脆弱拟杆菌两性离子荚膜多糖与免疫检查点抑制剂联合用药治疗生殖泌尿系统肿瘤的应用技术方案

本发明专利技术公开了脆弱拟杆菌两性离子荚膜多糖与免疫检查点抑制剂联合用药在防治生殖泌尿系统肿瘤中的应用。本发明专利技术通过大量实验证明，脆弱拟杆菌，尤其是保藏号为保藏编号为CGMCC No.10685的脆弱拟杆菌ZY

【技术实现步骤摘要】
脆弱拟杆菌两性离子荚膜多糖与免疫检查点抑制剂联合用药治疗生殖泌尿系统肿瘤的应用
[0001]本专利技术在实施过程中所使用的微生物菌种已于2015年4月2日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)(北京市朝阳区北辰西路1号院3号)保藏。分类命名：脆弱拟杆菌ZY
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312(Bacteroides fragilis ZY
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312)，保藏编号CGMCCNo.10685。脆弱拟杆菌ZY
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312由本专利技术申请单位自行分离获得，并且已经在授权专利保护(专利号201510459408.X)，按照专利审查指南的规定，公众能够从商业渠道买到或已经授权，不用保藏，即不用提供保藏证明。


[0002]本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种脆弱拟杆菌的两性离子荚膜多糖与免疫检查点抑制剂共同用药在制备生殖泌尿系统肿瘤的药物中的应用。

