针对抗穆勒氏管激素的抗体以及检测抗穆勒氏管激素的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种针对抗穆勒氏管激素的抗体以及检测抗穆勒氏管激素的试剂盒，涉及抗体技术领域。本发明专利技术公开的抗抗穆勒氏管激素的抗体包括重链互补决定区和轻链互补决定区。该抗体对抗抗穆勒氏管激素抗原的亲和力较好，使用该抗体检测抗穆勒氏管激素具有较好的灵敏度和特异性。本发明专利技术为检测抗穆勒氏管激素提供了更多以及性能更优的抗体选择。了更多以及性能更优的抗体选择。了更多以及性能更优的抗体选择。

【技术实现步骤摘要】
针对抗穆勒氏管激素的抗体以及检测抗穆勒氏管激素的试剂盒


[0001]本专利技术涉及抗体
，具体而言，涉及一种针对抗穆勒氏管激素的抗体以及检测抗穆勒氏管激素的试剂盒。

技术介绍

[0002]抗穆勒氏管激素(Anti-Mullerian Hormone，AMH)是转化生长因子β超家族中的一员，由Professor Alfred Jost于1974年首先发现。它是由两个70kD的蛋白亚基通过二硫键组成的二聚糖蛋白，相对分子质量为140kD，其主要作用是影响卵泡的成长和分化。人类编码AMH的基因位于19p13.3号染色体，大小2.4～2.8kb，含有5个外显子。研究表明，AMH的N端区域对保持蛋白完整活性起关键作用，在代谢运输过程中，AMH的特定位点(451位氨基酸)可以被切开，形成前体片段(pro-AMH，26-451aar)以及成熟片段(Mature AMH，452-560aar)，而切开的两个片段能够再通过非共价键的形式连接在一起。
[0003]AMH在性腺器官发育过程中起着重要作用，是男女性腺功能的重要标记物之一。在男性胎儿的塞尔托利氏细胞中，转录因子SOX-9(Transcription factor SOX-9，SOX9)可激活AMH与抗穆勒激素受体II型(Anti-Mullerian Hormone Receptor Type II，AMHR2)相结合并导致雄性胚胎中的穆勒氏管退化，从而阻止输卵管、子宫和阴道上部的形成，使男性生殖管道正常发育。而在女性胚胎中穆勒氏管将分化为子宫管和输卵管。AMH也是女性的窦前卵泡和小窦卵泡颗粒细胞的产物，从青春期开始，血清中AMH水平随时间慢慢降低，并在更年期降低到ELISA法检测不到的水平。AMH的正常值界于2-6.8ng/ml之间，数值越高，代表卵子存量越丰沛，适合受孕的黄金期较长，数值越低则卵巢功能越差。35岁过后AMH值会开始急剧下降，当低于0.7ng/ml时，表示卵子库存量已严重不足，几乎难以受孕。若数值大于6.8时，可考虑有多囊性卵巢症候群的体质。使用排卵针剂、药物时，卵巢也容易反应过度而排出过多的卵子，造成卵巢过度刺激症候群。因此可通过检测AMH水平来判断卵子存量及卵巢功能，并可以作为体外受精联合胚胎移植术(IVF)的卵巢反应性、多囊性卵巢综合征(PCOS)、卵巢过度刺激综合症(OHSS)的诊断依据。
[0004]目前国内外临床上检测AMH的常用方法有酶联免疫吸附法(ELISA)、电化学发光法和化学发光法。其中ELISA方法耗时长、灵敏度低、背景值高、易造成假阳性和假阴性结果，并且需要专业人员进行操作。电化学发光法和化学发光法如罗氏的ELECSYS AMH检测仪目前逐渐替换ELISA法，但价格昂贵，不适合单人份和小批量检测用，加上需要专门的仪器使用人员，维修和检测成本均较高，不适合大范围推广使用。上述方法都需要借助抗AMH的单克隆抗体，而目前AMH单克隆抗体产品较少，性能存在差异，特异性和灵敏度也存在缺陷。
[0005]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种抗穆勒氏管激素的抗体以及检测抗穆勒氏管激素的
试剂盒。本专利技术提供的抗体对抗穆勒氏管激素具有较好的亲和力，能够特异性结合抗穆勒氏管激素，该抗体针对抗穆勒氏管激素具有较高的灵敏度和特异性。
[0007]本专利技术是这样实现的：
[0008]一方面，本专利技术提供一种抗抗穆勒氏管激素的抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段具有如下互补决定区：
[0009]CDR-VH1：G-Y-R-X1-T-S-H-X2-M-X3；其中：X1是F或S；X2是Y或W；X3是H、Q或N；
[0010]CDR-VH2：A-X1-Y-P-G-X2-S-D-T-S-Y-N-X3；其中：X1是L或I；X2是N或D；X3是N、E或Q；
[0011]CDR-VH3：T-R-X1-G-G-X2-R-G；其中：X1是S或T；X2是I、V或L；
[0012]CDR-VL1：S-A-X1-S-S-X2-S-Y-M-Y；其中：X1是T或S；X2是I、V或L；
[0013]CDR-VL2：D-X1-S-N-X2-A-S；其中：X1是T或S；X2是I、V或L；
[0014]CDR-VL3：Q-Q-X1-S-S-Y-P-X2；其中：X1是Y或W；X2是L、V或I。
[0015]本专利技术提供的针对抗穆勒氏管激素的抗体或其功能性片段，具有上述互补决定区结构；上述抗体或其功能性片段能够特异性结合抗穆勒氏管激素，对抗穆勒氏管激素具有较好的亲和力，该抗体针对抗穆勒氏管激素具有较高的灵敏度和特异性。本专利技术为检测抗穆勒氏管激素提供了更多以及性能更优的抗体选择。
[0016]在可选的实施方式中，CDR-VH1中，X1是F；CDR-VH2中，X1是I；CDR-VL1中，X1是S。
[0017]本专利技术的实施例发现，当上述互补决定区中的上述突变位点为上述氨基酸残基时，该抗体对抗穆勒氏管激素表现出更好的亲和力。
[0018]在可选的实施方式中，CDR-VH1中，X2是Y。
[0019]在可选的实施方式中，CDR-VH1中，X2是W。
[0020]在可选的实施方式中，CDR-VH1中，X3是H。
[0021]在可选的实施方式中，CDR-VH1中，X3是Q。
