MUC19基因在胃肝样腺癌筛查或诊断中的应用制造技术

本发明专利技术涉及MUC19基因在胃肝样腺癌筛查或诊断中的应用。属于基因检测技术领域。本发明专利技术通过外显子测序和生物信息学分析，筛选出了胃肝样腺癌特异性高频突变基因为MUC19基因。本发明专利技术研究发现MUC19基因和胃肝样腺癌细胞的增殖、侵袭和转移相关，MUC19基因能够促进癌细胞的增生、侵袭及转移、抑制癌细胞凋亡，可以作为胃肝样腺癌治疗靶点。胃肝样腺癌治疗靶点。胃肝样腺癌治疗靶点。

【技术实现步骤摘要】
MUC19基因在胃肝样腺癌筛查或诊断中的应用


[0001]本专利技术涉及基因检测
，尤其是涉及一种MUC19基因在胃肝样腺癌筛查或诊断中的应用。

技术介绍

[0002]胃癌是在全世界发病率排第五位、死亡率排第四位的恶性肿瘤。胃肝样腺癌(Hepatoid Adenocarcinoma of stomach，HAS)是一种罕见的胃癌亚型，仅占所有胃癌的0.17
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15％，其发病人群主要集中在亚洲地区。与传统的胃癌相比，胃肝样腺癌表现出更强的侵袭性行为，大多数患者在就诊时已出现肝转移，丧失了手术切除的机会。此外，目前尚无针对胃肝样腺癌的标准治疗方案和有效的药物靶点，多数患者经治疗后预后不佳，五年生存率仅为9％。
[0003]目前，组织病理学是诊断胃肝样腺癌的金标准，镜下观察其组织形态与肝癌相似，呈小梁状或实心巢状排列，被血管窦分隔。此外，AFP、SALL4、GCP3、HepPar
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1、Arginase
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1等肝细胞的特异性指标和CDX2等肠道肿瘤的指标均可在HAS中呈阳性，上述指标的免疫组化检测也是诊断HAS重要依据。
[0004]然而，近年来，越来越多的证据表明胃肝样腺癌的真实发病率被严重低估，由于缺乏特异性的诊断标志物及诊断标准不明确，导致许多患者被诊断为其他的病理类型。因此，探索胃肝样腺癌发生发展的具体分子机制，寻找特异性诊断标志物及有效的治疗靶点，具有重要的临床意义。