技术介绍

[0003]泌尿生殖系统肿瘤是指病发于泌尿系统和(或)生殖系统的肿瘤。其中包括女性胸部和生殖器官肿瘤、男性生殖器官肿瘤以及泌尿器官肿瘤，如肾癌、膀胱癌、尿路上皮癌、乳腺癌、卵巢癌和前列腺癌等。
[0004]泌尿生殖系统肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病，具有高发病率和死亡率，有数据表明，其占所有癌症新发病例的31％，对人类健康和生命造成严重威胁。其发病机制具有异质性，通常包含内因和外因，如物理因素、化学因素、生物学因素、遗传因素、内分泌因素、免疫功能和精神因素等。
[0005]目前对泌尿生殖系统(genitourinary，GU)肿瘤的诊断和监测方法多为侵袭性和/或缺乏敏感度和特异性。针对不同病症，治疗方式存在差异，主要包括手术治疗、放射治疗、化药治疗、靶向治疗和免疫治疗等。手术治疗是泌尿生殖系统肿瘤的首要治疗方法，适用于早、中期实体肿瘤，疗效直接，对于局部肿瘤可彻底清除，但该方法创伤性较大，部分部位不可切除，存在局部扩散风险；化疗方法对于不同肿瘤治愈效果不一，可作用于患者全身，但化疗药物的选择性差，且存在不同程度的毒副作用；放疗是一种局部治疗手段，该方法对于肿瘤的抑制效果及杀伤力较强，毒性相对较小，放疗后患者易存在后遗症，如肌肉、神经损伤等；生物治疗如免疫治疗、基因治疗、免疫治疗等疗效不一，价格昂贵且存在较强副作用。
[0006]肾癌是泌尿系统常见的肿瘤之一，占肾脏恶性肿瘤的80％～90％，其起源于肾实质泌尿小管上皮系统，发生于肾实质的任何部位，呈结节状或分叶状，大小不一，质硬，切面呈黄色，多为实性，有时灰白色类似肉瘤，少数为多囊性，囊内有透明液体，可见有坏死和出血。
[0007]目前，肾癌的病因尚不明晰，主要认为与遗传、吸烟、高血压、肥胖及抗高血压治疗有关，其中吸烟和肥胖是公认的重要致肾癌危险因素，其病理类型通常分为透明细胞癌、乳头状肾细胞癌、嫌色细胞癌，以及集合管癌等少见类型的肾细胞癌。
[0008]肾癌患者的临床表现复杂多变，且早期患者通常缺乏临床表现，主要临床表现包
括血尿、腰痛和肿块，肾癌的诊断方式包括临床表现、实验室检查、影像学检查等。实验室常规检查的主要包括尿常规、血常规、红细胞沉降率、血糖、血钙、肾功能、肝功能、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶等项目；影像学检查对于肾癌的诊治、病灶的发现及分期、术中定位和术后及非手术治疗随诊均具有重要意义，包括胸部X线检查、超声检查、CT 检查、MRI检查及PET检查等。
[0009]肾癌患者的治疗方式通常参考影像学检查的结果以确定肿瘤的临床分期，并利用辅助检查评估患者对治疗的耐受能力，根据临床分期并结合患者的耐受力，选择恰当的治疗方式，通常包括手术治疗、介入治疗、放疗和药物治疗等。其中，手术治疗是最主要的治疗方式，通常适用于局限性和局部进展性肾癌患者
[0010]膀胱癌是泌尿系统三大肿瘤之一，发病率在全世界范围内居恶性肿瘤的第10位，膀胱癌在男性中的发病率上升至第6位，死亡率在男性恶性肿瘤中居第9位，目前，其发病率呈现逐年上升的趋势，且膀胱癌具有易复发的特点。
[0011]常见膀胱肿瘤包括膀胱尿路上皮癌、膀胱鳞状细胞癌和膀胱腺癌，其中最主要的病理类型为膀胱尿路上皮癌，占膀胱癌总数的90％以上。
[0012]膀胱癌的病因较为复杂，包括遗传因素和环境因素，如吸烟和外界芳香胺类物质的影响等。常见症状包括血尿、尿频、排尿疼痛和下背痛等。主要检测方式有尿液分析、尿液细胞学检查、膀胱镜检查等。
[0013]膀胱癌的主要治疗手段包括手术治疗、放射治疗、化疗和免疫治疗。常用手术治疗方式有配合电灼术的经尿道切除术、根治性膀胱切除术、膀胱部分切除术、尿流改道术等；放射治疗是利用高能量X
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射线或其他类型的辐射杀死癌细胞或阻止其增长的一种癌症治疗方式，包括外部放射疗法和内部放射疗法，具体方式取决于所治疗癌症的类型及所处阶段；生物治疗是利用患者的免疫系统对抗癌症的治疗方式，其使用身体或是在实验室生产的物质来促进、诱导或恢复身体对抗癌症的自然防御机制。
[0014]乳腺癌(breast cancer)是发生于乳腺上皮或导管上皮的恶性肿瘤，多发于女性，男性发病率约为1％。国家癌症中心发布的数据显示，乳腺癌是我国女性发病率最高的恶性肿瘤，且发病率逐年增高。
[0015]乳腺癌早期通常无明显症状，主要表现为：乳腺肿块、乳头改变、皮肤和外形改变、乳房疼痛、区域淋巴结肿大以及出现远处转移后的器官受累症状等。
[0016]乳腺癌病因尚不清楚，其被认为与年龄、激素、遗传因素、月经婚育史、膳食结构、过度诊断、环境因素等密切相关。乳腺癌的主要筛查手段包括影像学检查，组织活检，乳腺癌肿瘤标志物检查，免疫组化检查等。
[0017]乳腺癌主要治疗方式包括药物治疗、手术治疗和放射治疗等。其中，药物治疗根据作用机制不同，可分为化学药物治疗、内分泌治疗(激素治疗)以及靶向治疗；化疗药物一般通过改变或抑制癌细胞的生化代谢过程，从而干扰癌细胞的繁殖，主要成分以蒽环类和紫杉醇类为主；内分泌治疗是根据药物与细胞质内的雌激素受体结合从而使细胞发挥作用，主要包括三苯氧胺、雌激素拮抗剂和芳香化酶抑制剂等；药物治疗方法对于肿瘤细胞的转移和病症复发具有重要作用，但起效较慢，易对患者身体造成额外伤害，诱发消化系统等毒性作用和不良反应，并使患者产生耐药性。手术治疗方法是乳腺癌治疗的最常用方法，手术方式包括乳腺癌根治术、乳腺癌改良根治术、乳腺癌扩大根治术、保留乳房的乳腺癌根治
术、前哨淋巴结活检和乳房重建手术等，其能够最大程度的局部控制病灶，有效提高患者生存率，但此方法恢复难度较大，较易复发，且一旦复发难以治愈。放射治疗通常用于局部治疗，适用于早期肿瘤患者，能够使患者获得较长生存期，以提高患者生存质量为前提缩小肿瘤扩散面积，但该方法费用昂贵、周期较长、并伴随一系列毒副作用和并发症。目前，临床尚缺乏更有效的乳腺癌治疗方法，虽然乳腺癌的诊疗技术不断提高，乳腺癌患者的死亡率仍无明显下降趋势。
[0018]卵巢癌(ovarian cancer)是指生长在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脆弱拟杆菌两性离子荚膜多糖与免疫检查点抑制剂在制备预防和/或治疗生殖泌尿系统癌症的产品中应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述两性离子荚膜多糖提取自保藏编号为CGMCC No.10685的脆弱拟杆菌ZY
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312。优选，所述两性离子荚膜多糖含有荚膜多糖A。其中，所述荚膜多糖A的结构如下所示：优选地，所述荚膜多糖A的重均分子量为80
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90kD，Mw分布于70
