葡萄糖-6-磷酸的锰掺杂硫化锌量子点的合成方法及应用技术

本发明专利技术提供葡萄糖

【技术实现步骤摘要】
葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点的合成方法及应用


[0001]本专利技术涉及功能化纳米材料与纳米
，具体是葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点的合成方法及应用。

技术介绍

[0002]糖尿病是一种代谢性疾病，以高血糖为特征，且糖尿病的生物标志物具有多样性。其中被证实的有自身抗体等，但是对糖尿病固有的异质性的及时诊断能力亟待提高。在糖尿病的发病机制中，其中蛋白质糖基化起着关键作用，糖基化作为蛋白质修饰的一种，广泛存在于人体蛋白质中。蛋白质糖基化对细胞间信号转导、免疫调节和细胞分化等细胞过程具有普遍影响。有研究表明，蛋白质异常糖基化与生理异常和病理有关，目前一些糖基化蛋白已成为某些疾病的生物标志物。因此，分析蛋白质糖基化，了解疾病发病机制，进而确定疾病生物标志物，对疾病的治疗及诊断具有重大意义。质谱技术的高通量、高灵敏度和即时性，使其在糖肽研究中被广泛应用。然而，在有的生物样品中，因为糖肽的丰度非常低，直接检测时，非糖肽信号易掩盖糖肽信号。因此，在质谱分析之前，使糖肽达到高效富集是具有重要意义的。
[0003]现有技术中为捕获低丰度的糖肽，已经建立了多种策略。其中被广泛应用的是亲水相互作用液相色谱法。但是传统的基于亲水相互作用液相色谱法的材料制备方法费时费力，合成步骤繁杂，并且制备过程中常需要高温高压条件，具备一定的危险性。
[0004]因此，发展一种流程简单的亲水相互作用液相色谱法类量子点纳米材料，通过富集糖肽寻找新的糖尿病标志物以提高糖尿病的及时诊断能力是一种新的需求。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点的合成方法及应用，以解决现有技术中的问题。
[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：
[0007]葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点的合成，包括以下步骤：
[0008]S1：将七水硫酸锌和四水氯化锰、去离子水混合搅拌，在氮气氛围下搅拌30
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40min；加入九水硫化钠与去离子水混合溶液，并继续搅拌30
‑
40min，得到锰掺杂硫化锌量子点；
[0009]S2：将葡萄糖
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磷酸二钠溶解于含有乙腈、三氟乙酸和去离子水的混合溶液中，加入锰掺杂硫化锌量子点，并在25℃搅拌6h；
[0010]S3：将步骤S2所得的产物用去离子水和乙醇洗涤，并在50℃真空干燥8
‑
12h，得到葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点。
[0011]进一步的，步骤S1中七水硫酸锌和四水氯化锰的质量比为18:1；所述七水硫酸锌的浓度为0.3125mol/L；所述四水氯化锰的浓度为0.025mol/L。
[0012]进一步的，七水硫酸锌和九水硫化钠的质量比为18:15；九水硫化钠的浓度为
1.25mol/L。
[0013]进一步的，步骤S2中取葡萄糖
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磷酸二钠与去离子水的质量体积比为10mg:1mL；步骤S3中乙腈、三氟乙酸和去离子水的体积比为15:0.03:10。
[0014]进一步的，葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点的合成的应用，其特征在于，用于寻找糖尿病标志物的方法，具体步骤如下：将三氟乙酸、乙腈和去离子水按照体积比为1:9:99配置成上样缓冲液，将葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点、缓冲液、目标糖基化肽段溶液在37℃下富集30min；用磷酸、去离子水和乙腈混合的缓冲混合液进行洗涤，然后加入去离子水和乙腈混合的洗脱缓冲液，37℃下洗脱30min，离心分离获取上清液，进行MALDI
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TOFMS或者nanoLC
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MS/MS检测。
[0015]进一步的，缓冲混合液由0.5％体积比的磷酸、14.5％体积比的去离子水和85％体积比的乙腈组成。
[0016]进一步的，洗脱缓冲液由50％体积比的乙腈和50％体积比的去离子水组成。
[0017]目前对血糖中蛋白质糖基化和磷酸化的高效分离分析有助于阐明糖尿病的发病机理，质谱是目前应用最广泛的准确识别和定位糖基化、磷酸化位点的平台，然而，大量未修饰肽的共存限制了利用质谱对糖基化、磷酸化位点的研究，因此需要在质谱分析前对样品中的糖肽或磷酸肽进行有效富集。
[0018]目前最主要的捕捉磷酸肽的策略为金属氧化物亲和层析和固定化金属亲和层析，亲水作用液相色谱法具有无偏富集糖肽的性能且易于与质谱联用，是糖肽富集最常用的方法之一
[0019]本专利技术中利用廉价易得、来源丰富，具有优良的生物相容性和亲水性的碳水化合物D
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葡萄糖