技术实现思路

[0005]基于现有技术中缺少胃肝样腺癌特异性诊断标志物及有效的治疗靶点的现状，本专利技术提供一种MUC19基因在胃肝样腺癌筛查或诊断中的应用。
[0006]本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：
[0007]本专利技术首先提供MUC19基因作为胃肝样腺癌的特异性标志物的应用。
[0008]本专利技术研究发现MUC19基因在胃肝样腺癌中高频突变，且其蛋白表达水平在胃肝样腺癌中与肝癌特异性标志物AFP呈强相关性。MUC19促进胃癌细胞表达AFP，并增强胃癌细胞的恶性表型。
[0009]此外，本专利技术研究发现MUC19基因可以激活Wnt信号通路，从而参与调控疾病进展。
[0010]本专利技术还提供一种检测MUC19基因突变的检测试剂在制备胃肝样腺癌筛查或诊断的试剂或试剂盒中的应用，所述检测试剂能够检测MUC19基因是否发生突变。
[0011]在本专利技术的一个实施方式中，所述检测试剂选自适用于如下方法中的任意一种或其组合以检测MUC19基因突变：限制性片段长度多态性法、变性梯度凝胶电泳、等位基因特异PCR、DNA测序法、DNA芯片检测法、飞行时间质谱法或单链构象多态性分析。
[0012]在本专利技术的一个实施方式中，所述DNA测序法为全外显子测序法或Sanger测序法。
[0013]本专利技术还提供一种胃肝样腺癌筛查的试剂或试剂盒，其含有检测MUC19基因突变
的检测试剂。
[0014]在本专利技术的一个实施方式中，所述检测试剂选自适用于如下方法中的任意一种或其组合以检测MUC19基因突变：限制性片段长度多态性法、变性梯度凝胶电泳、等位基因特异PCR、DNA测序法、DNA芯片检测法、飞行时间质谱法和单链构象多态性分析。
[0015]在本专利技术的一个实施方式中，所述DNA测序法为全外显子测序法或Sanger测序法。
[0016]本专利技术还提供一种胃肝样腺癌辅助诊断的试剂或试剂盒，其含有检测MUC19基因突变的检测试剂。
[0017]在本专利技术的一个实施方式中，所述检测试剂选自适用于如下方法中的任意一种或其组合以检测MUC19基因突变：限制性片段长度多态性法、变性梯度凝胶电泳、等位基因特异PCR、DNA测序法、DNA芯片检测法、飞行时间质谱法和单链构象多态性分析。
[0018]在本专利技术的一个实施方式中，所述DNA测序法为全外显子测序法或Sanger测序法。
[0019]在本专利技术的一个实施方式中，所述试剂或试剂盒所检测的样本类型为来自待测主体的体液、组织或毛发。
[0020]在本专利技术的一个实施方式中，所述待测主体为人。
[0021]在本专利技术的一个实施方式中，所述体液选自血液或唾液。
[0022]本专利技术还提供一种MUC19基因的表达抑制剂在制备治疗或预防胃肝样腺癌的药物中的应用。
[0023]在本专利技术的一个实施方式中，优选地，所述MUC19基因的表达抑制剂包括特异靶向MUC19基因的sgRNA。
[0024]本专利技术通过外显子测序和生物信息学分析，筛选出了胃肝样腺癌特异性高频突变基因为MUC19基因。通过本专利技术的研究可以绘制胃肝样腺癌的基因突变图谱；提供一种有效的诊断胃肝样腺癌的分子标志物；探索胃肝样腺癌发生发展的分子机制。
[0025]本专利技术研究发现MUC19基因和胃肝样腺癌细胞的增殖、侵袭和转移相关，MUC19基因能够促进癌细胞的增生、侵袭及转移、抑制癌细胞凋亡，可以作为胃肝样腺癌治疗靶点。
[0026]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点及有益效果：
[0027]1、本专利技术通过外显子测序首次发现MUC19作为胃肝样腺癌的特异性标志物；
[0028]2、本专利技术发现胃肝样腺癌组织中MUC19与AFP的表达量呈正相关，且MUC19促进了胃癌的恶性表型，揭示了MUC19促进胃肝样腺癌发生发展的机制，为胃肝样腺癌的治疗提供了潜在的药物靶点。
附图说明
[0029]图1胃肝样腺癌的高频突变基因；
[0030]图2A.MUC家族基因在胃肝样腺癌中的突变及MUC1；B.MUC19在胃肝样腺癌中的具体突变位点
[0031]图3Sanger测序验证MUC19在胃肝样腺癌的突变；
[0032]图4MUC19调控胃癌细胞表达AFP；
[0033]图5MUC19增强胃癌细胞的恶性表型；
[0034]图6MUC19激活Wnt/β
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catenin信号通路。
具体实施方式
[0035]下面结合附图和具体实施例对本专利技术进行详细说明。
[0036]实施例1
[0037]外显子测序发现MUC19基因在胃肝样腺癌中发生特异性高频突变
[0038]1、收集25对胃肝样腺癌患者的肿瘤及癌旁对照组织，进行全外显子测序，分析胃肝样腺癌的高频突变事件并绘制基因突变图谱，发现TP53、TTN，MUC19、CDC27等基因在胃肝样腺癌中发生高频突变，结果如图1所示。
[0039]2、对TCGA数据库中295例普通胃腺癌、366例肝细胞肝癌及224结肠癌的基因突变进行分析，分别与25例胃肝样腺癌的突变图谱进行比较，发现MUC19在上述肿瘤中均无高频突变，结果如图1所示。
[0040]3、进一步统计胃肝样腺癌中检测到的所有MUC家族基因的突变频率，发现25例HAS患者中共有10例携带MUC19突变，MUC19基因为已知基因，具体突变位点见图2B，MUC19的突变频率本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.MUC19基因作为胃肝样腺癌的特异性标志物的应用。2.一种检测MUC19基因突变的检测试剂在制备胃肝样腺癌筛查或诊断的试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述检测试剂能够检测MUC19基因是否发生突变。3.根据权利要求2所述的一种检测MUC19基因突变的检测试剂在制备胃肝样腺癌筛查或诊断的试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述检测试剂选自适用于如下方法中的任意一种或其组合以检测MUC19基因突变：限制性片段长度多态性法、变性梯度凝胶电泳、等位基因特异PCR、DNA测序法、DNA芯片检测法、飞行时间质谱法或单链构象多态性分析。4.根据权利要求2所述的一种检测MUC19基因突变的检测试剂在制备胃肝样腺癌筛查或诊断的试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述DNA测序法为全外显子测序法或Sanger测序法。5.一种胃肝样腺癌筛查或诊断的试剂或试剂盒，其特征在于，其含有检测MUC19基因突变的检测试剂。6.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘天舒，朱梦璇，张家裕，李倩，李伟，曹鑫，余一袆，王妍，崔越宏，于珊，彭轲，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：