起溶解到浸提液体中，使得液体呈深黄色从而干扰分析检测结果。在早期的工作中会加入一定量的活性炭粉末来消除这一干扰，然而需要较长的脱色时间(30～60min)，活性炭成本也较高，另外，加入的活性炭粉末不但会吸附一定量的待测组分，还会引入额外的干扰和污染，降低测量结果准确性。近年来有研究表明，采用高倍稀释法也可以降低干扰，但是对检测方法的准确性提出了更高的要求，目前还没有发展出满足此准确性的成熟检测方法。另外，现有大部分显色方法中使用浓硫酸，而浓硫酸是一种具有高腐蚀性的强矿物酸，脱水性强，导致糖碳化问题，而且浓硫酸对人体危险性较大。
[0005]间苯三酚法是一种准确度较高的分光光度法，目前主要应用于木糖的测定，对于葡萄糖的显色效果不佳。另外现有紫外可见色谱法很难实现两种以上糖类分别同时测定。

技术实现思路

[0006]为了解决现有间苯三酚法对葡萄糖显色效果不佳、现有紫外可见色谱法很难实现两种以上糖类分别同时测定、浓硫酸对人体危险性较大、烟草中生物碱等物质干扰测定结果紫外可见色谱法测定烟草中糖类的准确性有待提高等技术问题，本专利技术的第一方面提供
一种测定糖溶液中葡萄糖与木糖含量的方法，本专利技术的第二方面提供一种测定烟草浸提液中葡萄糖与木糖含量的方法。
[0007]本专利技术的技术方案：
[0008]本专利技术的第一技术方案，一种测定糖溶液中葡萄糖与木糖含量的方法，包括以下步骤：
[0009](1)标准溶液制备：配制不同浓度的单糖标准溶液以及混糖溶液，所述单糖标准溶液为葡萄糖标准溶液和木糖标准溶液，所述混糖溶液为等体积已知浓度的单糖标准溶液随机混合的混合物；
[0010](2)水解反应：向含单糖标准溶液或混糖溶液的试管中加入浓盐酸和冰醋酸的混酸，摇匀后置入恒温水浴锅中进行水解反应，反应完成后取出试管进行冷却；
[0011](3)显色反应：向步骤(2)中冷却后的水解液中加入间苯三酚显色剂溶液，摇匀试管并静置；
[0012](4)建立标准曲线：将步骤(1)中不同浓度的单糖标准溶液和已知浓度的混糖溶液依次经步骤(2)和(3)处理后，对所得液体进行紫外可见光谱法检测，得到光谱吸光度信号值；对于单糖标准溶液，根据不同浓度单糖标准溶液的吸光度信号值与单糖含量，分别建立葡萄糖标准曲线和木糖标准曲线；对于混糖溶液，利用多维数据处理技术建立光谱吸光度信号值与葡萄糖含量和木糖含量之间的映射，从而得到通用模型1，再建立混糖溶液中木糖浓度不变时，光谱吸光度信号值增量对葡萄糖浓度增量的映射，建立通用模型2；
[0013](5)样品检测：取与步骤(4)所用浓度不同的样品糖溶液，经步骤(2)、(3)处理后，进行紫外可见光谱法检测，记录样品的光谱吸光度信号值，所述样品糖溶液为葡萄糖溶液，木糖溶液和混糖溶液中任一种；
[0014](6)结果输出：根据紫外光谱特征吸收峰位置初步判断样品糖溶液中糖的类型，若为葡萄糖，则将步骤(5)所得的光谱吸光度信号值带入步骤(4)所得的葡萄糖标准曲线中，得到葡萄糖含量；若为木糖，则将步骤(5)所得的光谱吸光度信号值带入步骤(4)所得的木糖标准曲线中，得到木糖含量；若为混糖，则将步骤(5)所得的光谱吸光度信号值带入步骤(4)所得的通用模型1和通用模型2中，得到样品中葡萄糖与木糖含量。
[0015]本专利技术的第二技术方案，一种测定烟草浸提液中葡萄糖与木糖含量的方法，包括以下步骤：
[0016](1)烟草浸提液制备：采用水为萃取剂对烟草样品在恒温水浴振荡器上振荡萃取，过滤，弃去初始滤液，收集后续滤液备用，得到烟草浸提液；
[0017](2)水解反应：向含单糖标准溶液或混糖溶液或烟草浸提液的试管中加入浓盐酸和冰醋酸的混酸，摇匀后置入恒温水浴锅中进行水解反应，反应完成后取出试管进行冷却；
[0018](3)显色反应：向步骤(2)中冷却后的水解液中加入间苯三酚显色剂溶液，摇匀试管并静置；
[0019](4)建立标准曲线：将不同浓度的单糖标准溶液和已知浓度的混糖溶液依次经步骤(2) 和(3)处理后，对所得液体进行紫外可见光谱法检测，得到光谱吸光度信号值；对于单糖溶液，根据不同浓度单糖溶液的吸光度信号值与单糖含量，分别建立葡萄糖标准曲线和木糖标准曲线；对于混糖溶液，利用多维数据处理技术建立光谱吸光度信号值与葡萄糖含量和木糖含量之间的映射，从而得到通用模型1，再建立混糖溶液中木糖浓度不变时，光
