一种适合杂交瘤细胞贴壁生长的无血清培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种适合杂交瘤细胞贴壁生长的无血清培养基，包括多种氨基酸、维生素、金属盐、辅酶、激素、糖蛋白、基础营养素等多种营养物质。所述无血清培养基中完全不含血清成分，化学成分明确配制简便，原料常见易获得，且成本低廉；该无血清培养基制备方法简单，能够大量稳定生产，极易控制批间差，快速获得高密度细胞及长时间保持细胞活性，完全可取代牛血清培养基用于杂交瘤细胞的贴壁培养，极大精简了杂交瘤细胞培养和单克隆抗体制备的工艺，减少了批间差，降低了成本，也排除了支原体污染的风险。的风险。的风险。

【技术实现步骤摘要】
一种适合杂交瘤细胞贴壁生长的无血清培养基


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种适合杂交瘤细胞贴壁生长的无血清培养基。

技术介绍

[0002]目前大多数杂交瘤细胞是在含有胎牛/新生牛/小牛血清的培养基中培养的。但这些培养基存在以下缺陷：(1)培养基中重要成分牛血清一般需国外进口，不仅货期长，且易受贸易环境因素等影响，货源无保障；(2)牛血清批间差较大，每次使用前都须抽样检定，合格后方可购买使用，不仅耗时较长，还增加了检定的工作量，且原料质量无保障；(3)牛血清成分复杂，可能含有的个别成分会抑制细胞的生长，同时也存在支原体污染的风险；(4)牛血清尤其是胎牛血清价格高昂，每100ml培养基需要10～15ml牛血清，成本较高。
[0003]因此，筛选出一种专用于杂交瘤细胞培养的无血清培养基，对于降低杂交瘤细胞的贴壁培养和提高培养细胞的质量都具有重要意义。

