柑橘木虱胰岛素样多肽基因DcILP2在防治柑橘木虱中的用途制造技术

本发明专利技术属于生物防治技术领域，具体涉及柑橘木虱胰岛素样多肽基因DcILP2在防治柑橘木虱中的用途。本发明专利技术要解决的技术问题是为控制柑橘木虱提供一种新选择。本发明专利技术通过柑橘木虱的胰岛素样多肽基因的研究，确定了其在调控TOR通路和柑橘木虱卵巢发育中的用途。TOR通路和柑橘木虱卵巢发育中的用途。TOR通路和柑橘木虱卵巢发育中的用途。

【技术实现步骤摘要】
柑橘木虱胰岛素样多肽基因DcILP2在防治柑橘木虱中的用途


[0001]本专利技术属于生物防治
，具体涉及柑橘木虱胰岛素样多肽基因DcILP2在防治柑橘木虱中的用途。

技术介绍

[0002]柑橘木虱Diaphorina citri(Kuwayama)属同翅目(Homoptera)扁木虱科(Liviidae)，属于不完全变态昆虫，其生活史包括卵、一龄若虫、二龄若虫、三龄若虫、四龄若虫、五龄若虫、成虫7个阶段。柑橘木虱是柑橘类果树主要害虫，其若虫分泌的白色蜜露会引发煤污病，影响寄主植物的光合作用，其成虫若虫均可作为媒介携带柑橘黄龙病(HLB)的致病菌柑橘黄龙病菌Candidatus Liberibacter asiaticus(CLas)，导致柑橘黄龙病(HLB)在柑橘植株间的广泛传播。黄龙病会导致植株生长受阻，果实质量下降，严重影响经济效益。目前国内外对柑橘木虱的防治方法主要有物理防治、生物防治和化学防治等，探究和运用分子生物学技术进行柑橘木虱防治具有重要意义。柑橘木虱雌性成虫在取食嫩梢后才可以持续进行产卵(没有嫩梢完全不产卵)，但嫩梢刺激雌性柑橘木虱生殖的分子机制仍不清楚。胰岛素信号系统能够感知营养状态，ILP(insulin like peptides)是胰岛素信号通路的上游因子，ILPs能够与胰岛素受体(IR)结合，通过下游一系列级联反应，调节昆虫发育、寿命、新陈代谢、滞育和雌性生殖等各种生理过程，TOR信号通路以被证明在触发柑橘木虱的产卵行为中起重要作用，其中20E、JH也参与其中，胰岛素信号通路在TOR信号通路上游且能够起到对该通路的调节作用。研究胰岛素信号对研究木虱生殖能力具有重要作用，将来开发药剂针对该信号能抑制木虱产卵，对控制田间木虱种群具有重要作用。