谱吸光度信号值增量对葡萄糖浓度增量的映射，建立通用模型2；
[0020](5)样品检测：将步骤(1)所得的未知浓度的烟草浸提液稀释后，经步骤(2)、(3) 处理后，进行紫外可见光谱法检测，记录烟草浸提液的光谱吸光度信号值；
[0021](6)结果输出：根据紫外光谱特征吸收峰位置初步判断所述烟草浸提液中糖的类型，若为葡萄糖，则将步骤(5)所得的光谱吸光度信号值带入步骤(4)所得的葡萄糖标准曲线中，得到葡萄糖含量；若为木糖，则将步骤(5)所得的光谱吸光度信号值带入步骤(4)所得的木糖标准曲线中，得到木糖含量；若为混糖，则将步骤(5)所得的光谱吸光度信号值带入步骤(4)所得的通用模型1和通用模型2中，得到样品中葡萄糖与木糖含量。
[0022]在第一技术方本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定糖溶液中葡萄糖与木糖含量的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)标准溶液制备：配制不同浓度的单糖标准溶液以及混糖溶液，所述单糖标准溶液为葡萄糖标准溶液和木糖标准溶液，所述混糖溶液为等体积已知浓度的单糖标准溶液随机混合的混合物；(2)水解反应：向单糖标准溶液或混糖溶液的试管中加入浓盐酸和冰醋酸的混酸，摇匀后置入恒温水浴锅中进行水解反应，反应完成后取出试管进行冷却；(3)显色反应：向步骤(2)中冷却后的水解液中加入间苯三酚显色剂溶液，摇匀试管并静置；(4)建立标准曲线：将步骤(1)中不同浓度的单糖标准溶液和已知浓度的混糖溶液依次经步骤(2)和(3)处理后，对所得液体进行紫外可见光谱法检测，得到光谱吸光度信号值；对于单糖标准溶液，根据不同浓度单糖标准溶液的吸光度信号值与单糖含量，分别建立葡萄糖标准曲线和木糖标准曲线；对于混糖溶液，利用多维数据处理技术建立光谱吸光度信号值与葡萄糖含量和木糖含量之间的映射，从而得到通用模型1，再建立混糖溶液中木糖浓度不变时，光谱吸光度信号值增量对葡萄糖浓度增量的映射，建立通用模型2；(5)样品检测：取与步骤(4)所用浓度不同的样品糖溶液，经步骤(2)、(3)处理后，进行紫外可见光谱法检测，记录样品的光谱吸光度信号值，所述样品糖溶液为葡萄糖溶液或木糖溶液或混糖溶液；(6)结果输出：根据紫外光谱特征吸收峰位置初步判断样品溶液中糖的类型，若为葡萄糖，则将步骤(5)所得的光谱吸光度信号值带入步骤(4)所得的葡萄糖标准曲线中，得到葡萄糖含量；若为木糖，则将步骤(5)所得的光谱吸光度信号值带入步骤(4)所得的木糖标准曲线中，得到木糖含量；若为混糖，则将步骤(5)所得的光谱吸光度信号值带入步骤(4)所得的通用模型1和通用模型2中，得到样品中葡萄糖与木糖含量。2.一种测定烟草浸提液中葡萄糖与木糖含量的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)烟草浸提液制备：采用水为萃取剂对烟草样品在恒温水浴振荡器上振荡萃取，过滤，弃去初始滤液，收集后续滤液备用，得到烟草浸提液；(2)水解反应：向单糖标准溶液或混糖溶液或烟草浸提液的试管中加入浓盐酸和冰醋酸的混酸，摇匀后置入恒温水浴锅中进行水解反应，反应完成后取出试管进行冷却；(3)显色反应：向步骤(2)中冷却后的水解液中加入间苯三酚显色剂溶液，摇匀试管并静置；(4)建立标准曲线：将不同浓度的单糖标准溶液和已知浓度的混糖溶液依次经步骤(2)和(3)处理后，对所得液体进行紫外可见光谱法检测，得到光谱吸光度信号值；对于单糖溶液，根据不同浓度单糖溶液的吸光度信号值与单糖含量，分别建立葡萄糖标准曲线和木糖标准曲线；对于混糖溶液，利用多维数据处...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭丽娟，李宇，赵璐，何亮，张克灿，刘宇晨，
申请(专利权)人：云南省烟草质量监督检测站，
类型：发明
国别省市：