系统性红斑狼疮患者血栓形成的诊断、预后和监测治疗方法技术方案

本文提供了在患有或疑似患有系统性红斑狼疮的受试者中血栓形成的诊断、预后和治疗方法，包括确定血小板结合补体C4d的水平、C3水平和抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原复合物和/或狼疮抗凝剂水平中的一种或两种。抗凝剂水平中的一种或两种。抗凝剂水平中的一种或两种。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】系统性红斑狼疮患者血栓形成的诊断、预后和监测治疗方法
交叉引用的申请
[0001]本申请要求于2019年8月12日提交的美国临时申请62/885,612和2020年3月30日提交的美国临时申请63/002,055的优先权权益，将其全部内容通过引用并入本文。

技术介绍

[0002]SLE血栓形成的过度风险取决于存在该疾病特有的异常，包括低C3、抗磷脂(aPL)抗体(尤其是狼疮抗凝剂[LAC])和肾病综合征。与SLE治疗如泼尼松相关的其他因素可能进一步增加血栓形成的风险。
[0003]SLE中通常存在细胞结合的补体激活产物(CB
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CAP)和C4d分裂片段在造血细胞如B淋巴细胞(BC4d)和红细胞(EC4d)上的沉积。相比之下，C4d在血小板上的沉积(PC4d)通常不常见(20％SLE)，但具有高度特异性。(例如，参见参考文献1
‑
2)。
[0004]仍然需要识别SLE患者的血栓形成风险。