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100KD的部分占总量的70
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80％，重均分子量/数均分子量(Mw/Mn)的比值为1.0
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1.3。更优选地，所述荚膜多糖A的含量超过95wt％。所述两性离子荚膜多糖的制备方法包括以下步骤：(1)将发酵培养后的脆弱拟杆菌菌液离心收集沉淀物，即得脆弱拟杆菌菌泥；取菌泥，加入菌泥质量3～10倍的纯化水使菌体重悬，用酸溶液调节其pH至2.0～4.5，50～120℃提取0.5～3.0h，冷却至室温，常温离心，取上清，得到粗糖溶液；(2)粗糖溶液经超滤膜超滤浓缩、除小分子杂质，至电导率稳定，收集回流液；(3)回流液中加入等体积40mmol/L Tris
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HCl转盐；离子交换柱层析，梯度洗脱，分段收集，SEC
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HPLC跟踪监测，合并206nm吸收峰为单一、对称峰的组分，超滤膜超滤，加入纯化水反复超滤，至电导率稳定，收集回流液，冻干，得到脆弱拟杆菌提取物。步骤(1)中所述离心为11000～13000g离心8～12min。步骤(1)中所述酸溶液可以是有机酸、无机酸和酸性缓冲液中的一种或多种。其中，无机酸可以是盐酸、硫酸、磷酸等；有机酸可以是乙酸、柠檬酸等。步骤(2)中所述超滤膜可以为100、50、30、10、5、3KD或者任意两个分子量值之间的范围。步骤(3)中所述离子交换柱优选为DEAE Sepharose Fast Flow的16mm
×
200mm，层析时的流速15～25mL/min，pH5.0～9.0含0.2mol/L NaCl 20mmol/L Tris
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HCl梯度洗脱25个柱体积，分段收集，100mL/瓶(组分)；所述超滤膜为10KD。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述生殖泌尿系统肿瘤包括女性胸部和生殖器官肿瘤、男性生殖器官肿瘤以及泌尿器官肿瘤。优选地，选自乳腺癌、宫颈癌、子宫
体癌、卵巢癌、前列腺癌、肾癌、膀胱癌、睾丸癌中的一种或多种。4.根据权利要求1
‑
3中任一所述的应用，其特征在于，所述免疫检查点抑制剂包括PD
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1、PD
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L1、PD
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L2、CTLA
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4、LAG
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3、TIM
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3、VISTA、A2aR抗体中的至少一种；优选的，免疫检查点抑制剂为PD
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1抗体和/或PD
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L1抗体。优选地，所述PD
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1抗体包括纳武利尤单抗(Nivolumab)、帕博利珠单抗(Pembrolizumab)、西米普利单抗(Cemiplimab)、特瑞普利单抗(Toripalimab)、信迪利单抗(Cindilimab)、卡瑞利珠单抗(Camrelizumab)及其他能够与PD
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1结合，阻断PD
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1/PD
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L1信号通路，上调T细胞活化，激活内源性抗肿瘤免疫反应的物质。所述PD
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L1抗体包括阿特朱单抗(Atezolizumab)、阿维鲁单抗(Avelumab)、度伐鲁单抗(Durvalumab)及其他能够与PD
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L1结合，阻断PD
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1/PD
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L1信号通路，上调T细胞活化，激活内源性抗肿瘤免疫反应的物质。5.根据权利要求1
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4中任一所述的应用，其特征在于，所述产品为食品或药品。优选地，所述食品包括奶粉、干酪、凝乳、酸奶酪、冰激凌或发酵谷类食品。所述食品还可以是动物食品，比如饲料等。优选地，所述药品的剂型包括丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊、口服液或管饲制剂。所述药品包括人用药或动物用药。脆弱拟杆菌与PD
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1抗体和/或PD
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L1抗体同时给药。或，脆弱拟杆菌两性离子荚膜多糖与PD
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1抗体和/或PD
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L1抗体分别给药。优选地，脆弱拟杆菌两性离子荚膜多糖采用口服或灌肠方式给药。6.一种用于防...

【专利技术属性】
技术研发人员：常秀娟，郭真，刘洋洋，王晔，
申请(专利权)人：广州知易生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：