一种唾液保存液及使用方法技术

本发明专利技术涉及无创基因检测诊断技术领域，具体来说是一种唾液保存液及使用方法，唾液保存液，包括0.1

【技术实现步骤摘要】
一种唾液保存液及使用方法


[0001]本专利技术涉及无创基因检测诊断
，具体来说是一种唾液保存液及使用方法。

技术介绍

[0002]当前科研人员和临床医生主要用抗凝血提取DNA，然而抗凝血保存时间不宜过长，容易形成血块，给提取带来了不便。提取血液中的DNA还需专业的人员进行采血，需要配备注射器、消毒用具等。并且有些老人小孩对抽血比较抗拒，无法随时随地采集样本。近些年来，科研和医药领域逐渐从唾液中提取DNA，人体唾液99％是水，有机物有唾液淀粉酶、粘多糖、粘蛋白及溶菌酶等，无机物有钠离子、钾离子、钙离子、氯离子等，同时还含有多种细菌、口腔脱落细胞等。唾液中的口腔细胞，包含着人体的全套基因组，唾液DNA与血液里的DNA一致，而唾液样本采集对个体无创伤，无痛，可多次取样，便于操作。
[0003]但是唾液的成分复杂，酶、粘液、细菌等杂质会导致唾液DNA的降解和阻碍DNA的提取，还大大降低唾液的新鲜度，所以我们需要一款可以长时间保存唾液DNA的保存液。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于解决现有技术的不足，提供常温、
‑
20℃低温下均可有效保存核酸的一种安全环保的唾液保存液。既可以常温下至少保存唾液14天，也可以在
‑
20℃下至少保存唾液30天，且保存液不结冰。保存液结冰后融化会破坏核酸，几次冻融就会让核酸的含量与完整性遭到破坏，本专利技术防冻不结冰的保存液可以长期有效地保护核酸不受破坏。
[0005]为了实现上述目的，设计一种唾液保存液，包括0.1
‑
0.2mol/L的氯化钠溶液，体积比为0.03
‑
0.06％的Proclin300，0.1
‑
0.5g/L的庆大和两性霉素溶液，5
‑
15mM的乙二胺四乙酸二钠盐溶液，30
‑
50mM的三(羟甲基)氨基甲烷
‑
盐酸缓存溶液，体积比为3
‑
8％的Trition
‑
X 100，120
‑
150mL/L的乙二醇溶液。
[0006]优选地，保存液所有组分均用无菌去离子水溶解。
[0007]优选地，所述保存液pH为7.0
‑
8.0。
[0008]又专利技术了一种保存液的使用方法，使用时，唾液与保存液质量体积比为1:5。
[0009]本专利技术同现有技术相比，其优点在于：
[0010]1.本专利技术保存液在常温保存唾液14天、
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20℃保存唾液30天，仍可提取出与新鲜唾液浓度纯度相当的DNA。
[0011]2.保存液在
‑
20℃下保持液体，不结冰，避免保存液结冰后融化破坏核酸，导致核酸的含量与完整性遭到破坏这种情况发生。
[0012]3.本产品不含胍盐，叠氮化钠等有毒有害的防腐剂，使用的是防腐剂Proclin300，安全环保。
具体实施方式
[0013]下面结合实施例对本专利技术作进一步说明，本专利技术的原理对本专业的人来说是非常清楚的。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0014]取新鲜唾液，保存到本产品的保存液中，唾液与保存液的比例约为1：5，充分混匀，密封常温保存。
[0015]1.测试不同保存条件下所提取出的DNA情况
[0016]实施例1(常温保存0天)
[0017]使用天根的磁珠法通用型基因组DNA提取试剂盒对新鲜唾液(保存0天的唾液)进行DNA的提取。
[0018]实施例2(常温保存7天)
[0019]使用天根的磁珠法通用型基因组DNA提取试剂盒对保存7天的唾液进行DNA的提取。
[0020]实施例3(常温保存14天)
[0021]使用天根的磁珠法通用型基因组DNA提取试剂盒对保存14天的唾液进行DNA的提取。
[0022]实施例3(
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20℃保存30天)
[0023]使用天根的磁珠法通用型基因组DNA提取试剂盒对
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20℃保存30天的唾液进行DNA的提取。
[0024]对比例1(生理盐水保存唾液)
[0025]使用天根的磁珠法通用型基因组DNA提取试剂盒对生理盐水保存14天的唾液进行DNA的提取。
[0026]不同上述实施例1
‑
4以及对比例1所提取的核酸的测试说明：
[0027]采用eppendorf D30核酸蛋白测定仪测定实施例1
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4以及对比例1中提取出的核酸浓度和纯度，其中，核酸纯度为A260与A280的比值，A260表示核酸在波长为260nm下的吸光值，A280表示核酸在波长为280nm下的吸光值，纯DNA纯度理论值为1.8，大于2.0表明有RNA污染，小于1.6表明有蛋白质污染。实验结果在表1中显示，结果如下：
[0028]表1
[0029][0030]从实施例1、2、3可知，唾液常温下在本专利技术保存液中保存0天、7天、14天提取出的DNA浓度分别为32.63μg/mL、32.47μg/mL、30.5μg/mL，纯度为1.77、1.71、1.72，三种情况下，提取出DNA的浓度和纯度基本没有差别。说明将唾液保存在本专利技术的保存液中，至少可以保存14天，提取出的DNA浓度和纯度与新鲜唾液中提取出的DNA浓度和纯度持平。
[0031]从实施例4可知，唾液
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20℃下在本专利技术保存液中保存30天提取出的DNA浓度为31.1μg/mL，纯度为1.72，与新鲜唾液中提取出的DNA浓度和纯度基本没有差别。说明将唾液保存在本专利技术的保存液中，
‑
20℃下至少可以保存30天，提取出的DNA浓度和纯度与新鲜唾液中提取出的DNA浓度和纯度持平。
[0032]从对比例1可知，唾液常温下在生理盐水中保存14天提取出的DNA浓度为4.6μg/mL，纯度为1.29，远低于新鲜唾液中提取出的DNA浓度和纯度。说明生理盐水中保存的唾液中的核酸已经大部分被分解破坏。
[0033]2.测试不同保存液在不同温度下的结冰情况
[0034]本专利技术保存液和生理盐水在2～8℃、
‑
10℃、
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20℃温度下保存30天后，其保存液是否结冰的情况。结果在表2中显示。
[0035]表2
[0036][0037]从表2可知，在
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20℃时加入唾液的本专利技术保存液可以保持液态不结冰，而对比例1的保存液生理盐水在
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10℃时结冰。说明本专利技术保存液可以保持
‑
20℃下保持液态，不结冰。
[0038]以上所述仅为本专利技术的较佳实施例，并不用以限制本专利技术，凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种唾液保存液，其特征在于，包括0.1
‑
0.2mol/L的氯化钠溶液，体积比为0.03
‑
0.06%的Proclin300，0.1
‑
0.5g/L的庆大和两性霉素溶液，5
‑
15mM的乙二胺四乙酸二钠盐溶液，30
‑
50mM的三（羟甲基）氨基甲烷
‑
盐酸缓存溶液，体积比为3

【专利技术属性】
技术研发人员：朱德新，张献新，安淑英，吴迪，
申请(专利权)人：力因精准医疗产品上海有限公司，
类型：发明
国别省市：