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磷酸钠盐(G6PNa2)用于制备亲水探针，作为一种容易获得的生命代谢物，具有优异亲水性的G6PNa2通过其磷酸基团和金属阳离子之间的亲和原理与锰掺杂硫化锌量子点结合，以构建能够同时高效富集糖肽/磷酸肽的功能化探针。
[0020]本专利技术通过一锅法工艺，以硫酸锌、氯化锰和硫化钠为前体，以D
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葡萄糖
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磷酸钠盐(G6PNa2)为修饰物，制备了一种葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点纳米材料，合成过程简便且安全；且功能化修改已集成到一个步骤的过程中，在室温下螯合葡萄糖
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磷酸后，对糖肽表现出超高的特异性和选择性。
[0021]进一步的，锰掺杂硫化锌量子点为磁性锰掺杂硫化锌量子点，制备方法包括以下步骤：
[0022]1)将六水氯化铁、乙二醇超声搅拌，加入无水乙酸钠搅拌30min；转移至带有聚四氟乙烯内衬的水热反应釜中，190
‑
195℃保温15h，冷却至18
‑
25℃，通过磁分离，依次用去离子水、乙醇洗涤3
‑
5次，真空干燥，得到磁性四氧化三铁；
[0023]2)多巴胺盐酸盐加入去离子水得到溶液A；将三羟甲基氨基甲烷和磁性四氧化三铁加入离子水与乙醇混合溶液中得到溶液B；将溶液A和B混合，18
‑
25℃下搅拌16h；通过磁分离，依次用去离子水、乙醇洗涤3
‑
5次，真空干燥，得到多巴胺改性磁性四氧化三铁；
[0024]3)在超声作用下将多巴胺改性磁性四氧化三铁、异丙醇混合搅拌；加入三乙胺搅拌2min得到三乙胺混合溶液；将七水硫酸锌和四水氯化锰、去离子水混合搅拌，在氮气氛围下搅拌30min，加入将九水硫化钠、去离子水混合搅拌30min，转移入三乙胺混合溶液，190
‑
195℃保温10h；通过磁分离技术得到磁性锰掺杂硫化锌量子点，乙醇洗涤后真空干燥。
[0025]进一步的，六水氯化铁、无水乙酸钠、乙二醇的摩尔体积比为0.01mol:0.088mol:120mL。
[002本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点的合成方法，其特征在于，所述合成方法包括以下步骤：S1：将七水硫酸锌和四水氯化锰、去离子水混合，在氮气氛围下搅拌30
‑
40min；加入九水硫化钠和去离子水混合溶液，并继续搅拌30
‑
40min，得到锰掺杂硫化锌量子点；S2：将葡萄糖
‑6‑
磷酸二钠溶解于含有乙腈、三氟乙酸和去离子水的混合溶液中，加入锰掺杂硫化锌量子点，并在18
‑
25℃搅拌6h；S3：将步骤S2所得的产物用去离子水和乙醇洗涤，真空干燥后得到葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点。2.根据权利要求1所述的葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点的合成方法，其特征在于，七水硫酸锌和四水氯化锰的质量比为18:1；七水硫酸锌和九水硫化钠的质量比为18:15。3.根据权利要求1所述的葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点的合成方法，其特征在于，七水硫酸锌的浓度为0.3125mol/L，四水氯化锰的浓度为0.025mol/L，九水硫化钠的浓度为1.25mol/L。4.根据权利要求1所述的葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点的合成方法，其特征在于，步骤S2中葡萄糖
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磷酸二钠与去离子水的质量体积比为10mg:1mL；步骤S2中乙腈、三氟乙酸和去离子水的体积比为15:0.03:10。5.根据权利要求1所述的葡萄糖
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磷酸的锰掺杂硫化锌量子点的合成方法，其特征在于，锰掺杂硫化锌量子点为磁性锰掺杂硫化锌量子点，制备方法包括以下步骤：1)将六水氯化铁、乙二醇超声搅拌，加入无水乙酸钠搅拌30min；转移至带有聚四氟乙烯内衬的水热反应釜中，190
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195℃保温15h，冷却至18
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25℃，通过磁分离，依次用去离子水、乙醇洗涤3
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5次，真空干燥，得到磁性四氧化三铁；2)多巴胺盐酸盐加入去离子水得到溶液A；将三羟甲基氨基甲烷和磁性四氧化三铁加入离子水与乙醇混合溶液中得到溶液B；将溶液A和B混合，18
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25℃下搅拌16h；通过磁分离，依次用去离子水、乙醇洗涤3

【专利技术属性】
技术研发人员：王涵文，谢泽虎，
申请(专利权)人：常州磐诺仪器有限公司，
类型：发明
国别省市：