技术实现思路

[0005]在一个方面，本文提供了用于诊断患有系统性红斑狼疮(SLE)的受试者血栓形成的方法，包括确定：(a)来自受试者的生物样品中血小板结合的C4d(PC4d)蛋白的水平；(b)来自受试者的生物样品中的补体C3蛋白的水平；和(c)以下一项或两项：(i)来自受试者的生物样品中的抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原(PS/PT)IgG抗体的水平；和/或(ii)来自受试者的生物样品中的狼疮抗凝剂(LAC)的水平。(i)生物样品中PC4d水平高于阈值PC4d水平，(ii)补体C3水平低于阈值C3水平，和(iii)抗PS/PT IgG抗体之一或两者的水平高于阈值抗PS/PT IgG抗体水平和/或生物样品中的LAC水平高于阈值LAC水平的组合表明受试者具有血栓形成的风险。
[0006]在一个方面，本文提供了用于预后患有系统性红斑狼疮(SLE)的受试者中血栓形成发展的方法，包括确定：(a)来自受试者的生物样品中血小板结合的C4d(PC4d)蛋白的水平；(b)来自受试者的生物样品中的补体C3蛋白的水平；和(c)以下一项或两项：(i)来自受试者的生物样品中的抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原(PS/PT)IgG抗体的水平；和/或(ii)来自受试者的生物样品中的狼疮抗凝剂(LAC)的水平。(i)生物样品中PC4d水平高于阈值PC4d水平，(ii)补体C3水平低于阈值C3水平，和(iii)抗PS/PT IgG抗体之一或两者的水平高于阈值抗PS/PT IgG抗体水平和/或生物样品中的LAC水平高于阈值LAC水平的组合表明受试者处于发生血栓形成的风险中。
[0007]在一个方面，本文提供了用于监测患有系统性红斑狼疮(SLE)并正在接受血栓形成治疗的受试者的血栓形成治疗的方法，包括确定：(a)来自受试者的生物样品中血小板结合的C4d(PC4d)蛋白的水平；(b)来自受试者的生物样品中的补体C3蛋白的水平；和(c)以下一项或两项：(i)来自受试者的生物样品中的抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原(PS/PT)IgG抗体的水平；和/或(ii)来自受试者的生物样品中的狼疮抗凝剂(LAC)的水平。(i)生物样品中PC4d水平高于阈值PC4d水平，(ii)补体C3水平低于阈值C3水平，和(iii)抗PS/PT IgG抗体之一
或两者的水平高于阈值抗PS/PT IgG抗体水平和/或生物样品中的LAC水平高于阈值LAC水平的组合表明血栓形成的治疗无效。(i)生物样品中PC4d水平处于或低于阈值PC4d水平，(ii)补体C3水平处于或高于阈值C3水平，和(iii)抗PS/PT IgG抗体的水平处于或低于阈值抗PS/PT IgG抗体水平和/或生物样品中的LAC抗体水平高于阈值LAC抗体水平的组合表明血栓形成的治疗有效。
[0008]在一个方面，本文提供了在患有或怀疑患有血栓形成的系统性红斑狼疮(SLE)受试者中检测标志物的方法，该方法包括确定：(a)来自受试者的生物样品中血小板结合的C4d(PC4d)蛋白的水平；(b)来自受试者的生物样品中的补体C3蛋白的水平；和(c)以下一项或两项：(i)来自受试者的生物样品中的抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原(PS/PT)IgG抗体的水平；和/或(ii)来自受试者的生物样品中的狼疮抗凝剂(LAC)的水平。
[0009]在一个方面，本文提供了治疗系统性红斑狼疮(SLE)受试者血栓形成的方法，包括确定：(a)来自受试者的第一血液样品中PC4d的水平；(b)来自受试者的第二血液样品中补体C3蛋白的水平；(c)以下一项或两项：(i)来自受试者的第三血液样本中抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原(PS/PT)IgG抗体的水平；和/或(ii)来自受试者的第四血液样品中狼疮抗凝剂(LAC)的水平，其中第一、第二、第三和第四血液样品可以相同或不同；和(d)用有效量的一种或多种选自以下的抗血栓治疗剂治疗受试者：羟氯喹、肝素、达肝素、磺达肝素、依诺肝素、华法林、达比加群、利伐沙班、阿哌西班、贝曲沙班和依度沙班。
[0010]在一个方面，本文提供了用于从系统性红斑狼疮(SLE)受试者制备样品的方法，该样品可用于分析涉及血栓形成的多种标志物，包括：(a)从受试者收集全血；(b)产生源自全血的血小板级分，包括裂解红细胞，并测量血小板级分中PC4d的水平；和(c)从全血中产生第一血清或血浆级分并测量所述血清或血浆级分中的C3水平；以及(d)从全血产生第二血清或血浆级分并测量所述第二血清或血浆级分中PS/PT复合抗体的水平。
附图说明
[0011]图1A
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B显示有任何血栓形成、静脉血栓形成和动脉血栓形成的患者百分比。综合分数(范围0
‑
3)对应于样本采集时出现的异常数量。图1A显示异常PC4d(>20净MFI)、低C3(<81mg/dl)和LAC(dRVVT>37秒)(n＝143)。图1B显示异常PC4d(>20净MFI)、低C3(<81mg/dl)和抗PS/PT IgG(>30单位)(n＝148)。
[0012]图2A
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E显示了风险因子和血栓形成的综合分数。给出了任何血栓形成、静脉血栓形成和动脉血栓形成的患者百分比。小图A显示异常PC4d(>20净MFI)和LAC(dRVVT>37秒)(n＝143)；小图B显示异常PC4d(>20净MFI)和低C3(<81mg/dl)(n＝148)；小图C显示异常PC4d(>20净MFI)和抗PS/PT IgG(>30单位)(n＝149)；小图D显示低C3(<81mg/dl)和LAC(dRVVT>37秒)(n＝143)；小图E显示低C3(<81mg/dl)和抗PS/PT IgG(>30单位)(n＝148)。
[0013]图3A
