一种改善大脑认知记忆和神经炎症的复合脂质体及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种改善大脑认知记忆和神经炎症的复合脂质体及其制备方法，属于脂质体制备技术领域。制备了能够同时负载疏水性物质姜黄素和亲水性物质表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的脂质体，并在此基础上，利用乳铁蛋白对其进行表面修饰，通过静电相互作用采用透明质酸进一步稳定体系。本发明专利技术方法所得的复合脂质体具有良好的稳定性和自由基清除效率，可以显著抑制脂多糖诱导的认知功能障碍，用于改善大脑认知记忆和神经炎症。善大脑认知记忆和神经炎症。善大脑认知记忆和神经炎症。

【技术实现步骤摘要】
一种改善大脑认知记忆和神经炎症的复合脂质体及其制备方法


[0001]本专利技术涉及脂质体制备
，特别是涉及一种改善大脑认知记忆和神经炎症的复合脂质体及其制备方法。

技术介绍

[0002]随着人类生活方式的改变，神经系统疾病已成为人类健康的威胁。神经炎症是触发和维持与许多神经疾病相关的神经退行性过程的关键病理事件。研究表明，食品中的天然成分在缓解神经系统疾病方面已发挥出很大潜力。
[0003]姜黄素是提取自姜黄根茎的疏水多酚，具有抗氧化和抗炎等生物学活性和药理活性，能够通过抑制NF
‑
κB与淀粉样斑块结合，从而减少阿尔茨海默病的发生和发展。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是一种水溶性多酚，具有良好的抗氧化活性，可清除体内自由基。姜黄素和EGCG均表现出对铁诱导的毒性的抵抗作用，在健康促进方面已显示出协同作用，但是姜黄素和EGCG具有较低的稳定性和较高的药代动力学差异，从而削弱了其功效。