[0022]在可选的实施方式中，CDR-VH1中，X3是N。
[0023]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X2是N。
[0024]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X2是D。
[0025]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X3是N。
[0026]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X3是E。
[0027]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X3是Q。
[0028]在可选的实施方式中，CDR-VH3中，X1是S。
[0029]在可选的实施方式中，CDR-VH3中，X1是T。
[0030]在可选的实施方式中，CDR-VH3中，X2是I。
[0031]在可选的实施方式中，CDR-VH3中，X2是V。
[0032]在可选的实施方式中，CDR-VH3中，X2是L。
[0033]在可选的实施方式中，CDR-VL1中，X2是I。
[0034]在可选的实施方式中，CDR-VL1中，X2是V。
[0035]在可选的实施方式中，CDR-VL1中，X2是L。
[0036]在可选的实施方式中，CDR-VL2中，X1是T。
[0037]在可选的实施方式中，CDR-VL2中，X1是S。
[0038]在可选的实施方式中，CDR-VL2中，X2是I。
[0039]在可选的实施方式中，CDR-VL2中，X2是V。
[0040]在可选的实施方式中，CDR-VL2中，X2是L。
[0041]在可选的实施方式中，CDR-VL3中，X1是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗抗穆勒氏管激素的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包括如下互补决定区：CDR-VH1：G-Y-R-X1-T-S-H-X2-M-X3；其中：X1是F或S；X2是Y或W；X3是H、Q或N；CDR-VH2：A-X1-Y-P-G-X2-S-D-T-S-Y-N-X3；其中：X1是L或I；X2是N或D；X3是N、E或Q；CDR-VH3：T-R-X1-G-G-X2-R-G；其中：X1是S或T；X2是I、V或L；CDR-VL1：S-A-X1-S-S-X2-S-Y-M-Y；其中：X1是T或S；X2是I、V或L；CDR-VL2：D-X1-S-N-X2-A-S；其中：X1是T或S；X2是I、V或L；CDR-VL3：Q-Q-X1-S-S-Y-P-X2；其中：X1是Y或W；X2是L、V或I。2.根据权利要求1所述的抗抗穆勒氏管激素的抗体或其功能性片段，其特征在于，CDR-VH1中，X1是F；CDR-VH2中，X1是I；CDR-VL1中，X1是S；优选的，CDR-VH1中，X2是Y；优选的，CDR-VH1中，X2是W；优选的，CDR-VH1中，X3是H；优选的，CDR-VH1中，X3是Q；优选的，CDR-VH1中，X3是N；优选的，CDR-VH2中，X2是N；优选的，CDR-VH2中，X2是D；优选的，CDR-VH2中，X3是N；优选的，CDR-VH2中，X3是E；优选的，CDR-VH2中，X3是Q；优选的，CDR-VH3中，X1是S；优选的，CDR-VH3中，X1是T；优选的，CDR-VH3中，X2是I；优选的，CDR-VH3中，X2是V；优选的，CDR-VH3中，X2是L；优选的，CDR-VL1中，X2是I；优选的，CDR-VL1中，X2是V；优选的，CDR-VL1中，X2是L；优选的，CDR-VL2中，X1是T；优选的，CDR-VL2中，X1是S；优选的，CDR-VL2中，X2是I；优选的，CDR-VL2中，X2是V；优选的，CDR-VL2中，X2是L；优选的，CDR-VL3中，X1是Y；优选的，CDR-VL3中，X1是W；优选的，CDR-VL3中，X2是L；优选的，CDR-VL3中，X2是V；
优选的，CDR-VL3中，X2是I；优选的，所述抗体或其功能性片段的各互补决定区选自如下突变组合1-49中的任意一种：
3.根据权利要求2所述的抗抗穆勒氏管激素的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段与抗抗穆勒氏管激素抗原以K
D
≤7.5
×
10-9
mol/L的亲和力结合；优选的，K
D
≤4.7
×
10-10
mol/L。4.根据权利要求1所述的抗抗穆勒氏管激素的抗体或其功能性片段，其特征在于，CDR-VH1中，X1是S；CDR-VH2中，X1是L；CDR-VL1中，X1是T；优选的，所述抗体或其功能性片段的各互补决定区选自如下突变组合50-55中的任意一种：5.根据权利要求1-4任一项所述的抗抗穆勒氏管激素的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体包括序列依次如SEQ ID NO:1-4所示的轻链骨架区FR1-L、FR2-L、FR3-L及FR4-L，和/或，序列依次如SEQ ID NO:5-8所示的重链骨架区FR1-H、FR2-H、FR3-H及FR4-H；优选的，所述抗体还包含恒定区；优选的，所述恒定区选自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgE和IgD中的任意一者的恒定区；优选的，所述恒定区的种属来源为牛、马、...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔鹏，何志强，孟媛，钟冬梅，叶庆妮，何雯雯，王晨，范凌云，
申请(专利权)人：东莞市朋志生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：