技术实现思路

[0004]为了解决上述
技术介绍
中的问题，本专利技术提供了一种适合杂交瘤细胞贴壁生长的无血清培养基，其含有多种氨基酸、维生素、金属盐等营养成分，化学成分明确、使用成本低廉，完全不含动物血清，可获得较高的细胞浓度。
[0005]为实现上述专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：
[0006]本专利技术提供了一种适合杂交瘤细胞贴壁生长的无血清培养基，所述无血清培养基包括如下组分：苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、亮氨酸、组氨酸、胱氨酸、精氨酸、丝氨酸、碳酸氢钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化镁、氯化钠、硫酸镁、氯化钾、氯化钙、氢氧化钠、硫酸铜、氯化锰、柠檬酸铁、泛酸钙、叶酸、烟酰胺、维生素B2、硫胺素、生物素、维生素B12、维生素C、维生素A、还原性谷胱甘肽、胸苷、三磷酸腺苷、黄嘌呤、尿嘧啶、硫酸锌、氢化可的松、地塞米松、酵母提取物、纤连蛋白、L
‑
谷氨酰胺。
[0007]进一步的，所述无血清培养基包括如下各组分及浓度：苯丙氨酸10
‑
50mg/L、苏氨酸10
‑
50mg/L、色氨酸10
‑
50mg/L、酪氨酸10
‑
50mg/L、缬氨酸10
‑
50mg/L、蛋氨酸10
‑
50mg/L、赖氨酸10
‑
50mg/L、亮氨酸10
‑
50mg/L、组氨酸10
‑
50mg/L、胱氨酸10
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50mg/L、精氨酸10
‑
50mg/L、丝氨酸10
‑
50mg/L、碳酸氢钠1000
‑
2000mg/L、磷酸二氢钠100
‑
200mg/L、磷酸氢二钠100
‑
200mg/L、氯化镁10
‑
50mg/L、氯化钠1000
‑
5000mg/L、硫酸镁100
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500mg/L、氯化钾100
‑
500mg/L、氯化钙100
‑
200mg/L、氢氧化钠100
‑
1000mg/L、硫酸铜0.1
‑
10mg/L、氯化锰0.1
‑
10mg/L、柠檬酸铁0.1
‑
10mg/L、泛酸钙0.1
‑
10mg/L、叶酸0.1
‑
10mg/L、烟酰胺0.1
‑
10mg/L、维生素B2 0.1
‑
10mg/L、硫胺素0.1
‑
10mg/L、生物素0.1
‑
10mg/L、维生素B120.1
‑
10mg/L、维生素C 0.1
‑
10mg/L、维生素A 0.1
‑
10mg/L、还原性谷胱甘肽0.1
‑
10mg/L、胸苷0.1
‑
10mg/L、三磷酸腺苷0.1
‑
10mg/L、黄嘌呤0.1
‑
10mg/L、尿嘧啶0.1
‑
10mg/L、硫酸锌0.1
‑
10mg/L、氢化可的松0.1
‑
10mg/L、地塞米松0.1
‑
10mg/L、酵母提取物1000
‑
5000mg/L、纤连蛋白0.1
‑
10mg/L、
L
‑
谷氨酰胺150
‑
375mg/L。
[0008]进一步的，所述无血清培养基的各组分及其浓度为：苯丙氨酸45mg/L、苏氨酸30mg/L、色氨酸35mg/L、酪氨酸45mg/L、缬氨酸24mg/L、蛋氨酸18mg/L、赖氨酸50mg/L、亮氨酸35mg/L、组氨酸40mg/L、胱氨酸20mg/L、精氨酸35mg/L、丝氨酸28mg/L、碳酸氢钠2000mg/L、磷酸二氢钠200mg/L、磷酸氢二钠190mg/L、氯化镁40mg/L、氯化钠5000mg/L、硫酸镁500mg/L、氯化钾500mg/L、氯化钙150mg/L、氢氧化钠1000mg/L、硫酸铜6mg/L、氯化锰5mg/L、柠檬酸铁5mg/L、泛酸钙7mg/L、叶酸10mg/L、烟酰胺6mg/L、维生素B2 8mg/L、硫胺素8mg/L、生物素8mg/L、维生素B12 5mg/L、维生素C10mg/L、维生素A 6mg/L、还原性谷胱甘肽6mg/L、胸苷5mg/L、三磷酸腺苷5mg/L、黄嘌呤8mg/L、尿嘧啶3mg/L、硫酸锌5mg/L、氢化可的松9mg/L、地塞米松10mg/L、酵母提取物5000mg/L、纤连蛋白10mg/L、L
‑
谷氨酰胺375mg/L。
[0009]进一步的，所述无血清培养基的各组分及其浓度为：苯丙氨酸15mg/L、苏氨酸12mg/L、色氨酸15mg/L、酪氨酸15mg/L、缬氨酸10mg/L、蛋氨酸10mg/L、赖氨酸15mg/L、亮氨酸20mg/L、组氨酸10mg/L、胱氨酸10mg/L、精氨酸15mg/L、丝氨酸10mg/L、碳酸氢钠1000mg/L、磷酸二氢钠100mg/L、磷酸氢二钠100mg/L、氯化镁15mg/L、氯化钠3000mg/L、硫酸镁200mg/L、氯化钾200mg/L、氯化钙100mg/L、氢氧化钠100mg/L、硫酸铜2mg/L、氯化锰1mg/L、柠檬酸铁1mg/L、泛酸钙1mg/L、叶酸5mg/L、烟酰胺2mg/L、维生素B2 2mg/L、硫胺素1mg/L、生物素1mg/L、维生素B12 2mg/L、维生素C 5mg/L、维生素A1mg/L、还原性谷胱甘肽3mg/L、胸苷2mg/L、三磷酸腺苷2mg/L、黄嘌呤3mg/L、尿嘧啶1mg/L、硫酸锌1mg/L、氢化可的松2mg/L、地塞米松1mg/L、酵母提取物1000mg/L、纤连蛋白50mg/L、L
‑
谷氨酰胺150mg/L。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种适合杂交瘤细胞贴壁生长的无血清培养基，其特征在于，所述无血清培养基包括如下组分：苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、亮氨酸、组氨酸、胱氨酸、精氨酸、丝氨酸、碳酸氢钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化镁、氯化钠、硫酸镁、氯化钾、氯化钙、氢氧化钠、硫酸铜、氯化锰、柠檬酸铁、泛酸钙、叶酸、烟酰胺、维生素B2、硫胺素、生物素、维生素B12、维生素C、维生素A、还原性谷胱甘肽、胸苷、三磷酸腺苷、黄嘌呤、尿嘧啶、硫酸锌、氢化可的松、地塞米松、酵母提取物、纤连蛋白、L
‑
谷氨酰胺。2.根据权利要求1所述的无血清培养基，其特征在于，所述无血清培养基包括如下组分及浓度：苯丙氨酸10
‑
50mg/L、苏氨酸10
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50mg/L、色氨酸10
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50mg/L、酪氨酸10
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50mg/L、缬氨酸10
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50mg/L、蛋氨酸10
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50mg/L、赖氨酸10
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50mg/L、亮氨酸10
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50mg/L、组氨酸10
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50mg/L、胱氨酸10
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50mg/L、精氨酸10
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50mg/L、丝氨酸10
‑
50mg/L、碳酸氢钠1000
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2000mg/L、磷酸二氢钠100
‑
200mg/L、磷酸氢二钠100
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200mg/L、氯化镁10
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50mg/L、氯化钠1000
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5000mg/L、硫酸镁100
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500mg/L、氯化钾100
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500mg/L、氯化钙100
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200mg/L、氢氧化钠100
‑
1000mg/L、硫酸铜0.1
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10mg/L、氯化锰0.1
‑
10mg/L、柠檬酸铁0.1
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10mg/L、泛酸钙0.1
‑
10mg/L、叶酸0.1
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10mg/L、烟酰胺0.1
‑
10mg/L、维生素B2 0.1
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10mg/L、硫胺素0.1
‑
10mg/L、生物素0.1
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10mg/L、维生素B12 0.1
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10mg/L、维生素C 0.1
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10mg/L、维生素A 0.1
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10mg/L、还原性谷胱甘肽0.1
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10mg/L、胸苷0.1
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10mg/L、三磷酸腺苷0.1
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10mg/L、黄嘌呤0.1
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10mg/L、尿嘧啶0.1
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10mg/L、硫酸锌0.1
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10mg/L、氢化可的松0.1
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10mg/L、地塞米松0.1
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10mg/L、酵母提取物1000

【专利技术属性】
技术研发人员：付理文，
申请(专利权)人：上海捷门生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：