技术实现思路

[0004]为提高不同极性多酚姜黄素和EGCG的生物利用度及生物活性，本专利技术使用乳铁蛋白和透明质酸修饰脂质体，并对姜黄素和EGCG进行共包埋。本专利技术制备的脂质体具有抗氧化能力强的特点，能够改善细胞线粒体功能障碍，降低细胞内ROS的产生，缓解突触功能障碍与神经元损伤，抑制小胶质细胞的激活，改善脂多糖诱导的神经炎症及其相关的认知功能障碍。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术提供一种改善大脑认知记忆和神经炎症的复合脂质体，包括载药脂质体和外层修饰乳铁蛋白和透明质酸的复合脂质体，所述载药脂质体为共包埋有姜黄素和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的脂质体。
[0007]本专利技术提供所述改善大脑认知记忆和神经炎症的复合脂质体的制备方法，包括如下步骤：
[0008]将磷脂、胆固醇、吐温80和姜黄素溶解在混合溶剂中，充分溶解后转移到圆底烧瓶中，利用旋转蒸发仪将溶剂蒸干，向上述样品中加入EGCG水溶液，旋蒸后使用超声细胞破碎仪使体系分散，得到均匀分散的脂质体溶液，过滤，使用氮气封装，将乳铁蛋白溶液、透明质酸溶液依次逐滴添加到脂质体溶液中，搅拌，使其充分反应，获得复合脂质体。
[0009]进一步地，所述制备方法具体包括如下步骤：
[0010]步骤1:采用薄膜超声法，将磷脂(优选蛋黄磷脂)、胆固醇、吐温80和姜黄素溶解在有机溶剂氯仿和乙醇的混合溶液(二者体积比2:1)中。
[0011]步骤2:将步骤1所得的混合溶液转移到圆底烧瓶中，利用旋转蒸发仪将溶剂蒸发干，将样品放到真空干燥箱中过夜，将有机试剂彻底蒸发掉。
[0012]步骤3:向步骤2所得样品中加入EGCG水溶液，旋蒸水合样品。
[0013]步骤4:将步骤3所得溶液放置在超声细胞破碎仪中使体系分散，得到均匀分散的脂质体溶液。
[0014]步骤5:使用滤膜(0.22μm)过滤，除去未包封的多酚(姜黄素和EGCG)，整个过程避光处理，最后用氮气封装。
[0015]步骤6:称取乳铁蛋白溶液溶解于蒸馏水中，超声处理使乳铁蛋白充分溶解，得到乳铁蛋白溶液。
[0016]步骤7:将步骤6所得的乳铁蛋白溶液逐滴添加到脂质体溶液中，置于磁力搅拌器中搅拌，使其充分反应。
[0017]步骤8:称取透明质酸溶液溶解于蒸馏水中，完全溶解。
[0018]步骤9:将步骤8所得透明质酸溶液逐滴添加到步骤7所得乳铁蛋白修饰后的脂质体溶液中，置于磁力搅拌器中搅拌，使其充分反应，最终制备的脂质体为复合脂质体。
[0019]进一步地，所述脂质体溶液中姜黄素与ECGC的质量比为1：1；磷脂与胆固醇的质量比为2：1
‑
18：1；磷脂与吐温80的质量比为10：1
‑
10：3；磷脂与姜黄素和ECGC的混合物的质量比为14：1
‑
6：1。
[0020]进一步地，所述乳铁蛋白溶液浓度为15mg/mL，添加量为0
‑
0.9mL/10mL脂质体，添加量不为0；所述透明质酸浓度为1mg/mL，添加量为0.3
‑
0.5mL/10mL脂质体。
[0021]进一步地，所述超声时间为5
‑
20min，优选为15min。
[0022]进一步地，所述混合溶剂为氯仿与乙醇的混合溶剂，二者体积比为2：1。
[0023]进一步地，旋蒸时间为30
‑
50min。
[0024]进一步地，整个过程避光处理。
[0025]本专利技术的制备方法中，优选方案为：所用蛋黄磷脂和胆固醇的质量比为6:1；蛋黄磷脂和吐温80的质量比为10:3；蛋黄磷脂和多酚(姜黄素和EGCG)的质量为10:1；制备复合脂质体的水合时间为40min；制备复合脂质体中乳铁蛋白的添加量为0.3mL/10mL脂质体；制备复合脂质体中透明质酸的添加量为0.5mL/10mL脂质体。
[0026]本专利技术所制备的脂质体平均粒径131.53
±
0.258nm，呈均匀的球形，分散均匀，且与游离的姜黄素和EGCG混悬液相较，乳铁蛋白修饰的负载姜黄素和EGCG的脂质体具有更高的DPPH自由基清除率。
[0027]本专利技术还提供所述改善大脑认知记忆和神经炎症的复合脂质体在制备改善大脑认知记忆和神经炎症药物中的应用。
[0028]进一步地，所述复合脂质体用于制备抑制脂多糖诱导的认知功能障碍的药物。
[0029]本专利技术公开了以下技术效果：
[0030]本专利技术制备了能够同时负载疏水性物质姜黄素和亲水性物质EGCG的脂质体，并在此基础上，利用乳铁蛋白对其进行表面修饰，通过静电相互作用采用透明质酸进一步稳定体系。本专利技术方法所得的复合脂质体具有良好的自由基清除效率，可以显著抑制脂多糖诱导的认知功能障碍，用于改善大脑认知记忆和神经炎症。
[0031]相较于姜黄素和EGCG混合悬浮液，负载姜黄素和EGCG的复合脂质体具有更强的DPPH自由基清除能力，能够改善细胞线粒体功能障碍，降低细胞内ROS的产生，缓解小鼠的突触功能障碍与神经元损伤，抑制小胶质细胞的激活，改善脂多糖(LPS)诱导的神经炎症及
其相关的认知功能障碍。
附图说明
[0032]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0033]图1为透射电镜下的不同脂质体的形貌图，其中，A为空白脂质体，B为负载姜黄素和EGCG的脂质体，C为乳铁蛋白修饰的负载姜黄素和EGCG的脂质体；D为透明质酸稳定的乳铁蛋白修饰的负载姜黄素和EGCG的脂质体。
[0034]图2为不同样品的DPPH自由基清除率。结果表示为平均值
±
标准方差(Mean
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种改善大脑认知记忆和神经炎症的复合脂质体，其特征在于，包括载药脂质体和外层修饰的乳铁蛋白和透明质酸，所述载药脂质体为共包埋有姜黄素和表没食子儿茶素没食子酸酯的脂质体。2.一种权利要求1所述改善大脑认知记忆和神经炎症的复合脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将磷脂、胆固醇、吐温80和姜黄素溶解在混合溶剂中，将溶剂蒸干，加入表没食子儿茶素没食子酸酯水溶液，旋蒸后超声分散，得到均匀分散的脂质体溶液，过滤，使用氮气封装，将乳铁蛋白溶液、透明质酸溶液依次逐滴添加到脂质体溶液中，搅拌，使其充分反应，获得复合脂质体。3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述脂质体溶液中姜黄素与表没食子儿茶素没食子酸酯的质量比为1：1；磷脂与胆固醇的质量比为2：1
‑
18：1；磷脂与吐温80的质量比为10：1
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10：3；磷脂与姜黄素和表没食子儿茶素没食子酸酯的混合物的质量比为14：1
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【专利技术属性】
技术研发人员：刘夫国，徐文浛，马德雪，王玉堂，刘学波，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：