预防及治疗骨质疏松的组合物制造技术

本发明专利技术公开了一种预防及治疗骨质疏松的组合物。所述组合物由重量比为1.5：3.5的鹿筋胶原多肽和中药组成，其中中药由熟地黄、菟丝子、补骨脂各6份，杜仲、肉苁蓉、枸杞子、当归各2份和红花1份组成。本发明专利技术将鹿筋胶原多肽和中草药进行配伍，用鹿筋胶原多肽替代部分中药，减少中药的摄入量，降低中药对人体肝肾的毒副作用，同时减少鹿筋的用量，降低成本，制得的组合物可显著的干预骨质疏松症，表现出优异的干预骨质疏松作用。预骨质疏松作用。预骨质疏松作用。

【技术实现步骤摘要】
预防及治疗骨质疏松的组合物


[0001]本专利技术属于药物
，涉及一种预防及治疗骨质疏松的组合物。

技术介绍

[0002]骨质疏松多发于老年人及绝经后妇女，表现为骨量减少、骨的微观结构退化、骨密度降低、骨脆度增加。骨质疏松会引发严重的并发症，如疼痛和骨折，给患者的身心健康带来严重危害，其发病诱因涉及衰老、遗传、环境、激素、营养、生活方式等多种因素的相互作用。
[0003]目前，一些抗再吸收药物，例如雌二醇、双磷酸盐、降钙素，骨钙化药物如钙剂、维生素D及其衍生物已被用于临床治疗骨质疏松症。然而，雌激素长期使用会增加子宫癌的发生率，降钙素会对肝脏、神经系统产生不良反应，骨钙化药物价格昂贵且副作用较大。因此，需寻找安全有效的替代品用来治疗骨质疏松。
[0004]鹿筋是梅花鹿(Cervus nipport Temminck)的四肢干燥筋，药用价值高，可强筋健骨、治风湿关节等症。鹿筋中含有80％胶原蛋白，可以提高骨密度，增强骨强度达到预防及治疗骨质疏松的效果。然而，鹿筋价格昂贵，大量使用成本较高，使用群体有限。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种预防及治疗骨质疏松的组合物。该组合物将鹿筋胶原多肽和传统中药相结合，具有增强骨硬度，增加体重，促进骨形成的功效。
[0006]实现本专利技术目的的技术方案如下：
[0007]预防及治疗骨质疏松的组合物，由鹿筋胶原多肽和中药按重量比为1.5：3.5配制而成；所述的中药，按重量份数计，由以下成分组成：熟地黄6份、菟丝子6份、补骨脂6份、杜仲2份、肉苁蓉2份、枸杞子2份、当归2份、红花1份。
[0008]本专利技术中，所述的鹿筋胶原多肽可通过常规方法制备而成，具体可以为：
[0009]步骤1，将鹿筋按照料液比为1:15，加入3％柠檬酸溶液，室温浸泡24h以上；
[0010]步骤2，将步骤1溶胀后的鹿筋置于热水中煮化，冷却后离心取上清，浓缩后透析至pH＝7；
[0011]步骤3，在步骤2得到的透析液中添加碱性蛋白酶，酶解24h以上，酶解结束后，置于沸水中10min使酶灭活；
[0012]步骤4，将步骤3灭活后的酶解液离心取上清，冷冻干燥，制得鹿筋胶原多肽粉。优选地，步骤2的具体方法为：将溶胀后的鹿筋置于热水中煮3～4h，冷却后于4000r/min、离心30min，并采用双层纱布过滤，将过滤后上清浓缩后，用分子量为3500Da～10000Da透析袋进行透析，透析温度为20～45℃，透析时间2～5d，透析终点为蛋白溶液pH＝7。
[0013]优选地，步骤3中，碱性蛋白酶的添加量为1000U/g，酶解温度为40℃。
[0014]优选地，步骤4中，离心速度为4000r/min，离心时间为30min。
[0015]进一步地，本专利技术还提供上述组合物在制备预防及治疗骨质疏松的药物、保健品
或食品中的应用。
[0016]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：
[0017]中药中含有大量活性成分，具有一定抗骨质疏松的作用，价格低廉，适合长期服用。鹿筋药用价值高，但成本较高。本专利技术首次将鹿筋胶原多肽和中草药进行配伍，用鹿筋胶原多肽替代部分中药，减少中药的摄入量，降低中药对人体肝肾的毒副作用，同时减少鹿筋的用量，降低干预骨质疏松的成本。结果发现组合物可显著的干预骨质疏松症，有效增加骨质疏松模型小鼠的体重，增加骨质疏松模型小鼠的骨硬度，有效提高骨质疏松模型小鼠血清及心脏中碱性磷酸酶的活性，与中药组相比，表现出更为优异的干预骨质疏松作用。
附图说明
[0018]图1为各样品组对小鼠体重的影响结果图。
[0019]图2为各样品组对小鼠水平骨硬度(A)、垂直骨硬度的影响结果图(B)。其中，不同小写字母表示存在显著性差异(p<0.05)。