技术实现思路

[0003]本专利技术要解决的技术问题是为控制柑橘木虱提供一种新选择。
[0004]本专利技术的技术方案是柑橘木虱胰岛素样多肽基因DcILP2在防治柑橘木虱中的用途。
[0005]具体的，所述基因DcILP2的编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.14所示。
[0006]进一步的，所述基因DcILP2的核苷酸序列如SEQ ID No.13所示。
[0007]SEQ ID No.13基因DcILP2的核苷酸序列
[0008]atggttcacgttccgctgatgacatgcgtccttcttctagtagtcctgtcagtcactgcagacgacctatccagggacaaaattccggacagcattcgcgtctgttctggcgctctgtcatcagccttgtcgtggtggtgctcacgcgtatcggaaattaaaatgctcgattcgaataagataaagagaggttcaagtgcctgggacattgtgctggaagagcttacagctgcagggttgtcttacaccaccaatgaacccgaaggcgttatcaccatacagggtgcatcagacgagggcgatgagttcaacgatgttctacctgtttatgagacacccatgtacaatagattgcggcgtagtggtattgcctctgaatgttgcaagaaagcttgcacattgttcaccctgttgtcttattgtcctggaggtaggaaacaatga
[0009]SEQ ID No.14基因DcILP2的编码蛋白的氨基酸序列
[0010]MVHVPLMTCVLLLVVLSVTADDLSRDKIPDSIRVCSGALSSALSWWCSRVSEIKMLDSNKIKRGSSAWD
IVLEELTAAGLSYTTNEPEGVITIQGASDEGDEFNDVLPVYETPMYNRLRRSGIASECCKKACTLFTLLSYCPGGRKQ
[0011]进一步的，所述用途为柑橘木虱胰岛素样多肽基因DcILP2在调控柑橘木虱卵巢发育中的用途。
[0012]进一步的，所述用途为柑橘木虱胰岛素样多肽基因DcILP2在调控TOR通路和/或生殖过程中的用途。
[0013]具体的，所述用途为柑橘木虱胰岛素样多肽基因DcILP2在调控TOR通路的关键基因DcRheb和/或下游生殖关键基因DcVg表达中的用途。
[0014]其中，所述的调控为正调控。
[0015]具体的，在所述用途中，用将基因DcILP2的dsRNA干扰DcILP2的表达。
[0016]进一步的，所述dsRNA干扰基因的靶区域核苷酸序列如SEQ ID No.15所示。
[0017]具体的，将基因DcILP2的dsRNA点滴柑橘木虱胸部腹面，干扰靶基因。
[0018]本专利技术的有益效果：本专利技术通过柑橘木虱的胰岛素样多肽基因的研究，确定了其在调控TOR通路、柑橘木虱卵巢发育和生殖中的用途。本专利技术为防治柑橘木虱，进而减轻柑橘黄龙病的传播提供了一种新选择。
附图说明
[0019]图1、嫩梢和成熟叶片的照片；(A)出芽后一周内的嫩梢；(B)出芽后20天的成熟叶片。
[0020]图2、DmILP1
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7、DcILP2氨基酸序列比对。DcILP2的开放阅读框为444bp，编码147个氨基酸，其蛋白前肽存在4个保守区域，即信号肽(SP)、b链、c肽和a链。预测DcILP2的SP区域位于从n端开始的氨基酸1
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21处。SP后面是b链，b链上有两个由其他11个氨基酸隔开的保守的半胱氨酸(Cys)，在这11个氨基酸的第4位是亮氨酸(leu)，这与D.melanogaster高度一致。c肽位于b链后，以KR、KK和RR为代表的双碱基蛋白裂解位点通常存在于起始和末端，在DcILP2中也发现了这些位点。在a链中，DcILP2有4个Cys，第4个Cys之前的氨基酸是TyR(TyR)，这是一个相当保守的基序，同样与D.melanogaster高度一致。
[0021]图3、脊椎动物和无脊椎动物胰岛素样肽的系统进化树。分析了16种物种的26个ILP氨基酸序列(表1)，这些物种包括脊椎动物和无脊椎动物。对于ILPs，脊椎动物中的胰岛素信号配体可以分为胰岛素和胰岛素样生长因子(IGF)，它们各自发挥不同的功能。昆虫体内通常存在多种类型的ILP，将家蚕定义为一个外群，比较了几种不同昆虫的ILPs，结果表明，DcILP2与同为同翅目的Nilaparvata lugens的ILP2具有很高的同源性，这为其功能研究提供了一些参考。
[0022]图4、DcILP2在取食嫩枝和成熟叶片后1、3、5、7天的表达情况。
[0023]图5、dsDcILP2(基因DcILP2的dsRNA)处理后雌性柑橘木虱的繁殖力及相关基因表达情况；(A)dsDcILP2和dsEGFP(基因EGFP的dsRNA)点滴处理后DcILP1的RNAi效率(B)dsRNA处理后雌性柑橘木虱的繁殖力统计。
[0024]图6、dsDcILP2和ds本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.柑橘木虱胰岛素样多肽基因DcILP2在防治柑橘木虱中的用途。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述基因DcILP2的编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.14所示。3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述基因DcILP2的核苷酸序列如SEQ ID No.13所示。4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述用途为柑橘木虱胰岛素样多肽基因DcILP2在调控柑橘木虱卵巢发育中的用途。5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述用途为柑橘木虱胰岛素样多肽基因DcILP2在调控TOR通路和/或生殖过程中的用途。6.如权利要求5所述的用途，...

【专利技术属性】
技术研发人员：桑文，王姿烨，王飞凤，邱宝利，王兴民，吴建辉，于琳，
申请(专利权)人：岭南现代农业科学与技术广东省实验室，
类型：发明
国别省市：