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B呈现数据，其展示随访(FU)期间PC4d持续本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于诊断患有系统性红斑狼疮(SLE)的受试者中血栓形成风险的方法，所述方法包括确定：(a)来自受试者的生物样品中血小板结合C4d(PC4d)蛋白的水平；(b)来自受试者的生物样品中补体C3蛋白的水平；和(c)以下的一项或两项：(i)来自受试者的生物样品中的抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原(PS/PT)IgG抗体的水平；和(ii)来自受试者的生物样品中的狼疮抗凝剂(LAC)的水平；其中(i)生物样品中PC4d蛋白水平高于阈值PC4d蛋白水平，(ii)生物样品中补体C3蛋白水平低于阈值C3蛋白水平，和(iii)生物样品中抗PS/PT IgG抗体水平高于阈值抗PS/PT IgG抗体水平和生物样品中LAC水平高于阈值LAC水平中一种或两种的组合表明受试者具有血栓形成的风险。2.根据权利要求1所述的方法，其中(c)包括确定来自受试者的生物样品中的抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原(PS/PT)IgG抗体的水平。3.一种用于预后患有系统性红斑狼疮(SLE)的受试者中血栓形成发展的方法，所述方法包括确定：(a)来自受试者的生物样品中血小板结合C4d(PC4d)蛋白的水平；(b)来自受试者的生物样品中补体C3蛋白的水平；和(c)以下的一项或两项：(i)来自受试者的生物样品中的抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原(PS/PT)IgG抗体的水平；和(ii)来自受试者的生物样品中的狼疮抗凝剂(LAC)的水平；其中(i)生物样品中PC4d蛋白水平高于阈值PC4d蛋白水平，(ii)生物样品中补体C3蛋白水平低于阈值C3蛋白水平，和(iii)生物样品中抗PS/PT IgG抗体水平高于阈值抗PS/PT IgG抗体水平和生物样品中LAC水平高于阈值LAC水平中一种或两种的组合表明受试者处于发展血栓形成的风险中。4.根据权利要求3所述的方法，其中(c)包括确定来自受试者的生物样品中的抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原(PS/PT)IgG抗体的水平。5.一种监测患有系统性红斑狼疮(SLE)并正在接受血栓形成治疗的受试者的血栓形成治疗的方法，包括确定：(a)来自受试者的生物样品中血小板结合C4d(PC4d)蛋白的水平；(b)来自受试者的生物样品中补体C3蛋白的水平；和(c)以下的一项或两项：(i)来自受试者的生物样品中的抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原(PS/PT)IgG抗体的水平；和(ii)来自受试者的生物样品中的狼疮抗凝剂(LAC)的水平；其中(i)生物样品中PC4d蛋白水平高于阈值PC4d蛋白水平，(ii)生物样品中补体C3蛋白水平低于阈值C3蛋白水平，和(iii)生物样品中抗PS/PT IgG抗体水平高于阈值抗PS/PT IgG抗体水平和生物样品中LAC水平高于阈值LAC水平中一种或两种的组合表明对血栓形成的治疗尚未有效；和/或其中(i)生物样品中PC4d蛋白水平处于或低于阈值PC4d蛋白水平，(ii)生物样品中补体C3蛋白水平处于或高于阈值C3蛋白水平，和(iii)生物样品中抗PS/PT IgG抗体水平处于
或低于阈值抗PS/PT IgG抗体水平和生物样品中LAC水平高于阈值LAC水平中一种或两种的组合表明对血栓形成的治疗已经有效。6.根据权利要求5所述的方法，包括确定：(a)来自受试者的生物样品中血小板C4d(PC4d)蛋白的水平；(b)来自受试者的生物样品中补体C3蛋白的水平；和(c)来自受试者的生物样品中的抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原(PS/PT)IgG抗体的水平；其中(i)生物样品中PC4d蛋白水平高于阈值PC4d蛋白水平，(ii)生物样品中补体C3标志物水平低于阈值C3蛋白水平，和(iii)生物样品中抗PS/PT IgG抗体水平高于阈值抗PS/PT IgG抗体水平的组合表明对血栓形成的治疗尚未有效；和/或其中(i)生物样品中PC4d蛋白水平处于或低于阈值PC4d蛋白水平，(ii)生物样品中补体C3蛋白水平处于或高于阈值C3蛋白水平，和(iii)生物样品中抗PS/PT IgG抗体水平处于或低于阈值抗PS/PT IgG抗体水平的组合表明对血栓形成的治疗已经有效。7.根据权利要求1所述的方法，其中PC4d蛋白水平在全血生物样品中。8.根据权利要求1所述的方法，其中补体C3蛋白水平在血清样品中。9.根据权利要求1所述的方法，其中抗PS/PT抗体的水平在血清、血浆或全血样品中。10.根据权利要求1所述的方法，其中PC4d蛋白水平使用C4d特异性抗体确定，并且补体C3蛋白水平使用C3特异性抗体确定。11.根据根据权利要求1所述的方法，其中抗PS/PT IgG抗体的水平使用酶联免疫吸附测定(ELISA)确定，其包括ELISA板，其中所述ELISA板用PS/PT包被。12.根据权利要求1所述的方法，其中LAC的水平被确定为阳性。13.根据权利要求1所述的方法，其中阈值PC4d蛋白水平≥20平均荧光强度(MFI)单位，使用流式细胞术测量。14.根据权利要求1所述的方法，其中阈值补体C3蛋白水平<81mg蛋白质/分升(mg/dl)血清，使用补体C3特异性抗体测量。15.根据权利要求1所述的方法，其中阈值抗
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PS/PT IgG抗体水平>30个单位，使用ELISA测量。16.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者是人类受试者。17.根据权利要求1所述的方法，其中PC4d蛋白水平、补体C3蛋白水平以及抗PS/PT IgG抗体和LAC水平之一或两者被测定2、3、4或更多次。18.根据权利要求1所述的方法，其中抗PS/PT IgG抗体水平被测定2、3、4或更多次。19.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者正在用羟氯喹(HCQ)治疗，并且其中所述方法进一步包括确定来自受试者的全血样品中的HCQ水平，其中HCQ水...

【专利技术属性】
技术研发人员：T，
申请(专利权)人：艾克斯肯股份有限公司，
类型：发明
国别省市：