[0020]图3为各样品组对小鼠血清中ALP活力(A)及心脏中ALP活力(B)的影响结果图。其中，不同小写字母表示存在显著性差异(p<0.05)。
具体实施方式
[0021]下面结合具体实施例和附图对本专利技术做进一步详细描述。下述实施例中，采用的原料和试剂如无特殊说明，均可商业购买获得。采用的方法如无特殊说明，均为本领域常规使用的检测或实验方法。
[0022]实施例1
[0023]一、实验材料
[0024]1.材料与试剂
[0025]鹿筋(江苏省华广鹿业酒业有限公司)，熟地黄、菟丝子、补骨脂、杜仲、肉苁蓉、枸杞子、当归、红花(江苏徐州国信大药房)，柠檬酸(源叶生物科技有限公司)，碱性蛋白酶(160000U/g，诺维信生物技术有限公司)，透析袋(3500Da，源叶生物科技有限公司)，雌二醇(源叶生物科技有限公司)，碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，ALP)、蛋白浓度(Bicinchoninic Acid Assay，BCA)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
[0026]2.实验仪器
[0027]质构仪(TMS
‑
PRO，美国FTC公司)；多功能酶标仪(Tecan infinite 200pro，Tecan Austria GmbH公司)
[0028]3.实验动物
[0029]雄性KM小鼠(20
±
2g)购自斯贝福(北京)生物技术有限公司，动物合格证号为SYXK(苏)2017
‑
0044。小鼠在25℃的环境中适应一周，每天光/暗(12/12h)循环，并提供足够的饲料和饮用水。
[0030]二、实验方法
[0031]1.组合物的制备
[0032](1)鹿筋胶原多肽的制备
[0033]配制浓度为3％柠檬酸溶液，将鹿筋按照料液比为1:15(w/v)加入柠檬酸溶液中，
室温浸泡24h。将溶胀后的鹿筋置于热水中煮3h，冷却后于转速4000r/min，离心30min，并采用双层纱布过滤。将过滤后上清浓缩后，用分子量为3500Da透析袋进行透析，透析温度为35℃，透析时间2d，透析终点为蛋白溶液pH＝7。收集浓缩后蛋白液，加入碱性蛋白酶进行酶解，其中酶添加量为1000U/g，酶解温度为40℃，酶解时间为24h。酶解结束后，置于沸水中10min，使酶灭活。将灭活后的酶解液在4000r/min，离心30min，收集上清液，进行冷冻干燥获得鹿筋胶原蛋白肽粉。
[0034](2)中药的制备
[0035]熟地黄6份、菟丝子6份、补骨脂6份、杜仲2份、肉苁蓉2份、枸杞子2份、当归2份、红花1份。将各原料药清洗加水煎煮1小时，浓缩后冷冻干燥成中药粉。
[0036](3)组合物的制备
[0037]将鹿筋胶原蛋白肽和中药按照质量1.5:3.5配制成组合物。
[0038]2.模型的建立
[0039]小鼠尾部使用胶带固定，前肢着地，后肢悬空，保证小鼠身体纵轴(即头尾向)与水平面角度成30度，悬挂在支架上28d，建立废用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.预防及治疗骨质疏松的组合物，其特征在于，由鹿筋胶原多肽和中药按重量比为1.5：3.5配制而成；所述的中药，按重量份数计，由以下成分组成：熟地黄6份、菟丝子6份、补骨脂6份、杜仲2份、肉苁蓉2份、枸杞子2份、当归2份、红花1份。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的鹿筋胶原多肽的制备方法如下：步骤1，将鹿筋按照料液比为1:15，加入3%柠檬酸溶液，室温浸泡24 h以上；步骤2，将步骤1溶胀后的鹿筋置于热水中煮化，冷却后离心取上清，浓缩后透析至pH=7；步骤3，在步骤2得到的透析液中添加碱性蛋白酶，酶解24h以上，酶解结束后，置于沸水中10min使酶灭活；步骤4，将步骤3灭活后的酶解液离心取上清，冷冻干燥，制得鹿筋胶原...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐鑫，汪丹，文超婷，徐向昕，沈梦瑜，刘雨，吴银银，周婉丽，吉涛，叶志强，张芝颐，朱俊龙，段萌新，吴茂伟，于泳，刘东明，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：